检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 25-27页

作者：邓国华邓国华唐秀英田国彬于康震于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心哈尔滨150001

利用杆状病毒表达禽流感病毒型特异性抗原－核蛋白，并就重组核蛋白作为禽流感琼扩诊断抗原地特异性和敏感性及作为抗原的其它特性进行了研究，并与普通全病毒琼扩抗原进行了应用比较试验，对３５４份现地可疑血清样品进行了检测，结果... 详细信息

利用杆状病毒表达禽流感病毒型特异性抗原－核蛋白，并就重组核蛋白作为禽流感琼扩诊断抗原地特异性和敏感性及作为抗原的其它特性进行了研究，并与普通全病毒琼扩抗原进行了应用比较试验，对３５４份现地可疑血清样品进行了检测，结果表明：该抗原可以特异性地定性检测出所有１５个禽流感病毒亚型的抗血清，与普通全病毒琼扩抗原的检测结果一致，但沉淀线更细密、清晰，保存方便；与我国广泛流行的１５种禽类其它病原体的抗血清没有任何交叉反应，表明该重组核蛋白作为禽流感琼扩抗原特异、敏感、生物安全性更可靠和生产成本更低廉，有利于进一步扩大禽流感疫情调查范围和加大监测力度。

关键词：重组核蛋白琼扩抗原检测

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禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)全基因克隆及序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第3期22卷 232-235页

作者：张建林于康震陈化兰唐秀英田国斌中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心哈尔滨150001

本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定... 详细信息

本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定。序列分析结果表明 ,所扩增到的 8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架。GD1/96株与 1997年香港禽流感事件中的 4株香港流感病毒分离株 (分别来自人、鸡、鸭和鹅 )的HA基因的高度同源性说明它们可能起源于同一种系 ,但NS基因的差异说明它们分属于不同的基因群系。GD1/96株与香港流感病毒分离株的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性较低 ( 6 3.9%～ 98.1%) ,而香港流感病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸序列的同源性很高 ( 96 .5 %～ 10 0 %) ,且香港各流感病毒分离株的NA均缺失 5 7个核苷酸 ( 19个氨基酸 )残基。因此 ,内地H5N1分离株GD1/96与

关键词：禽流感病毒分离株全基因克隆序列分析

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禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)HA基因序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第1期22卷 25-30页

作者：贾永清陈化兰邓国华唐秀英田国斌于康震刘保全东北农业大学动物医学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

采用RT_PCR技术,以A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)RNA为模板,扩增了1.73kb 的HA 全基因cDNA。将HAcDNA克隆后进行了序列测定,测序结果表明所扩增的1728 个核苷酸片段包含了完整的HA基因的开放阅读框架和上下游引物序列、蛋白质合成的... 详细信息

采用RT_PCR技术,以A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)RNA为模板,扩增了1.73kb 的HA 全基因cDNA。将HAcDNA克隆后进行了序列测定,测序结果表明所扩增的1728 个核苷酸片段包含了完整的HA基因的开放阅读框架和上下游引物序列、蛋白质合成的起始密码子和终止密码子。核苷酸序列比较分析结果表明:A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1) 与A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)有11 个核苷酸差异,同源率99.4% ;与A/HongKong/156/97(H5N1) 有25 个核苷酸差异,同源率98.6 % ;与A/Chicken/HongKong/258/97 (H5N1) 有30 个核苷酸差异,同源率98.3% ;它们的氨基酸序列同源率依次分别为99 .2 % 、98.6% 和98.1% 。受体结合位点的氨基酸序列完全一致;HA裂解位点氨基酸序列也完全一致,各有5 个碱性氨基酸插入。这说明上述4 个流感病毒分离株可能来自同一个祖先,具有相同的毒力和相似的生物学特性。

关键词：禽流感病毒 HA 基因序列分析

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牛流行热病毒JB76H株G蛋白基因核苷酸序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第1期22卷 43-47页

作者：金红李媛于康震严隽端刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

通过反转录_聚合酶链反应(RT_PCR),从中国北京分离株牛流行热病毒JB76H 基因组RNA中扩增出主要保护性抗原糖蛋白G的cDNA。采用Sanger’s 双脱氧末端终止法测定cDNA 片段的核苷酸序列,并推导出氨基酸序列。G基因全长为1872 个碱基,单一... 详细信息

通过反转录_聚合酶链反应(RT_PCR),从中国北京分离株牛流行热病毒JB76H 基因组RNA中扩增出主要保护性抗原糖蛋白G的cDNA。采用Sanger’s 双脱氧末端终止法测定cDNA 片段的核苷酸序列,并推导出氨基酸序列。G基因全长为1872 个碱基,单一的开放阅读框架编码623 个氨基酸的多肽。将测得的序列与澳大利亚六个分离株进行比较,发现我国分离株与澳大利亚分离株间同源性为91% ,低于澳大利亚各分离株之间的同源性(98% ～99% ) 。同时氨基酸序列比较结果也显示,我国分离株与澳大利亚分离株间同源性(93.9% )低于澳大利亚各分离株之间的同源性(96% ～98 %) 。

关键词：牛流行热病毒核苷酸序列 JB76H株 G蛋白

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间接免疫荧光抗体法对鸡传染性支气管炎病毒进行抗原定位

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 82-85页

作者：刘思国尹训南李广兴康丽娟江国托孔宪刚刘忠贵卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

应用间接免疫荧光抗体（ＩＦＡ）法对ＩＢＶ感染后ＳＰＦ鸡不同脏器进行了跟踪检测。结果发现，在ＩＢＶ感染后的第７天，在气管、肾脏、脾脏、肺脏和肝脏等组织细胞中均不同程度地出现特异性的荧光。表明在感染的初期，ＩＢＶ具有广泛... 详细信息

