检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2015年第6期36卷 134-137页

作者：吴少莲韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

鸡的C型凝集素样基因编码包括鸡自然杀伤(natural killer,NK)细胞受体在内的许多免疫分子。鸡C型凝集素样编码基因分别位于自然杀伤基因复合体(NK gene complex,NKC)和主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)区域,... 详细信息

鸡的C型凝集素样基因编码包括鸡自然杀伤(natural killer,NK)细胞受体在内的许多免疫分子。鸡C型凝集素样编码基因分别位于自然杀伤基因复合体(NK gene complex,NKC)和主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)区域,在NKC区为CD69和CD94/NKG2,在MHC区为相邻的B-NK和B-Lec基因。B-NK是目前唯一已证明表达于NK细胞上的凝集素样受体,其配体尚不清楚,但是已经证明B-NK能够和活化的细胞上的配体结合。论文主要讨论CD69、CD94/NKG、B-NK和BLec 4个基因的系统发育比较和蛋白质结构的研究进展。

关键词：鸡 NK细胞 C型凝集素样受体

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MDV感染B19、B21单倍型SPF鸡外周血淋巴细胞BLec1、BNK及细胞因子基因转录水平比较

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畜牧兽医学报 2015年第7期46卷 1184-1190页

作者：宁官保田文霞张园华张鼎张晓娜韩凌霞山西农业大学动物科技学院太谷030801 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 华中农业大学动物医学院武汉430070

本研究旨在揭示BLec1、BNK及细胞因子在B21和B19两种单倍型鸡对马立克病(MD)抗性差异中的可能机制。分别对B21和B19单倍型1日龄鸡腹腔接种马立克病毒(MDV)超强毒株,在攻毒后不同时间检测鸡外周血淋巴细胞中BLec1、BNK及IFN-γ、IL-4、IL... 详细信息

本研究旨在揭示BLec1、BNK及细胞因子在B21和B19两种单倍型鸡对马立克病(MD)抗性差异中的可能机制。分别对B21和B19单倍型1日龄鸡腹腔接种马立克病毒(MDV)超强毒株,在攻毒后不同时间检测鸡外周血淋巴细胞中BLec1、BNK及IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-18的基因转录水平。结果显示,在第4、7天,两种鸡BNK、BLec1和4种细胞因子水平表现出不同程度的降低。在第10天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IFN-γ、IL-4和IL-18基因转录量出现不同程度的升高,而B19单倍型鸡中细胞因子转录水平有所下降。在第13天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IL-18和IL-10基因转录量表现出不同程度的升高,而B19单倍型鸡中则有所下降。以上结果总体表明,MD耐受型鸡在感染沉默期BNK、BLec1和细胞因子转录量高于敏感型,不同遗传基因型鸡对MD的抗性差异与耐受基因及细胞因子的转录情况有着密切的关系。

关键词：细胞因子 BLec1 BNK 基因转录

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G2系和G5系鸡感染马立克氏病毒早期细胞因子转录水平的变化

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中国预防兽医学报 2015年第12期37卷 957-961页

作者：蔡文博吴少莲彭蔚宇王丽廷陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队黑龙江哈尔滨150001 常州市金坛区动物疫病预防控制中心江苏常州213200 山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

为研究主要组织相容性抗原(MHC)不同的G2系和G5系鸡在感染马立克氏病毒(MDV)后立即早期病毒复制及细胞因子转录水平的动态变化,本实验对14日龄G2和G5系SPF鸡滴鼻接种超强毒(vv MDV)Md5株,以28S r RNA基因为内参,利用双重荧光定量RT-PCR(... 详细信息

为研究主要组织相容性抗原(MHC)不同的G2系和G5系鸡在感染马立克氏病毒(MDV)后立即早期病毒复制及细胞因子转录水平的动态变化,本实验对14日龄G2和G5系SPF鸡滴鼻接种超强毒(vv MDV)Md5株,以28S r RNA基因为内参,利用双重荧光定量RT-PCR(dq RT-PCR)方法对接种后4 h、24 h、48 h和96 h肺淋巴细胞、脾脏和外周血淋巴细胞(PBL)中MDV meq、IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的m RNA含量进行检测。结果显示,接种后96 h仅在两品系感染鸡的肺淋巴细胞和脾脏中检测到了meq m RNA,G2系鸡群肺淋巴细胞中病毒m RNA含量高于G5系,但脾脏中较低。96 h肺淋巴细胞和脾脏中IFN-γ、IL-4和IL-10转录水平大幅上调,并且G2系鸡群均略高于G5。本研究结果提示G2系对MDV的抵抗能力强于G5,这两种品系鸡感染MDV后可能主要启动以Th2型为主的细胞免疫反应,为研究MDV对不同MHC单倍型鸡的致病性提供了实验依据。

关键词：马立克氏病毒 IFN-γ IL-18 IL-4 IL-10

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B19单倍型鸡BNK蛋白单克隆抗体的制备

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实验动物科学 2015年第3期32卷 1-5页

作者：吴少莲彭蔚宇王兴童文辉强廉传江陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

目的体外构建稳定表达鸡自然杀伤细胞(Natural killer,NK)BNK蛋白的细胞系,制备BNK蛋白的单克隆抗体,为鸡BNK蛋白及NK细胞的研究提供便利。方法利用BNK19原核表达产物免疫BALB/c小鼠,体外稳定表达疫病敏感性B19单倍型鸡BNK蛋白(BNK19)... 详细信息

