检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 1999年第5期19卷 456-458页

作者：李铭孔宪刚卢景良刘宝全东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

用从健康猪胸腺提取的Ｔ淋巴细胞作抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经３次克隆，共获得１０株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。以细胞反应特异性试验、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ... 详细信息

用从健康猪胸腺提取的Ｔ淋巴细胞作抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经３次克隆，共获得１０株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。以细胞反应特异性试验、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析、流式细胞计数（ＦＣＭ）等方法，确定了对猪Ｔ细胞表面抗原特异性反应的单抗（ＭｃＡｂｓ），其中２Ｄ９、３Ｂ１０可以识别相对分子质量５００００的Ｔ细胞膜蛋白，能标记９６％的胸腺细胞、８９％的外周血Ｔ淋巴细胞、８７％的脾Ｔ淋巴细胞，其特性与猪ＣＤ２抗原相符；另一株１Ｇ１２可识别相对分子质量６３０００的Ｔ细胞膜蛋白，能标记９８％的胸腺细胞、９１％的外周血Ｔ淋巴细胞、７８％的脾Ｔ淋巴细胞，其特性与猪ＣＤ５抗原相符。

关键词：猪 T淋巴细胞表面抗原单克隆抗体

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鸡传染性支气管炎病毒中国流行株免疫原基因的分子克隆与基因分型

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中国免疫学杂志 1998年第1期14卷 57-60页

作者：江国托刘思国步志高祁贤康丽娟卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室南京农业大学动物医学系东北农业大学生物工程系

从我国华中、华东、华南、华北、东北及西北等地分离鸡传染性支气管炎病毒流行株，经病毒的病原性、形态结构、理化特性、病毒抗原的特异性检测、组织嗜性、结构多肽及血清型分析等多方面的鉴定，对来源于我国不同地区的流行毒株免疫原... 详细信息

从我国华中、华东、华南、华北、东北及西北等地分离鸡传染性支气管炎病毒流行株，经病毒的病原性、形态结构、理化特性、病毒抗原的特异性检测、组织嗜性、结构多肽及血清型分析等多方面的鉴定，对来源于我国不同地区的流行毒株免疫原Ｓ１基因进行了分子克隆及基因分型；ＲＴ－ＰＣＲ扩增病毒Ｓ１基因，将Ｓ１基因５′和３′端分别进行分子修饰之后插入克隆载体ｐＵＣ１８的ＢａｍＨⅠ／ＨｉｎｄⅢ位点，在Ｅｃｏｌｉ中实现了目的基因的克隆；利用英国病毒株Ｓ１全基因核酸探针与流行株Ｓ１基因的重组克隆质粒分子杂交及目的基因５′端高变区核苷酸序列分析鉴定后，采用ＨａｅⅢ、ＰＶＵⅡ和ＸｂａⅠ等限制性核酸内切酶酶切分析不同流行株Ｓ１基因ｃＤＮＡ。结果表明，我国流行的鸡传染性支气管炎病毒分为６个主要的基因型；试验发现除与Ｍ４１和澳大利亚Ｔ株相近基因型毒株之外，我国流行的毒株存在明显的分子水平的变异，这与病毒血清型鉴定的结果一致，鸡传染性支气管炎病毒中国流行毒株免疫原基因Ｓ１的分子克隆及基因分型为该病毒分子流行病学及病毒遗传变异的主要分子基础的深入研究奠定了基础。

关键词：鸡病传染性支气管炎分子克隆基因分 IB病毒

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鸡T细胞表面抗原生物学特性

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中国兽医学报 1997年第6期17卷 559-562页

作者：李一经刘宝全贾永清李海滨卢景良东北农业大学动物医学系中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

对鸡Ｔ细胞特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｂ６识别的Ｔ细胞膜抗原的理化特性、组织学分布及相应Ｔ细胞的免疫学功能进行了研究。结果表明，由１Ｂ６ＭｃＡｂ识别的Ｔ细胞膜抗原为１条６００００～６５０００的单链蛋白；该抗原分布于... 详细信息

对鸡Ｔ细胞特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｂ６识别的Ｔ细胞膜抗原的理化特性、组织学分布及相应Ｔ细胞的免疫学功能进行了研究。结果表明，由１Ｂ６ＭｃＡｂ识别的Ｔ细胞膜抗原为１条６００００～６５０００的单链蛋白；该抗原分布于６３．３％的胸腺细胞、１７．３％的脾细胞以及２５％的外周血淋巴细胞。体外试验表明，采用补体介导的细胞溶解试验除去脾细胞中的１Ｂ６＋Ｔ细胞后，其淋巴因子产生活性显著降低。由此证明，１Ｂ６＋Ｔ细胞是淋巴因子产生的主要细胞。根据１Ｂ６ＭｃＡｂ鉴定的Ｔ细胞理化特性、组织学分布及功能特性，１Ｂ６＋Ｔ细胞属于ＣＤ４＋Ｔ细胞。

