检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2014年第1期41卷 11-14页

作者：田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

为建立检测马疱疹病毒4型(EHV4)抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原,经条件优化,成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明,重组4型gG蛋白仅与EHV4... 详细信息

为建立检测马疱疹病毒4型(EHV4)抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原,经条件优化,成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明,重组4型gG蛋白仅与EHV4阳性血清发生反应,不与马疱疹病毒1型(EHV1)阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测比较,两者阳性和阴性符合率均在90%以上。本研究建立的间接ELISA方法为检测EHV4抗体及流行病学调查奠定基础。

关键词：检测马疱疹病毒4型 gG蛋白间接ELISA

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蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定

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中国预防兽医学报 2014年第1期36卷 63-66页

作者：魏天徐青元耿宏伟冯瑜菲杨涛孙恩成席娜刘二战钱爱东邸英华吴东来吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林省长春皓月清真肉业股份有限公司吉林长春130000

为鉴定蓝舌病病毒（BTV）的单克隆抗体（MAb）所识别的VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位，本研究采用噬菌体展示技术对BTVVP7蛋白构象抗原表位氨基酸进行筛选，通过质粒定点突变技术对编码筛选获得的氨基酸区域的基因进行突变，同... 详细信息

为鉴定蓝舌病病毒（BTV）的单克隆抗体（MAb）所识别的VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位，本研究采用噬菌体展示技术对BTVVP7蛋白构象抗原表位氨基酸进行筛选，通过质粒定点突变技术对编码筛选获得的氨基酸区域的基因进行突变，同时利用ELISA法验证该氨基酸区域突变后对BTVvP7蛋白抗原性的影响。结果表明被BTVMAb4H7所识别的BTVVP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位由175FQG177、185YL186和278WH279组成，其中aal75～aal77和aal85～aal86为该抗原表位的关键性氨基酸，本研究初步阐明了BTvVP7蛋白竞争抑制特异性的分子基础，对VP7蛋白功能研究和建立BTV群特异性检测方法具有重要意义。

关键词：蓝舌病病毒 VP7蛋白构象表位

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口蹄疫病毒3C蛋白酶切割宿主蛋白PCBP2

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中国预防兽医学报 2014年第6期36卷 419-422页

作者：杨春梅黄丽王海伟于会彬李一经蔡雪辉于力唐丽杰翁长江东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

口蹄疫病毒(FMDV)3C蛋白酶(3Cpro)能够通过切割翻译起始因子4G(eIF4G)抑制宿主蛋白合成,而宿主多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)的主要功能之一是参与蛋白质合成。本研究通过western blot检测显示,在FMDV感染BHK-21细胞中PCBP2蛋白水平显著... 详细信息

口蹄疫病毒(FMDV)3C蛋白酶(3Cpro)能够通过切割翻译起始因子4G(eIF4G)抑制宿主蛋白合成,而宿主多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)的主要功能之一是参与蛋白质合成。本研究通过western blot检测显示,在FMDV感染BHK-21细胞中PCBP2蛋白水平显著降低。为鉴定FMDV 3Cpro是否具有切割PCBP2蛋白的功能,本研究采用免疫共沉淀试验和激光共聚焦检测显示,FMDV 3Cpro和PCBP2在细胞内存在相互作用,并且共定位于细胞质中。进一步研究显示,FMDV 3Cpro能够切割PCBP2,而且具有剂量依赖性。此外,FMDV 3Cpro活性位点突变(H46Y)试验结果表明,FMDV 3Cpro的蛋白酶活性是切割蛋白PCBP2所必需的。FMDV 3Cpro切割PCBP2靶位点序列的鉴定及FMDV 3Cpro切割PCBP2的生物学意义有待深入研究。

关键词：口蹄疫病毒 3C蛋白酶 PCBP2 切割

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基于反向遗传操作的传染性法氏囊病新型重组疫苗研究

基于反向遗传操作的传染性法氏囊病新型重组疫苗研究

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第九届全国免疫学学术大会

作者：祁小乐高立王永强高玉龙高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

背景:传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡的一种重要免疫抑制病。超强毒(vvIBDV)的感染造成50%以上的致死率,耐过鸡呈现严重的免疫抑制,严重威胁养禽业健康发展。IBD疫苗目前存在问题... 详细信息

