检索结果-内蒙古大学图书馆

表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白重组新城疫病毒的构建以及密码子优化的HA免疫增强作用

中国预防兽医学报 2014年第8期36卷 585-589页

作者：陈曦于桂梅刘景利王金良姜永萍葛金英步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为构建表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白重组新城疫病毒(NDV)及比较密码子优化的HA免疫增强作用,本研究利用NDV LaSota弱毒疫苗株的反向遗传操作系统,分别构建了表达野毒型H5N1亚型AIV HA蛋白和密码子优化的HA蛋白的重组NDV,并分别命... 详细信息

为构建表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白重组新城疫病毒(NDV)及比较密码子优化的HA免疫增强作用,本研究利用NDV LaSota弱毒疫苗株的反向遗传操作系统,分别构建了表达野毒型H5N1亚型AIV HA蛋白和密码子优化的HA蛋白的重组NDV,并分别命名为rL-H5HA和rL-optiH5HA。对拯救的重组病毒进行RT-PCR、间接免疫荧光和western blot鉴定,结果表明,两种重组病毒均可以在BHK-21细胞中以及鸡胚成纤维细胞稳定地表达HA蛋白。此外,rL-optiH5HA在体外增殖能力及在体内刺激产生抗体均显著高于rL-H5HA。本研究表明,密码子优化的HA重组NDV具有明显的免疫增强作用。本研究为研制安全、有效的新型禽流感疫苗提供了实验依据。

关键词：禽流感病毒 HA蛋白重组新城疫病毒密码子优化

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猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

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中国兽医科学 2014年第3期44卷 227-234页

作者：危艳武张志慧黄立平刘建波吴洪丽刘丹李胜斌王一平张辉夏伟刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了探索猪鼻支原体（Mhr）对仔猪的致病性，从临床呼吸道疾病的患猪肺分离到1株猪鼻支原体流行菌株（Mhr—DL株）。对该菌株16SrRNA序列进行的分析证实，它与GenBank中的猪鼻支原体（AB680688）、猪肺炎支原体（NR-074745）和猪滑液支... 详细信息

为了探索猪鼻支原体（Mhr）对仔猪的致病性，从临床呼吸道疾病的患猪肺分离到1株猪鼻支原体流行菌株（Mhr—DL株）。对该菌株16SrRNA序列进行的分析证实，它与GenBank中的猪鼻支原体（AB680688）、猪肺炎支原体（NR-074745）和猪滑液支原体（KC512403）的同源性分别为99．3％、92．8％和74．0％。电镜下该菌为多形性，大小为500～600nm。取Mhr-DL菌株培养物（1．8×10^9 CCU／mL）经腹腔和气管途径接种SPF小型巴马猪，被感染猪临床上表现为精神沉郁、粪便干燥、食欲不振、结膜炎、体温高达41．6℃；剖检时病理表现为肺、肝、脾等器官纤维渗出，淋巴结充血肿胀、胸膜炎、腹膜炎、肺呈虾肉样病变。茵株核酸检测发现，肺和扁桃体检出率最高；组织病理表现为间质性肺炎，淋巴细胞增生、坏死、崩解，肾毛细血管淤血，小肠固有层大量嗜酸性粒细胞浸润、肠绒毛结构不完整，心脏小血管淤血，脾白髓内淋巴细胞增生。本研究获得的Mhr-DL菌株对巴马猪具有显著的致病性，为今后深入开展猪鼻支原体致病机理和防控技术的研究奠定了基础。

关键词：猪鼻支原体分离鉴定 SPF巴马猪致病性

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马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

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第十届全国免疫学学术大会

作者：李月健贾悦喻进张晨亮卢晓晓李娜娜李欣张宁张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太原市动物疫病预防控制中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室

研究背景:马立克病(MD)是鸡的一种病毒性肿瘤疾病,多年来虽获得了一定的成效,但马立克病仍经常发生。自1981年提出红细胞免以来,人们发现红细胞除运输氧气,还参与免疫、代谢等生理过程,而对鸡的红细胞免疫研究不够深入。

关键词：红细胞马立克病转录组测序红细胞免疫

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雏鸡红细胞免疫相关基因差异表达的时序性研究

雏鸡红细胞免疫相关基因差异表达的时序性研究

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第十届全国免疫学学术大会

作者：贾悦李月健喻进张晨亮李娜娜卢晓晓张宁李欣张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李建慧李桂兰闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太原市动物疫病预防控制中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室

研究背景:红细胞不仅可以运输O2、CO2和调节p H,其自身还拥有一定的免疫功能。红细胞免疫功能方面的研究在哺乳动物及人的无核红细胞中起步较早,发展已比较完善,但在禽类等有核红细胞中起步较晚,发展比较滞后。目的 :本试验就采用转录... 详细信息