关键词：鸡 T淋巴细胞表面抗原

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嗜水气单胞菌HEC毒素基因的克隆及酶谱分析

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中国兽医学报 1997年第4期17卷 339-343页

作者：陈怀青陆承平袁世山于康震卢景良南京农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素是该菌重要的致病因子和保护性抗原。为了解其分子生物学特性，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取了嗜水气单胞菌Ｊ－１株的染色体，经ＥｃｏＲＩ酶切、琼脂糖凝胶电泳后作Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ，用ＤＩＧ标... 详细信息

嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素是该菌重要的致病因子和保护性抗原。为了解其分子生物学特性，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取了嗜水气单胞菌Ｊ－１株的染色体，经ＥｃｏＲＩ酶切、琼脂糖凝胶电泳后作Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ，用ＤＩＧ标记的ＨＥＣ毒素探针检测，其５．０ｋｂ的酶切片段呈阳性。回收该片段，与ｐＵＣ１９相连，转化大肠杆菌ＪＭ１０９。提取Ｘ－ｇａｌ平板上白色菌落的质粒，经大小比较、ＥｃｏＲＩ酶切分析及ＤＩＧ标记ＨＥＣ毒素核酸探针斑点杂交鉴定，获得ｐＨＥＣ１１等含５．０ｋｂ目的ＤＮＡ片段的重组质粒。ｐＨＥＣ１１质粒经酶切、电泳，证实目的ＤＮＡ片段中含有ＢａｍＨＩ、ＳｍａⅠ、ＰｓｔⅠ及ＰｖｕⅡ等酶切位点，并绘制了其物理图谱。同时还构建了若干亚克隆，为研制嗜水气单胞菌基因工程苗提供了目的基因片段。

关键词：嗜水气单胞菌 HEC 毒素基因分子克隆物理图谱

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传染性支气管炎病毒中国地方分离株RFLP基因分型的研究

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中国兽医学报 1997年第6期17卷 530-534页

作者：步志高江国托刘思国王秀荣康丽娟祁贤陈万芳卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学南京农业大学动物医学院

为初步确定我国不同地区流行的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的基因分型，对分离自国内８个不同地域疫区的ＩＢＶＱＤ、ＧＺ、ＺＺ、ＴＪ、ＤＬ、ＹＣ、ＪＳ１和ＪＳ２及参考株Ｍ４１、Ｈ５２和Ｔ的Ｓ１基因ＲＴ－ＰＣＲ扩增ｃＤＮＡ进... 详细信息

为初步确定我国不同地区流行的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的基因分型，对分离自国内８个不同地域疫区的ＩＢＶＱＤ、ＧＺ、ＺＺ、ＴＪ、ＤＬ、ＹＣ、ＪＳ１和ＪＳ２及参考株Ｍ４１、Ｈ５２和Ｔ的Ｓ１基因ＲＴ－ＰＣＲ扩增ｃＤＮＡ进行ＨａｅⅢ的ＲＦＬＰ分析。结果，ＱＤ与ＭＤ４１、Ｈ５２同属Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｅ基因型，ＧＺ、ＺＺ、ＹＣ与Ｔ的基因型相同，ＤＬ、ＪＳ１和ＪＳ２则表现为各自独立的基因型，而ＴＪ则为ＤＬ和Ｔ２种基因型毒株的混合感染，表明我国的广大地域内存在着Ｍａｓｓ基因型、Ｔ基因型和可能的变异株ＩＢＶ的流行。

关键词：传染性支气管炎病毒 RFLP 基因型

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传染性支气管炎病毒类M_(41)地方分离株S_1基因克隆及高变区序列分析

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中国兽医学报 1997年第6期17卷 535-538页

传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分离株ＱＤ经ＲＴ－ＰＣＲ扩增出约１．７ｋｂＳ１糖蛋白基因ｃＤＮＡ，修饰后插入ｐＵＣ１８ＳｍａｌⅠ／ＥｃｏＲＩ位点构成质粒ｐＵＣＱＤＳ１。对克隆的Ｓ１基因５′端高变区序列测定显示，起始密码上... 详细信息

传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分离株ＱＤ经ＲＴ－ＰＣＲ扩增出约１．７ｋｂＳ１糖蛋白基因ｃＤＮＡ，修饰后插入ｐＵＣ１８ＳｍａｌⅠ／ＥｃｏＲＩ位点构成质粒ｐＵＣＱＤＳ１。对克隆的Ｓ１基因５′端高变区序列测定显示，起始密码上游６０碱基和下游３８０碱基中与参考株Ｍ４１Ｓ１基因序列仅有１个碱基的差异，表明ＱＤ为一类Ｍ４１分离株。

关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因克隆测序

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斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

引用

江苏农学院学报 1995年第3期16卷 59-62页

作者：江国托王永坤江苏农学院动物医学系中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗... 详细信息

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。

关键词： ELISA 鸡病传染性支气管炎病毒抗体

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