检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2015年第2期42卷 358-364页

作者：董慧张鑫陈建飞时洪艳石达常铁城谷凤丽徐天王智琴刘明春冯力沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 首都医科大学基础医学院北京100069

为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经... 详细信息

为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经3次亚克隆后制备了1株稳定分泌抗NSP8蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。分泌的单克隆抗体亚类鉴定其重链为IgG1型,轻链为κ链;杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶3 200。Western blotting试验结果表明该单克隆抗体能识别原核及真核表达的NSP8重组蛋白。利用截短表达的方法对NSP8蛋白进行抗原表位的鉴定,初步确定了单克隆抗体针对的抗原表位序列为31SPQILKQLTKAFNIAKSDFEREASV55。本研究制备的单克隆抗体及对抗原表位的鉴定,为TGEV NSP8蛋白相关功能的研究奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 NSP8基因单克隆抗体抗原表位

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猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析

猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：刘春国刘永相刘大飞郭东春田进李志杰刘家森曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯状病毒科、水疱疹病毒属成员之一,也是感染猫的重要病原之一,能够导致猫发生一系列严重的临床症状。FCV基因组包含一个单股正链RNA,极易产生遗传和抗原变异,这也是导致FCV毒力差异和疫苗免疫失... 详细信息

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯状病毒科、水疱疹病毒属成员之一,也是感染猫的重要病原之一,能够导致猫发生一系列严重的临床症状。FCV基因组包含一个单股正链RNA,极易产生遗传和抗原变异,这也是导致FCV毒力差异和疫苗免疫失败的基础。因此,对FCV基因组进行分析具有重要意义。为了解FCV的生物学特性,本研究对患有严重结膜炎的猫体内分离到的一株FCV HRB SS株进行了分离鉴定和遗传分析。结果表明HRB SS株全长基因组除了poly(A)共由7705 nt组成。编码两个大的ORF:ORF1(nt20-5311)和ORF2(nt 5312-7318),以及一个小的ORF3(nt7315-7638)。HRB SS株5'和3'非编码区分别由19nt和67nt组成。此外,HRB SS株在基因组3'端有24nt插入,与韩国分离株12Q087-1和12Q087-5相似,而中国分离株GD与F9疫苗株则保持相同的基因组形式。该片段的插入对病毒的意义如何将有待于进一步研究。基因组核苷酸序列分析结果表明FCVHRB SS株与1874株同源性最高,为80.3%,而与中国分离株GD的同源性最低,仅为76.6%。VP1超变区核苷酸序列分析发现,HRB SS株与疫苗株CVXPOLYCAP的同源性最高,为78.2%,而与中国分离株CH-JL和GD的同源性最低,仅为67.9%和68.8%。推导的超变区氨基酸序列分析结果显示,HB SS与12Q087-5、UTCVM-NH12和FCLF4的同源性最高,为86.7%,而与中国分离株的同源性仅为73.9%。系统发育树分析结果表明FCV HRB SS株基因组核苷酸序列与FCV/DD/2006/GE(德国)和UTCVM-H2(美国)的亲缘关系最近,并与美国分离株Urbana、1874和5789处于同一进化分支。而与疫苗株F9处于不同的进化分支。本研究结果表明,FCV HRB SS分离株为一株新型变异株,并与我国FCV具有不同的遗传起源。

关键词：猫杯状病毒变异株遗传特征超变区

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北里乳杆菌97-1产细菌素97-1的抑菌活性及生物特性的研究

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中国预防兽医学报 2015年第12期37卷 934-937页

作者：张旺刘琳琳王云峰王宏磊祁小乐高玉龙王永强高宏雷李凯刘长军张艳萍卢彤岩何高明王笑梅崔红玉石河子大学动物科技学院新疆石河子832002 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽免疫抑制病创新团队黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司黑龙江哈尔滨150028 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江哈尔滨150070

为鉴定北里乳杆菌97-1(*** 97-1)所产细菌素的抑菌活性及生物特性,本研究利用菌体吸附法在北里乳杆菌97-1厌氧静置培养后的上清中初步提取细菌素97-1,其抗菌活性在培养稳定期后达到最高值6 400(AU/m L),经试验显示该细菌素能够被大多数... 详细信息

为鉴定北里乳杆菌97-1(*** 97-1)所产细菌素的抑菌活性及生物特性,本研究利用菌体吸附法在北里乳杆菌97-1厌氧静置培养后的上清中初步提取细菌素97-1,其抗菌活性在培养稳定期后达到最高值6 400(AU/m L),经试验显示该细菌素能够被大多数蛋白酶降解,但耐受过氧化氢酶的处理;进一步研究表明其细菌素对单核细胞增生李斯特菌的生长具有明显抑制作用,同时可以抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,具有广谱抗菌活性;温度和酸碱耐受试验表明该细菌素对高温、强酸和强碱具有高度耐受性。本研究对细菌素97-1的抑菌活性及生物特性的鉴定,为微生态制剂的研制和开发提供了良好的候选资源。

