检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2018年第4期40卷 321-324页

作者：郑琳琳赵识非刘永刚张冲涂亚斌王刚蔡雪辉东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染对仔猪骨髓细胞的影响,本研究体外培养仔猪骨髓细胞后感染HP-PRRSV,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测骨髓细胞生长情况,并通过流式细胞分析技术检测病毒感染骨髓内细胞的类... 详细信息

为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染对仔猪骨髓细胞的影响,本研究体外培养仔猪骨髓细胞后感染HP-PRRSV,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测骨髓细胞生长情况,并通过流式细胞分析技术检测病毒感染骨髓内细胞的类型。实验结果显示:HP-PRRSV HuN4感染骨髓细胞72h后病毒感染率达到峰值,骨髓细胞存活率显著下降;流式细胞分析结果显示,HP-PRRSV感染的骨髓细胞为髓系前体细胞(SWC3~LSWC8^-)与巨噬细胞(SWC3~HSWC8^-)。本实验结果表明:HP-PRRSV在骨髓内除能够感染巨噬细胞外,还能感染髓系前体细胞,引起仔猪骨髓损伤并影响机体的正常免疫反应。本研究为进一步探究HP-PRRSV感染机体免疫抑制机制奠定了前期基础。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒骨髓细胞 SWC3 SWC8

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兼顾H5亚型高致病性禽流感病毒不同分支HA蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国预防兽医学报 2018年第7期40卷 639-642页

作者：徐海峰张莹刘琳曾显营谷琳琳熊晓宇王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为建立针对我国主要流行的H5亚型Clade7.2、Clade 2.3.2和Clade2.3.4.4分支高致病性禽流感病毒(HPAIV)不同流行株的免疫学快速检测方法,本研究将Clade7.2分支禽流感疫苗株CK/LN/S4092/2011(H5N1)(Re-7)、Clade2.3.4.4分支疫苗株DK/GZ/4/2013(H5N1)(Re-8)和Clade2.3.2.1e分支疫苗株DK/AH/S1246/14(H5N1)(Re-10)混合作为免疫原免疫4周龄BALB/c雌鼠,4次免疫后无菌取其脾细胞和骨髓瘤细胞(SP2/0)在聚乙二醇促融剂的作用下融合,通过间接ELISA方法及HI试验筛选获得6株能稳定分泌抗血凝素蛋白(HA)的单克隆抗体(MAb)杂交瘤细胞,分别命名为1B10、2A10、2C8、3E6、4G9和H2B1。经检测1B10、2A10、2C8和H2B1能够与当前AIV流行的分支反应,具有较好的广谱性。本研究为H5亚型AIV快速诊断技术的研发提供基础材料。

关键词： H5亚型禽流感病毒基因型分支单克隆抗体

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猪脑心肌炎病毒3AB蛋白与宿主蛋白RPL11相互作用的鉴定

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中国预防兽医学报 2018年第5期40卷 375-380页

作者：薛娟张昆丽张元峰黄丽杨玉莹翁长江长江大学动物科学学院湖北荆州434025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所基础免疫创新团队/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为了研究与猪脑心肌炎病毒(EMCV)3AB相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库,获得6个与EMCV 3AB相互作用的宿主蛋白(RFC5、LRWD1、PIH1D1、RPL11、RPS20和LGALS1),经分析显示这些蛋白分别参与DNA... 详细信息

为了研究与猪脑心肌炎病毒(EMCV)3AB相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库,获得6个与EMCV 3AB相互作用的宿主蛋白(RFC5、LRWD1、PIH1D1、RPL11、RPS20和LGALS1),经分析显示这些蛋白分别参与DNA复制、有丝分裂和细胞凋亡等过程;酵母共转化试验与免疫共沉淀试验证实EMCV 3AB和RPL11两者之间存在特异性结合;激光共聚焦试验显示EMCV 3AB与RPL11共同过度表达时,二者共定位在细胞核中,而在EMCV感染状态下,3AB与RPL11主要共定位在细胞质中。另外,EMCV感染HeLa细胞能降低细胞中p53的蛋白水平,但3AB并不直接促进p53蛋白降解,表明EMCV 3AB对RPL11-MDM2-p53通路无影响。本研究发现并证实了RPL11与EMCV 3AB之间的相互作用,为进一步研究RPL11蛋白在EMCV复制中的作用奠定了基础。