背景:传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡的一种重要免疫抑制病。超强毒(vvIBDV)的感染造成50%以上的致死率,耐过鸡呈现严重的免疫抑制,严重威胁养禽业健康发展。IBD疫苗目前存在问题:技术瓶颈是疫苗株需要通过人工盲传驯化获得,费事费力;使用误区是中等或中等偏强毒力毒株被用作疫苗,存在生物安全隐患。目的:优化基于反向遗传操作的IBD疫苗研究新型技术平台,研制高效低毒的IBD新型重组疫苗。方法:建立IBD反向遗传操作技术;研究IBDV毒力和细胞嗜性的分子基础;构建和拯救重组病毒;通过动物实验评估重组疫苗株的有效性和安全性。结果:1、建立了RNA聚合酶Ⅱ介导的IBDV新型反向遗传操作系统,比国际同类系统更高效陕捷。2、构建和拯救系列氨基酸突变病毒,证明了VP2的253、284位氨基酸突变协同决定IBDV的细胞嗜性;VP2的253、284位氯基酸是IBDV重要的毒力位点。Q253H/A284T可以使vvIBDV毒力降低,且适应体外细胞培养。3、构建了一株以弱毒疫苗株为亲本骨架、表达流行毒株主要保护性抗原的IBDV重组病毒rGtktLJVP2,该候选疫苗株抗原性与流行毒株更匹配、安全、有效。已获国家发明专利。4、重组病毒rGtHLJVP2,对鸡无致病力。在CEF细胞和SPF鸡上分别盲传15代和5代,毒力没有返强,遗传稳定性良好。已获国家"农业转基因安全证书"。5、rGtHLJVP2免疫效果良好。能100%保护同源(HLJ-0504株)和异源强毒(HuB-1)的攻击,免疫效果和中等毒力疫苗株(B87)相当。目前,正在进行系统的临床评估。结论:建立了IBD疫苗株新型培育平台,构建了一株IBDV重组疫苗株rGtHLJVP2,安全稳定,免疫效果良好,为疫苗株培育方法的升级和疫苗的更新换代奠定了坚实基础。

关键词：传染性法氏囊病(IBD) 重组疫苗反向遗传

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基于反向遗传操作的传染性法氏囊病新型重组疫苗研究

基于反向遗传操作的传染性法氏囊病新型重组疫苗研究

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：祁小乐高立王永强高玉龙高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001

背景:传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡的一种重要免疫抑制病.超强毒(vvIBDV)的感染造成50％以上的致死率,耐过鸡呈现严重的免疫抑制,严重威胁养禽业健康发展.IBD疫苗目前存在问题:... 详细信息

背景:传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡的一种重要免疫抑制病.超强毒(vvIBDV)的感染造成50％以上的致死率,耐过鸡呈现严重的免疫抑制,严重威胁养禽业健康发展.IBD疫苗目前存在问题:技术瓶颈是疫苗株需要通过人工盲传驯化获得,费事费力;使用误区是中等或中等偏强毒力毒株被用作疫苗,存在生物安全隐患.目的:优化基于反向遗传操作的IBD疫苗研究新型技术平台,研制高效低毒的IBD新型重组疫苗.方法:建立IBD反向遗传操作技术;研究IBDV毒力和细胞嗜性的分子基础;构建和拯救重组病毒;通过动物实验评估重组疫苗株的有效性和安全性.

关键词：传染性法氏囊病(IBD) 重组疫苗反向遗传

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鸡传染性法氏囊病病毒细胞嗜性及受体研究现状

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中国家禽 2014年第20期36卷 2-5页

作者：张礼洲祁小乐王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病研究创新团队黑龙江哈尔滨150001 江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)强、弱毒株在侵染宿主细胞上存在着明显的细胞嗜性差异,普遍认为,这种细胞嗜性差异主要由宿主细胞的不同受体所介导。迄今为止,已报道4种IBDV受体相关分子:SIg M免疫球蛋白... 详细信息

鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)强、弱毒株在侵染宿主细胞上存在着明显的细胞嗜性差异,普遍认为,这种细胞嗜性差异主要由宿主细胞的不同受体所介导。迄今为止,已报道4种IBDV受体相关分子:SIg M免疫球蛋白、热休克蛋白90(c Hsp90)、整合素α4β1、Toll样受体(TLR)。本文对IBDV细胞嗜性及细胞受体相关研究进行了综述。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒细胞嗜性受体

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以结核分枝杆菌为研究模型的自噬免疫学效应

以结核分枝杆菌为研究模型的自噬免疫学效应

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第三届免疫学博士生论坛

作者：曹俊陈利苹鄢秋龙刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究团队

结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,***）已造成全球超过10亿人的无症状感染,每年新增数百万的活动病例,病死率达到25%0%。***最重要的一个特点是:***能够阻断巨噬细胞中具有降解功能吞噬溶酶体的成熟,从而在感染的细胞内持续... 详细信息