关键词：细菌素抑菌活性北里乳杆菌

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HBK-SPF鸭MHCI区域微卫星标记分析

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实验动物科学 2015年第3期32卷 6-9页

作者：韩凌霞武永淑吴少莲彭蔚宇王兴童韩建林陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物研究室兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 中农威特生物科技股份有限公司兰州730046

禽主要组织相容性复合体是一组紧密连锁高度多态的基因群,与免疫反应或敏感性密切相关,鸭MHC I区域全长36.8 kb,由TAP1、TAP2和5个MHC I拷贝基因(UAA-UEA)组成。HBK-SPF鸭是中国农业科学院哈尔滨兽医研究所培育的无特定病原体种鸭,分为B... 详细信息

禽主要组织相容性复合体是一组紧密连锁高度多态的基因群,与免疫反应或敏感性密切相关,鸭MHC I区域全长36.8 kb,由TAP1、TAP2和5个MHC I拷贝基因(UAA-UEA)组成。HBK-SPF鸭是中国农业科学院哈尔滨兽医研究所培育的无特定病原体种鸭,分为B和Q 2个品系,已封闭繁育了7个世代。本文在鸭MHC I区域筛选了4个微卫星位点,通过单链构象多态性分析和聚合酶链式反应直接测序,发现A位点具有多态性,为(GT)n的重复结构,第6代HBK-B和HBK-Q的31个个体和第7代的140个个体进行聚合酶链式反应,结果直接测序,在重复结构之前的108bp中,发现了4种纯合单倍型和6种杂合单倍型;B位点未得到目的产物;C位点位于MHC I拷贝基因UDA和UEA之间,扩增结果与UAA和UBA之间序列高度同源,无法判断基因型;D位点表现为单态,为(ATA)15的固定重复结构。本研究为进一步研究鸭MHC I基因结构和建立家系提供了依据。

关键词： HBK鸭主要组织相容性复合体经典I类分子无特定病原体微卫星标记

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天然免疫限制因子Tetherin的抗病毒机理研究进展

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生物化学与生物物理进展 2014年第1期41卷 32-40页

作者：尹鑫魏萍王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

天然免疫限制因子Tetherin(骨髓基质细胞抗原2)是Ⅰ型干扰素诱导产生的Ⅱ型跨膜蛋白.Tetherin通过其特殊的拓扑结构,在病毒出芽过程中将病毒粒子连接在细胞膜表面,限制病毒的有效释放,从而发挥广谱性的抗病毒活性,而病毒也可以通过多种... 详细信息

天然免疫限制因子Tetherin(骨髓基质细胞抗原2)是Ⅰ型干扰素诱导产生的Ⅱ型跨膜蛋白.Tetherin通过其特殊的拓扑结构,在病毒出芽过程中将病毒粒子连接在细胞膜表面,限制病毒的有效释放,从而发挥广谱性的抗病毒活性,而病毒也可以通过多种策略拮抗Tetherin的抗病毒活性.病毒与宿主长期抗争进化的结果表现为病毒特定拮抗蛋白对抗不同种属细胞Tetherin的限制存在种属特异性.本文通过对Tetherin的分子结构、抗病毒活性及其拮抗蛋白的对抗机制等最新进展进行综述,为研究病毒与宿主相互作用的分子机制以及新型抗病毒药物的筛选提供借鉴.

关键词： Tetherin 抗病毒活性拮抗蛋白进化

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猪细小病毒病的流行与防治进展

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养猪 2015年第1期 123-128页

作者：崔宇超崔尚金黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪细小病毒感染呈世界分布,在许多地方甚至已经成为地方性疾病,给养猪业造成严重的经济损失。本文对猪细小病毒病的流行、防治、疫苗研究进展进行了简述。1 PPV简介猪细小病毒（Porcine parvovirus,PPV）是引起母猪繁殖障碍的主要病原... 详细信息

猪细小病毒感染呈世界分布,在许多地方甚至已经成为地方性疾病,给养猪业造成严重的经济损失。本文对猪细小病毒病的流行、防治、疫苗研究进展进行了简述。 1 PPV简介猪细小病毒（Porcine parvovirus,PPV）是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一,以产死胎、木乃伊胎、死产、流产、延期发情和产弱仔为主要特征。

关键词：猪细小病毒病母猪繁殖障碍地方性疾病防治进展胎盘屏障 parvovirus 疫苗研究灭活疫苗木乃伊化非结构蛋白

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猪传染性胃肠炎病毒NSP5蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定

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中国预防兽医学报 2015年第3期37卷 220-224页

作者：董慧张鑫陈建飞时洪艳石达常铁城谷凤丽徐天王智琴冯力沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 首都医科大学基础医学院北京100069

为制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)NSP5蛋白的单抗隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达并纯化的重组NSP5蛋白(r NSP5-GST)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛出一株稳定分泌抗TGEV NSP5蛋白... 详细信息