研究背景:红细胞不仅可以运输O2、CO2和调节p H,其自身还拥有一定的免疫功能。红细胞免疫功能方面的研究在哺乳动物及人的无核红细胞中起步较早,发展已比较完善,但在禽类等有核红细胞中起步较晚,发展比较滞后。目的 :本试验就采用转录组测序(RNA-Seq)技术对雏鸡不同日龄的红细胞基因表达进行研究,筛选出红细胞差异表达基因,并对其进行相关生物信息学分析。以期发现雏鸡红细胞免疫系统中的重要基因,并分析其表达蛋白的相互关系及其参与的信号通路,为更深入地研究红细胞免疫分子机制、疾病防治及疫苗研制开辟新的途径。方法 :通过RNA-Seq技术筛选雏鸡发育过程中三个不同日龄(13、18和26日龄)红细胞差异表达基因,并对获得的差异表达基因(FC≥2)进行NR、Swiss-Prot、GO、COG和KEGG生物信息学分析。结果 :与13日龄相比,18日龄雏鸡红细胞中检测出319个差异表达基因,其中表达上调的有113个,下调表达的有206个;26日龄与13日龄相比,有693个差异表达基因,上调272个,下调421个;26日龄与18日龄相比,有854个差异表达基因,上调319个,下调535个。将获得的差异表达基因在各个数据库中比对,发现有近83%的差异表达基因可以得到有效注释;这些差异表达基因参与正常的细胞发育且涉及机体发育主要的信号通路;同时随着雏鸡日龄的增加,相关信号通路中所涉及的差异表达基因数量都在逐渐增加;其中红细胞发育、红细胞免疫系统发育和红细胞黏附能力的相关基因表达都呈现时序性变化。结论 :本试验发现雏鸡红细胞同其它成熟细胞一样,基因功能全面,广泛参与机体大多数的生物学过程;同时,随着雏鸡发育过程中机体免疫系统的逐渐完善,红细胞免疫系统以及黏附能力也趋于完善和成熟。为未来研究红细胞免疫的分子机制提供新的途径。

关键词：红细胞雏鸡红细胞免疫系统 RNA-Seq 差异表达基因信号通路

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鸡马立克氏病病毒编码的miRNA体内表达特征分析

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中国预防兽医学报 2014年第10期36卷 751-754页

作者：郑惠文李志杰张艳萍包珂岩郑永胜刘长军王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽免疫抑制病研究室黑龙江哈尔滨150001

最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用。为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的... 详细信息

最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用。为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的M4-5P、M8-3P和M12-3P 3种miRNAs在肝脏和胸腺中的动态表达特征。结果表明,强弱毒株编码的这3种miRNAs在病毒感染过程中具有明显的差异性,其中GA株编码的miRNAs表达量高于CVI988株,这是由于强弱毒株在体内的复制滴度差异造成的,表明在感染前期miRNAs的表达量与病毒载量有关。该研究为进一步研究miRNAs的功能提供了实验依据。

关键词：鸡马立克氏病病毒 miRNA 荧光定量PCR

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猪鼻支原体抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2014年第11期44卷 1140-1144页

作者：陈冬杰危艳武张志慧黄立平吴洪丽王一平孙建慧刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了检测猪血清中猪鼻支原体(Mhr)的抗体水平,采用脱氧胆酸钠提取Mhr膜蛋白作为包被抗原,建立了间接ELISA,并采用该方法检测了60份SPF阴性猪血清和45份Mhr阳性猪血清样品。结果显示,该方法的特异性为90.5%,敏感性为98.0%。除猪肺炎支原... 详细信息

为了检测猪血清中猪鼻支原体(Mhr)的抗体水平,采用脱氧胆酸钠提取Mhr膜蛋白作为包被抗原,建立了间接ELISA,并采用该方法检测了60份SPF阴性猪血清和45份Mhr阳性猪血清样品。结果显示,该方法的特异性为90.5%,敏感性为98.0%。除猪肺炎支原体(Mhp)外,该方法与几种猪病毒阳性血清及副猪嗜血杆菌Ⅳ型阳性参考血清均无交叉反应。对Mhr DL菌株感染的巴马猪血清抗体的检测结果显示,Mhr感染后第3天血清抗体阳转,第35天抗体水平达到高峰,抗体效价为1∶6 400。用该方法与IDEXX猪肺炎支原体抗体检测试剂盒平行检测138份现地血清样品,Mhr和Mhp的阳性检出率分别为71.0%和44.9%。用该方法对黑龙江、吉林、山东等地临床送检的457份血清的检测结果显示,Mhr阳性率为70.3%,表明我国猪群Mhr感染十分普遍。上述结果表明,本研究建立的间接ELISA具有良好的特异性和敏感性,为Mhr抗体检测提供了技术手段。

关键词：猪鼻支原体间接ELISA 抗体检测

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猪圆环病毒2型几种ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用

