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中国免疫学会第四届学术大会

作者：李建伟崔尚金于康震贾永清唐秀英刘宝全 GuanY. PeirisJ.S.M ShortridgeK.F 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院香港大学微生物系香港大学微生物系香港大学微生物系

本研究对24株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)欧亚大陆分离株的免疫原性基因——血凝素(HA)基因进行了序列测序和分析,并绘制了进化树。结果表明,本文所研究的所有欧亚大陆病毒的HA基因皆属于H9N2 AIV欧亚分支,分为Y280—like、G1—like、Y439... 详细信息

本研究对24株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)欧亚大陆分离株的免疫原性基因——血凝素(HA)基因进行了序列测序和分析,并绘制了进化树。结果表明,本文所研究的所有欧亚大陆病毒的HA基因皆属于H9N2 AIV欧亚分支,分为Y280—like、G1—like、Y439—like三个亚分支。由同源性比较结果和进化树

关键词：禽流感病毒分子演化免疫原性

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欧亚大陆H9N2亚型禽流感病毒分子演化的研究

欧亚大陆H9N2亚型禽流感病毒分子演化的研究

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中国免疫学会第四届学术大会

作者：李建伟崔尚金于康震刘宝全 GuanY. ShortridgeK.F. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院香港大学微生物系香港大学微生物系

流感病毒属正粘病毒科,流感病毒属,分为A、B、C三个型,是单股负链RNA病毒,其中B、C型流感病毒一般只感染人类且规模较小,而A型流感病毒除对人类外,对禽类、猪、马和海洋哺乳动物都具有感染性,而且流行广泛,蔓延迅速,危害严重。禽流行性... 详细信息

流感病毒属正粘病毒科,流感病毒属,分为A、B、C三个型,是单股负链RNA病毒,其中B、C型流感病毒一般只感染人类且规模较小,而A型流感病毒除对人类外,对禽类、猪、马和海洋哺乳动物都具有感染性,而且流行广泛,蔓延迅速,危害严重。禽流行性感冒(简称禽流感,Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类的感染和/或疾病综合症。引起AI的病原称为禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)。

关键词：禽流感病毒 AIV 分子演化欧亚大陆

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外源基因在甲醇酵母Pichia pastoris中的表达策略

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动物医学进展 2002年第6期23卷 24-27页

作者：钱平李祥敏仇华吉陈焕春华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室武汉430070 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

甲醇酵母 Pichia pastoris表达系统是近几年发展起来的一个真核表达系统 ,在其乙醇氧化酶基因启动子的控制下 ,某些外源基因的表达量可达克 /升以上。虽然该系统是一种优良的表达系统 ,但有许多因素影响外源基因在其中的表达 ,包括外源... 详细信息

甲醇酵母 Pichia pastoris表达系统是近几年发展起来的一个真核表达系统 ,在其乙醇氧化酶基因启动子的控制下 ,某些外源基因的表达量可达克 /升以上。虽然该系统是一种优良的表达系统 ,但有许多因素影响外源基因在其中的表达 ,包括外源基因的拷贝数及其整合到酵母染色体的位置和方式、m RNA的 5′和 3′端非翻译区、转录起始密码子的上下文、外源基因 A+ T的组成与转录和翻译的阻断、密码子的偏爱性、信号肽序列的特性、产物的稳定性、宿主菌的生理特性、培养基成份和培养条件等。在应用该表达系统过程中 ,这些因素均需予以考虑。本文就这些因素作了概述和讨论。

关键词：外源基因甲醇酵母表达策略

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鸡传染性支气管炎病毒的快速检测

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中国预防兽医学报 2002年第5期24卷 386-390页

作者：刘思国康丽娟江国托刘明春孔宪刚杨宏伟刘忠贵李从寿宋春青霍兰享卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 大连市畜牧兽医技术服务中心大连三仪生物工程研究所沈阳农业大学畜牧兽医学院吉林省畜禽总公司东北农业大学动物医学院四川省西南民族学院天津市西青区王稳庄镇兽医站天津市西青区南河镇畜牧兽医站

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法。通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明 ,两次PCR产物的大小为 0 .7kb和 0 .5kb ,与实际设计相符。而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性。用IBV... 详细信息