应用间接免疫荧光抗体（ＩＦＡ）法对ＩＢＶ感染后ＳＰＦ鸡不同脏器进行了跟踪检测。结果发现，在ＩＢＶ感染后的第７天，在气管、肾脏、脾脏、肺脏和肝脏等组织细胞中均不同程度地出现特异性的荧光。表明在感染的初期，ＩＢＶ具有广泛的组织嗜性；在感染的第１０天，只有肾脏、气管或肺脏中呈现荧光，而以肾脏中的荧光最强，特异性荧光持续时间最长的是肾脏，可达１４天，病毒存在于肾小管间质内浸润的淋巴细胞和巨噬细胞胞浆中。实验结果证实，ＩＦＡ方法具有直观、特异等特点，在抗原定位上具有独特的优点。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒间接免疫荧光抗体法抗原定位

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反义技术研究简述

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中国预防兽医学报 2000年第2期22卷 159-160页

作者：崔尚金宋晓华于康震刘尚高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094

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H3亚型禽流感病毒分离株与变异株的生物学特性

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 85-89页

作者：崔尚金于康震唐秀英刘明田国彬李建伟刘尚高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094

本研究对分离到的Ｈ３Ｎ８禽流感病毒株（分离株Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９８，以下简称Ｊ１株）和传代过程中发生变异的变异株（Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９９，以下简称Ｊ２株）进行了生物学和病理学特性的初步研究，发现在... 详细信息

本研究对分离到的Ｈ３Ｎ８禽流感病毒株（分离株Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９８，以下简称Ｊ１株）和传代过程中发生变异的变异株（Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９９，以下简称Ｊ２株）进行了生物学和病理学特性的初步研究，发现在相同的时间内，Ｊ１株病毒致死鸡胚数量明显高于Ｊ２株病毒，病毒ＨＡ的滴度也明显高于Ｊ２；Ｊ１株的ＩＰＶＩ为１．４４，而Ｊ２为０．６４；毒株的致病性试验与ＳＰＦ感染鸡的器官变化表明Ｊ１组的病理学变化较Ｊ２组明显，且主要的嗜器官为肺、肝、法氏囊、胸腺、脾等主要的免疫器官；本研究还对ＳＰＦ感染鸡的病变器官进行了病原学检测、病理组织检测和电镜观察。结果表明两者存在较明显的差异。

关键词：禽流感病毒 H3N8 生物学特征

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牛传染性支气管炎病毒PCR诊断方法的研究

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黑龙江畜牧兽医 2000年第4期 1-2页

作者：张桂红童光志王柳仇华吉赵晓岩张绍杰刘宝全东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特... 详细信息

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特异性片段。用此引物对其同属的伪狂犬病毒 (PRV)、马立克氏病毒 (MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒 (ILTV)进行扩增 ,均未见特异性条带 ,证明该引物是特异的 ;检测PCR的敏感性表明 ,该法可检测出 3 pg的病毒DNA。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gB基因 PCR诊断方法

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西北地区新城疫病毒分离株F基因的克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第5期22卷 351-355页

作者：梁荣曹殿军陈杰李健强中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 西北农林科技大学动物科学与动物医学学院杨凌712100

从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RN... 详细信息

从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RNA ,RT_PCR扩增其融合蛋白 (F)基因N端 90 8bp的片段 ,经回收、鉴定后 ,克隆到pGEM_T载体上进行核苷酸序列测定。对各毒株核苷酸及推导的氨基酸进行序列和同源性的比较 ,结果表明所有毒株在该区段没有缺失和插入 ,但有多处碱基置换。各分离毒株之间同源性很高 (平均 96 .8% ) ,与疫苗毒株同源性较低 (82 .5 %～ 85 .8% ) ,而分离自青海省的 3个毒株与其他毒株的同源性均较低 (平均 88.0 % )。以 389bp核苷酸绘制系统发育树 ,证实西北地区的新城疫是由基因型Ⅶc和一个新发现的基因型Ⅸ引起的。

关键词： NDV F基因克隆测序系统发育树西北地区新城疫病毒

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干酪乳杆菌胸苷酸合成酶基因的分子克隆与序列测定

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 55-58页

作者：王春凤王春凤秦泽荣孙哲崔尚金崔尚金何昭阳刘尚高中国农业大学动物医学院北京100094 吉林农业大学动物科技学院长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

本研究的目的是以干酪乳杆菌Ｌ．ｃａｓｅｉ３４１０３染色体ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术扩增出胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，　ｔｈｙＡ）基因，利用玻璃奶回收纯化试剂盒回收纯化ｔｈｙＡ基因，并... 详细信息

本研究的目的是以干酪乳杆菌Ｌ．ｃａｓｅｉ３４１０３染色体ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术扩增出胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，　ｔｈｙＡ）基因，利用玻璃奶回收纯化试剂盒回收纯化ｔｈｙＡ基因，并将其克隆入以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒ｐＷ４２５ｅ，再转化Ｘ５１感受态细胞，筛选阳性克隆，提取质粒，进行酶切鉴定、ＰＣＲ扩增鉴定，并对ｔｈｙＡ基因片段进行测序，与已知序列进行同源性比较，结果表明成功克隆了ｔｈｙＡ基因，全长约１．１ｋｂ，与国外报道的ｔｈｙＡ基因同源性达９９％。这为构建以ｔｈｙＡ基因为选择压力的非抗生素抗性穿梭表达载体奠定了基础。

关键词：胸苷酸合成酶基因分子克隆序列测定

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