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中国预防兽医学报 2014年第2期36卷 129-133页

作者：张志慧危艳武吴洪丽黄立平李胜斌刘建波张辉王一平刘丹刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了比较猪圆环病毒2型（PCV2）5种ELISA抗体检测试剂盒的使用效果，本研究采用IPMA法标定不同PCV2抗体效价的阳性血清50份和阴性血清30份，对这些试剂盒的敏感性、特异性及符合率进行比较。结果显示，这5种试剂盒的敏感性为74．0％～96... 详细信息

为了比较猪圆环病毒2型（PCV2）5种ELISA抗体检测试剂盒的使用效果，本研究采用IPMA法标定不同PCV2抗体效价的阳性血清50份和阴性血清30份，对这些试剂盒的敏感性、特异性及符合率进行比较。结果显示，这5种试剂盒的敏感性为74．0％～96．0％，特异性为83．3％～96．7％，符合率为77．5％～96.3％，其中以国产阻断ELISA试剂盒和Ingenasa公司的试剂盒效果最好。此外，本研究采用国产阻断ELISA试剂盒对PCV2疫苗免疫猪血清抗体检测表明，疫苗免疫21d后抗体阳性率达50％，免疫28d抗体阳性率达100％；对PCV2人工感染猪血清抗体检测显示，病毒接种后第28d抗体阳性率为30．0％，第42d阳性率为100％；对临床送检猪血清抗体检测表明，PCV2抗体阳性率介于45.0％～76．5％。本研究通过对PCV25种抗体检测试剂盒的比较及应用显示，国产阻断ELISA试剂盒可以作为检测PCV2疫苗免疫及临床感染猪血清抗体的有效方法。

关键词：猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒比较和应用

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雏鸡红细胞免疫相关基因差异表达的时序性研究

雏鸡红细胞免疫相关基因差异表达的时序性研究

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：贾悦李月健喻进张晨亮李娜娜卢晓晓张宁李欣张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李建慧李桂兰闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太谷030801 太原市动物疫病预防控制中心太原030024 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

研究背景：红细胞不仅可以运输O2、CO2和调节pH,其自身还拥有一定的免疫功能。红细胞免疫功能方面的研究在哺乳动物及人的无核红细胞中起步较早,发展已比较完善,但在禽类等有核红细胞中起步较晚,发展比较滞后。

关键词：红细胞雏鸡红细胞免疫系统 RNA-Seq 差异表达基因信号通路

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鸡马立克氏病病毒疫苗株对强毒株的复制抑制作用

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中国预防兽医学报 2014年第1期36卷 7-10页

作者：郑永胜张艳萍李志杰郑惠文谭成章刘长军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为研究鸡马立克氏病(MD)疫苗株对强毒株体内复制的抑制作用,本研究依据鸡MD病毒(MDV)R-LORF2基因序列设计引物和探针,建立特异性定量检测MDV流行强毒株L-CY的荧光定量PCR方法,并且应用该方法对CVI988疫苗株免疫后不同时间间隔L-CY株攻... 详细信息

为研究鸡马立克氏病(MD)疫苗株对强毒株体内复制的抑制作用,本研究依据鸡MD病毒(MDV)R-LORF2基因序列设计引物和探针,建立特异性定量检测MDV流行强毒株L-CY的荧光定量PCR方法,并且应用该方法对CVI988疫苗株免疫后不同时间间隔L-CY株攻毒鸡体内不同组织的强毒载量进行动态的定量检测。结果显示,免疫后7 d和14 d攻毒鸡体内不同组织强毒载量显著低于单独攻毒鸡;而同时免疫和攻毒组鸡中强毒载量无明显降低。在免疫后7 d攻毒组中,法氏囊中的强毒载量始终稳定在低水平,但羽髓和肾脏中的强毒载量自攻毒后21 d开始明显上升。结果表明,至少要在感染L-CY株14 d前免疫,CVI988疫苗株才能有效抑制强毒株在体内的复制。此外,当免疫后7 d攻毒时,在羽髓或肾脏等非免疫器官中,疫苗病毒不能持续抑制强毒复制,最终导致疫苗不能提供有效的保护。本研究为MD免疫机制的进一步研究提供了依据。

关键词：马立克氏病病毒病毒载量荧光定量PCR 抑制作用

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马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：李月健贾悦喻进张晨亮卢晓晓李娜娜李欣张宁张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太谷030801 太原市动物疫病预防控制中心太原030024 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

研究背景：马立克病(MD)足鸡的一种病毒性肿瘤疾病，多年来虽获得了一定的成效，但马立克病仍经常发生。自1981年提出红细胞免以来，人们发现红细胞除运输氧气，还参与免疫、代谢等生理过程，而对鸡的红细胞免疫研究不够深入。

关键词：红细胞马立克病转录组测序红细胞免疫

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