为制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)NSP5蛋白的单抗隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达并纯化的重组NSP5蛋白(r NSP5-GST)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛出一株稳定分泌抗TGEV NSP5蛋白的MAb杂交瘤细胞株(5C3)。MAb亚类鉴定结果显示其抗体亚类为Ig G1/κ链。杂交瘤细胞培养上清液和腹水的效价分别为1∶6 400和1∶105。Western blot鉴定表明该MAb能够识别原核及真核表达的NSP5重组蛋白。利用肽扫描法鉴定显示,该MAb识别的抗原表位为286EFTPTEVIR QMYGVN300。本研究制备的MAb及其抗原表位的鉴定,为TGEV NSP5蛋白结构和功能的研究奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 nsp5基因单克隆抗体抗原表位

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禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测方法的建立

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黑龙江农业科学 2015年第4期 47-52页

作者：牛秀杰赵妍薛美王云峰东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR)。以pMD-LTR,pMD-gag... 详细信息

为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR)。以pMD-LTR,pMD-gag重组质粒为标准品建立标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。结果表明:该方法线性关系良好;敏感性能检测到10拷贝标准品;能特异性检测REV样品,不与其它禽相关病原发生交叉反应;板内、板间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法对人工感染REV的鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、腺胃和法氏囊进行初步检测,结果显示法式囊中的含量最高。

关键词： SYBR GreenⅠ 实时荧光PCR 禽网状内皮增殖病毒 gag基因 LTR基因

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肠炎沙门氏菌三种主要毒力岛基因缺失株的构建及其免疫效力研究

肠炎沙门氏菌三种主要毒力岛基因缺失株的构建及其免疫效力研究

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第十届全国免疫学学术大会

作者：吕雪莲周薇刘松艳曹俊张童利王曼宇刘思国于申业中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院

目的 :沙门氏菌病属于重要的食源性致病菌之一,经常通过污染的水和食物引起人类疾病。沙门氏菌的致病性与其毒力岛基因密切相关。因此,构建沙门氏菌单个或多个毒力岛的基因缺失株,并评估这些毒力岛对沙门氏菌致病性的影响以及在鸡体内... 详细信息

目的 :沙门氏菌病属于重要的食源性致病菌之一,经常通过污染的水和食物引起人类疾病。沙门氏菌的致病性与其毒力岛基因密切相关。因此,构建沙门氏菌单个或多个毒力岛的基因缺失株,并评估这些毒力岛对沙门氏菌致病性的影响以及在鸡体内诱导免疫应答变化是非常重要的。方法 :本实验利用改进的Red同源重组系统成功构建SPI-1、SPI-2、SPI-3三种主要毒力岛的单缺失、双缺失及三缺失菌株。结果 :敲除SPI-1后的单缺失、双缺失和三缺失菌株的侵袭力均下降,而其他缺失菌株和野生菌株相比侵袭能力差别不大;所有缺失株对细胞的粘附力均显著低于野生菌株(P<0.001)。将上述毒力岛缺失株分别接种7日龄SPF鸡,评价缺失株的致病力、定殖能力以及对鸡只的免疫效力。结果表明,毒力岛缺失菌株可以在肝脏、脾脏和盲肠中定殖,但不会引起鸡只发病,且SM6ΔSPI-1-3在脾脏和肝脏中的定殖效率低于SM6,接种第8天即被机体迅速清除;毒力岛缺失菌株产生的抗体均处于较高水平;毒力岛缺失菌株免疫后机体CD4+T和CD8+T亚群的均有明显变化。免疫后检测血清中IL-4和IFN-γ的细胞因子水平也有上升趋势,并且病理学结果表明鸡只无明显的病理改变。结论 :毒力岛缺失菌株中SM6ΔSPI-1-3有较好的免疫效果及保护效率。三种主要毒力岛缺失菌株的成功构建为阐明肠炎沙门氏菌致病机制和研发安全有效的减毒活疫苗载体奠定了良好的基础。

关键词：肠炎沙门氏菌毒力岛免疫效力活疫苗载体

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猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析

猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析

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第十一届全国病毒学学术研讨会暨第六届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：刘春国刘永相刘大飞郭东春田进李志杰刘家森曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所自然疫源性人兽共患病团队兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨 150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所自然疫源性人兽共患病团队兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯状病毒科、水疱疹病毒属成员之一,也是感染猫的重要病原之一,能够导致猫发生一系列严重的临床症状.FCV基因组包含一个单股正链RNA,极易产生遗传和抗原变异,这也是导致FCV毒力差异和疫苗免疫失败... 详细信息

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯状病毒科、水疱疹病毒属成员之一,也是感染猫的重要病原之一,能够导致猫发生一系列严重的临床症状.FCV基因组包含一个单股正链RNA,极易产生遗传和抗原变异,这也是导致FCV毒力差异和疫苗免疫失败的基础.因此,对FCV基因组进行分析具有重要意义.

关键词：猫杯状病毒变异株遗传特征超变区

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