结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,***）已造成全球超过10亿人的无症状感染,每年新增数百万的活动病例,病死率达到25%0%。***最重要的一个特点是:***能够阻断巨噬细胞中具有降解功能吞噬溶酶体的成熟,从而在感染的细胞内持续存活。***的这一能力通常被归纳为三种效应结果,即抑制吞噬体和溶酶体的融合、阻断吞噬溶酶体成熟或抑制吞噬溶酶体的生成。事实上,潜伏感染是***的首选,因而在上十亿的病人体内呈现无症状的感染状态。免疫系统的各个成员,尤其是IFN-γ、TNF-α和T细胞的有效协作,控制感染水平,绝大部分病人不会表现出临床症状。参与其中的T细胞包括CD4+T细胞、CD8+T细胞和非常规T细胞。***对很多杀菌作用具有抵抗力,但自噬能有效清除胞内寄生的***。自噬是一个保守的生物过程,胞浆内的物质被双层膜结构包裹,形成自噬体;随后与溶酶体融合,形成自噬溶酶体,其中包裹的物质便会被降解。***等胞内寄生病原体已进化出自己独特的免疫逃避能力,成为生物机体内的漏网之鱼,而自噬可以被看做是机体进化出的查漏补缺之措施。因而,以自噬抵抗***感染为模型,无论是揭示自噬这一生物学过程,还是制定出结核病的有效防治措施都有着重要意义。有实验数据表明,在捕获胞内的泛素、泛素化蛋白或其聚集体之后,自噬通过水解蛋白的反应产生泛素片段,在自噬体发展成熟为自噬溶酶体的过程中,泛素片段直接或间接被运送至细胞内从而增强对***的杀灭作用。脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）一直被认为是***的重要毒力因子,Shui等对不同分枝杆菌来源LAM刺激宿主细胞后细胞器蛋白表达的差异进行了分析,发现唯有高毒力菌株来源的LAM会抑制自噬泡的形成与累积,表明LAM干扰自噬是***致病力的一个重要因素。在自噬系统进化的晚期,为了更有效控制胞内病原的感染,细胞因子网络也获得了调控自噬的能力。细胞因子对自噬的调控体现在以下两个方面,Th1型细胞因子正调控自噬,Th2型细胞因子负调控自噬,这与Th1型细胞因子抵抗胞内病原感染的免疫保护效应,以及Th2型细胞因子在抵抗胞内菌感染方面的负面效应相一致。综上所述,在自噬抵抗胞内病原体——***感染的相关领域,已经取得的研究结果和未来可以进一步获得的信息,定会丰富我们对自噬作为天然免疫反应这一生理过程的认识,对严重威胁全球公共卫生事业的结核病的防治提供新的思路和途径。

关键词：结核分枝杆菌自噬结核病

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MHC单倍型SPF鸭的培育及其TAP基因组序列分析

MHC单倍型SPF鸭的培育及其TAP基因组序列分析

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中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：张晓娜武永淑吴少莲廉传江文辉强陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队兽医生物技术国家重点实验室

引言鸭主要组织相容性复合体（MHC）是一组紧密连锁高度多态的基因簇,其单倍型与宿主的抗病性和免疫应答水平密切相关,其中抗原提呈相关转运蛋白（TAP）基因毗邻MHCⅠ基因。HBK鸭排除了10种特定病原体,现已培育至第8代。本研究对获得的... 详细信息

引言鸭主要组织相容性复合体（MHC）是一组紧密连锁高度多态的基因簇,其单倍型与宿主的抗病性和免疫应答水平密切相关,其中抗原提呈相关转运蛋白（TAP）基因毗邻MHCⅠ基因。HBK鸭排除了10种特定病原体,现已培育至第8代。本研究对获得的HBK鸭MHCⅠ区域基因组序列分析,旨在为鸭MHC基因和TAP基因的结构及功能提供了依据。

关键词：基因组序列分析单倍型 TAP MHC SPF

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J亚群禽白血病流行病学研究新进展

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中国家禽 2014年第16期36卷 38-40页

作者：邓小芸祁小乐张久丽华育平高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江职业学院黑龙江哈尔滨150111 东北林业大学林学博士后流动站黑龙江哈尔滨150040

J亚群禽白血病是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,J亚群禽白血病病毒(ALV-J)宿主范围开始扩展,已由肉种鸡扩大到蛋鸡以及地方品种鸡,对鸡群的致病性提高,发病鸡的临床表现越来越多样化,出现了血管瘤,严重威胁养禽业健康... 详细信息

J亚群禽白血病是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,J亚群禽白血病病毒(ALV-J)宿主范围开始扩展,已由肉种鸡扩大到蛋鸡以及地方品种鸡,对鸡群的致病性提高,发病鸡的临床表现越来越多样化,出现了血管瘤,严重威胁养禽业健康发展。ALV-J与其他免疫抑制性病毒的混合感染在我国部分养鸡场中普遍存在,使得鸡群免疫力低下,导致禽流感、新城疫等重要疫苗免疫失败,使疫病的诊断和防控难度加大。本文从分子流行病学的角度对ALV-J的发生发展进行综述,以期揭示ALV-J致病性增强的分子机制。

关键词： J亚群禽白血病流行病学进展

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多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达

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中国兽医科学 2014年第3期44卷 293-297页

作者：李影郭东春王淑亚张爱芹胡晓亮王雅静刘家森姜骞曲娟娟曲连东东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理，采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因，并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中，将重组表... 详细信息

为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理，采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因，并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中，将重组表达载体pET30a—prfA转化到大肠杆菌BL21（DE3）pLysS感受态细胞中，经IPTG诱导表达，进行SDS—PAGE分析和Western—blot分析。结果显示，这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95．6％～100％，在氨基酸水平上的同源性为98．9％～100％。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45．6ku，与预期的大小一致，以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应，具有良好的反应原性。

关键词：多杀性巴氏杆菌 prfA基因序列分析原核表达

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