关键词：猪脑心肌炎病毒 3AB蛋白 60S核糖体蛋白L11 病毒-宿主相互作用

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亲环蛋白A对动物病毒感染的调控及其分子机制

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畜牧兽医科技信息 2019年第7期35卷 4-6页

作者：吴甜甜王笑梅祁小乐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

传统的抗病毒策略多以病毒自身为靶点,随着天然免疫研究的不断深入,宿主的一系列抗病毒靶点相继被鉴定。亲环蛋白A(Cyclophilin A, CypA)是亲环蛋白(Cyclophilins, Cyps)家族中含量最丰富、被研究最多的一个成员。CypA不仅具有多种生理... 详细信息

传统的抗病毒策略多以病毒自身为靶点,随着天然免疫研究的不断深入,宿主的一系列抗病毒靶点相继被鉴定。亲环蛋白A(Cyclophilin A, CypA)是亲环蛋白(Cyclophilins, Cyps)家族中含量最丰富、被研究最多的一个成员。CypA不仅具有多种生理功能,也广泛参与到多种病毒的感染过程中,其作为抗病毒制剂的靶点近来也不断被关注。本文综述了CypA对不同动物病毒感染的调控作用及其分子机制,对于新型抗病毒策略的探索具有重要意义。

关键词：亲环蛋白A 动物病毒抗病毒

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农用实验动物猪感染模型的研究概况

农用实验动物猪感染模型的研究概况

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第九届北京实验动物科学国际论坛

作者：王玉娥陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平西路678号 150069

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带有EGFP的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒的构建

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黑龙江畜牧兽医 2018年第10期 107-109,245页

作者：刘天昕陶冶李爱东常亚飞王刚汤艳东刘永刚蔡雪辉吉林农业大学动物科学技术学院长春130018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为了构建带有绿色荧光蛋白（EGFP）的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒（HP-PRRSV HuN4 EGFP）,试验采用分子克隆的方法,将转录调控序列TRS6与EGFP基因克隆至HP-PRRSV HuN4株感染性克隆上,用重组质粒pHP-PRRSV HuN4 EGFP转染Marc-14... 详细信息

为了构建带有绿色荧光蛋白（EGFP）的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒（HP-PRRSV HuN4 EGFP）,试验采用分子克隆的方法,将转录调控序列TRS6与EGFP基因克隆至HP-PRRSV HuN4株感染性克隆上,用重组质粒pHP-PRRSV HuN4 EGFP转染Marc-145细胞拯救重组病毒HPPRRSV HuN4 EGFP,将拯救病毒连续传代观察其稳定性。结果表明：HP-PRRSV HuN4 EGFP感染性克隆构建成功;转染后荧光显微镜下可观察到特异性绿色荧光,表明重组病毒拯救成功;将拯救的病毒连续传5代,仍可观察到绿色荧光,表明该重组病毒稳定性良好。说明试验成功构建并拯救出HP-PRRSV HuN4 EGFP。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征增强性绿色荧光蛋白重组病毒拯救稳定性试验分子克隆

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体外弓形虫感染小鼠小胶质细胞及对其极化的影响

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中国预防兽医学报 2018年第3期40卷 243-247页

作者：陈立思胡守萍张交儿张卓刘强贾洪林王龙涛何希君吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为探究体外弓形虫(***)感染小鼠小胶质细胞(Microglia)后对其极化的影响,将PLK株弓形虫接种原代小胶质细胞,分别在弓形虫感染细胞后6 h、12 h、24 h、36 h以及48 h收集细胞及培养上清,利用荧光定量PCR、western blot分别检测小胶质细胞M... 详细信息