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法。通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明 ,两次PCR产物的大小为 0 .7kb和 0 .5kb ,与实际设计相符。而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性。用IBVHB(华北 )株感染SPF鸡后 ,应用我们所建立的PCR方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的IBV ,在SPF鸡感染IBV后的 2 1天仍然能够检测到IBV的基因组 ,Southernblot杂交试验证明了我们获得的PCR产物为IBV的核蛋白基因。对 30份自然感染病料的检测表明 ,本实验所建立的PCR方法检测阳性数为 15份 ,阳性率为 5 0 % (15 /30 ) ;鸡胚接种检测的阳性数为 17份 ,阳性率为 5 6 .7% (17/30 ) ;IFA检测的阳性数为 11份 ,阳性率为 36 .7% (11/30 )。PVR检测法与鸡胚接种方法的阳性符合率为 93.3% (14/15 ) ,统计学分析表明 ,P >0 .0 5 ,差异不显著 ,而PCR检测法与IFA的阳性符合率为 6 0 % (9/15 )。结果证明本实验所建立的PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒快速检测

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H9N2亚型禽流感病毒中国分离株血凝素基因分子进化的研究

H9N2亚型禽流感病毒中国分离株血凝素基因分子进化的研究

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第五届全国农业生物化学与分子生物学学术交流会

作者：李建伟崔尚金于康震唐秀英刘宝全 Guan Y.Shortridge K.F. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 东北农业大学动物医学院(哈尔滨) 香港大学微生物系(香港特别行政区)

禽流感病毒(AIV)正粘病毒科A型流感病毒.本文介绍了对我国内地分离的16株H9N2亚型禽流感病毒的血凝素基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.

关键词：禽流感病毒血凝素 H9N2亚型家禽流行病分子进化

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鸽源新城疫病毒的分离与鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2002年第5期 22-22页

作者：熊永忠王秀荣曹殿军刘培欣张勇东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

实验从疑为新城疫或禽流感发病的鸽群中分离到一病毒性病原,该病原具有血凝活性,通过电镜观察、血凝抑制试验、RT-PCR等一系列试验确定引起该鸽群发病的是新城疫病毒.现报告如下.

关键词：鸽新城疫病毒分离鉴定

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我国禽流感防制研究进展

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中国兽医学报 2001年第1期21卷 103-106页

作者：于康震付朝阳崔尚金步志高唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单.禽流感可表现为亚临床、轻度呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死性疾病等多种形式... 详细信息

行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单.禽流感可表现为亚临床、轻度呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死性疾病等多种形式.世界各地历次由特定毒株引起的禽流感的暴发和流行,均招致禽只的大量死亡和生产性能急剧下降,造成了巨大的经济损失[1].1997年香港H5N1和1999年内地和香港H9N2禽流感感染人事件的发生,更突出地显示了禽流感的公共卫生意义.

关键词：禽流行性感冒流行病学诊断技术疫苗防制中国

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NDV La Sota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较

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中国预防兽医学报 2001年第3期23卷 199-202页

作者：孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉陈杰曲鲁江刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨15001 东北农业大学动物医学院

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒(NDV)特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明 ,V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前 3天左右出现 ,但除高峰期 (1周左... 详细信息

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒(NDV)特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明 ,V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前 3天左右出现 ,但除高峰期 (1周左右 )外 ,其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota疫苗免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgG抗体水平高于V4免疫鸡 ,IgG抗体高峰较V4免疫鸡提前约 2周出现 ,攻毒后 ,LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著 ,而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。

关键词：新城疫血清抗体疫苗免疫鸡攻毒鸡

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检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法的建立

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中国预防兽医学报 2001年第1期23卷 23-25页

作者：孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉孔宪刚刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

本试验以新城疫病毒 (NDV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心 ,庶糖密度梯度离心提纯的NDV为包被抗原 ,以纯化的鸡IgG、IgM及IgA免疫兔 ,制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、IgM及IgA ,分别建立了检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法 ... 详细信息

本试验以新城疫病毒 (NDV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心 ,庶糖密度梯度离心提纯的NDV为包被抗原 ,以纯化的鸡IgG、IgM及IgA免疫兔 ,制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、IgM及IgA ,分别建立了检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法 ,抗原最适包被量为 1.34μg/孔。酶标兔抗鸡IgG、IgM、IgA的最佳稀释度分别为 1∶40 0 ,1∶40 0 ,1∶10 0 ;血清样品检测IgG时 ,最适工作浓度为 1∶40 0 ,检测IgM时为 1∶5 0。该方法具有特异性强、灵敏度度、快速简便等优点 ,适合于对各类新城疫特异性抗体的动态监测和大批检测。

关键词：新城疫病毒 IgG IgM IgA 间接ELISA 检测方法

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鸡CD4蛋白基因的克隆及其mRNA在淋巴器官中的表达

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中国兽医学报 2001年第5期21卷 482-484页

作者：刘胜旺孔宪刚丁忠庆刘永刚童光志马云燕中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ... 详细信息

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ,法氏囊淋巴细胞不表达鸡 CD4分子 m RNA,其他器官中均有表达。通过序列分析表明 ,本试验扩增得到的基因为编码鸡

关键词： CD4基因克隆mRNA 淋巴器官表达鸡

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