为探究体外弓形虫(***)感染小鼠小胶质细胞(Microglia)后对其极化的影响,将PLK株弓形虫接种原代小胶质细胞,分别在弓形虫感染细胞后6 h、12 h、24 h、36 h以及48 h收集细胞及培养上清,利用荧光定量PCR、western blot分别检测小胶质细胞M1型以及M2型标记分子的表达水平。采用Griess法和精氨酸酶活性试验分别检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arginase-1)的酶活性。结果显示,弓形虫感染细胞后M1型标记分子iNOS与IL-6的mRNA转录水平与蛋白水平均显著上调(p<0.001),而M2型标记分子Arginase-1与IL-10无明显变化(p>0.05)。此外,酶活性检测结果显示iNOS在弓形虫感染6 h～48 h与对照组相比其表达水平有显著差异(p<0.001),而Arginase-1在该时间段表达差异并不显著。本研究结果表明,弓形虫感染小胶质细胞后能够明显诱导静息状态的小胶质细胞向M1型极化,从而改变小胶质细胞的表型和生物学功能,本研究为进一步阐明弓形虫与机体免疫系统相互作用提供了依据。

关键词：弓形虫小胶质细胞极化

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伪狂犬病病毒变异株EP0基因缺失株的构建及其致病力评价

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中国预防兽医学报 2018年第4期40卷 279-282页

作者：刘继婷汤艳东王同云蔡雪辉吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

EP0(Early Protein 0)基因是伪狂犬病病毒(PRV)早期表达的转录激活因子,可以结合并激活多种病毒基因启动子,调节基因的表达,同时其也是毒力相关基因。为探究EP0基因对PRV变异株毒力的影响,本研究采用CRISPR/Cas9系统敲除PRV变异株HeN1的... 详细信息

EP0(Early Protein 0)基因是伪狂犬病病毒(PRV)早期表达的转录激活因子,可以结合并激活多种病毒基因启动子,调节基因的表达,同时其也是毒力相关基因。为探究EP0基因对PRV变异株毒力的影响,本研究采用CRISPR/Cas9系统敲除PRV变异株HeN1的EP0基因,通过噬斑纯化筛选与基因测序鉴定,成功构建1株EP0基因缺失病毒株PRV-EP0。小鼠毒力试验显示PRV-EP0株虽然体外复制能力降低,但其致病力与野生病毒株HeN1相比并无变化。本研究构建的EP0基因敲除病毒为研究PRV变异株EP0的功能奠定基础。

关键词：伪狂犬病病毒 CRISPR-Cas9 基因编辑 EP0基因

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肠道菌群在宿主免疫应答中的作用及机制研究进展

肠道菌群在宿主免疫应答中的作用及机制研究进展

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第九届北京实验动物科学国际论坛

作者：张贺王玉娥陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平西路678号 150069

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猪脑心肌炎病毒VP1蛋白与宿主RPS20蛋白相互作用研究

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中国预防兽医学报 2018年第8期40卷 715-719页

作者：张元峰张昆丽薛娟黄丽杨玉莹翁长江长江大学动物科学学院湖北荆州434025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所基础免疫创新团队/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为筛选并鉴定与猪脑心肌炎病毒(EMCV) VP1蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交系统筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库。酵母共转化和免疫共沉淀试验表明VP1和RPS20蛋白之间存在特异性相互作用。激光共聚焦试验显示,过表达的VP1和... 详细信息

为筛选并鉴定与猪脑心肌炎病毒(EMCV) VP1蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交系统筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库。酵母共转化和免疫共沉淀试验表明VP1和RPS20蛋白之间存在特异性相互作用。激光共聚焦试验显示,过表达的VP1和RPS20共定位于细胞质中。本研究初步证实了RPS20与EMCV VP1蛋白之间的相互作用,为进一步研究RPS20蛋白在EMCV感染过程中的生物学功能奠定了基础。

关键词：猪脑心肌炎病毒 VP1蛋白核糖体蛋白S20 病毒-宿主相互作用

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