目的体外构建稳定表达鸡自然杀伤细胞(Natural killer,NK)BNK蛋白的细胞系,制备BNK蛋白的单克隆抗体,为鸡BNK蛋白及NK细胞的研究提供便利。方法利用BNK19原核表达产物免疫BALB/c小鼠,体外稳定表达疫病敏感性B19单倍型鸡BNK蛋白(BNK19)的真核细胞系筛选单克隆抗体。结果用稳定表达BNK蛋白的真核细胞系筛选到2株BNK19特异性单克隆抗体。结论获得的单克隆抗体经鉴定具有免疫学活性,为鸡BNK蛋白及NK细胞的作用机制研究提供了条件。

关键词： B19单倍型鸡 BNK 单克隆抗体

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Gln对鸭瘟感染鸭十二指肠免疫调节相关基因表达量的影响

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实验动物科学 2015年第3期32卷 10-12,43页

作者：张圆圆赵丽丽王蕾牛银杰韩凌霞刘胜旺陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病创新团队哈尔滨150001

目的为谷氨酰胺(Glutamine,Gln)在正常鸭及鸭瘟(Duck plague,DP)模型中对肠道功能及作用途径的研究提供依据。方法 280只无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)7日龄雏鸭随机分为8组,四组梯度剂量每天灌喂Gln(0、0.5、1、2 g/kg饲料... 详细信息

目的为谷氨酰胺(Glutamine,Gln)在正常鸭及鸭瘟(Duck plague,DP)模型中对肠道功能及作用途径的研究提供依据。方法 280只无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)7日龄雏鸭随机分为8组,四组梯度剂量每天灌喂Gln(0、0.5、1、2 g/kg饲料)6d,及另四组灌喂同等梯度剂量Gln 6 d,于第一天灌喂30 min后攻0.2 m L2000TCID50鸭瘟病毒,观察Gln对正常雏鸭的免疫促进作用及攻毒鸭免疫应激的缓解作用。测定Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)通路基因表达量。结果 Gln显著提高正常组TLR4通路mRNA表达量(P<0.05),显著降低攻毒组表达量(P<0.05)。结论 Gln通过TLR4通路提高正常雏鸭肠道的免疫力,降低鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)造成的肠道免疫损伤。

关键词：谷氨酰胺鸭鸭瘟十二指肠 TLR4通路

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1型鸭肝炎病毒强毒株在雏鸭体内分布情况研究

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实验动物科学 2015年第3期32卷 13-15页

作者：赵丽丽刘海燕牛银杰祝明皓刘胜旺陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队哈尔滨150001 东北农业大学哈尔滨150001

目的利用建立的Taq荧光定量RT-PCR检测方法研究鸭肝炎病毒(DHV-1)强毒株在感染雏鸭体内早期的动态分布规律。方法本研究采用鸭肝炎病毒强毒株人工感染3日龄雏鸭,利用已建立的Taq荧光定量RT-PCR方法,对接种24 h内DHV-1强毒株感染雏鸭的... 详细信息

目的利用建立的Taq荧光定量RT-PCR检测方法研究鸭肝炎病毒(DHV-1)强毒株在感染雏鸭体内早期的动态分布规律。方法本研究采用鸭肝炎病毒强毒株人工感染3日龄雏鸭,利用已建立的Taq荧光定量RT-PCR方法,对接种24 h内DHV-1强毒株感染雏鸭的组织脏器进行了定量检测。结果接种后4 h即可在雏鸭心、肝、脑、肺、胰腺、回肠、盲肠、直肠、法氏囊和脾脏组织中检测到一定水平的病毒RNA,随着病程发展,RNA拷贝数持续升高,接种24 h后,肝脏中的病毒RNA拷贝数为最高,达到108.81copies/g,心、肺、肾、脾次之,约107copies/g。结论DHV-1强毒在雏鸭的早期感染雏鸭的实质器官、免疫器官和消化系统等均具有广泛的嗜性。

关键词：鸭肝炎病毒实时荧光定量PCR 雏鸭动态分布

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B19和B21单倍型鸡NK细胞受体B-NK19和B-NK21的多克隆抗体制备及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第12期30卷 1274-1277页

作者：杨超张晓娜许峰铭文辉强廉传江陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学研究团队黑龙江哈尔滨150001

目的利用大肠杆菌系统表达对多种禽病存在敏感性差异的B19和B21单倍型鸡NK细胞抑制性受体B-NK基因,并制备其多克隆抗体。方法分别提取B19和B21鸡外周血淋巴细胞总RNA,采用反转录PCR法扩增B-NK基因(分别命名为B-NK19和B-NK21),克隆至pET-... 详细信息

目的利用大肠杆菌系统表达对多种禽病存在敏感性差异的B19和B21单倍型鸡NK细胞抑制性受体B-NK基因,并制备其多克隆抗体。方法分别提取B19和B21鸡外周血淋巴细胞总RNA,采用反转录PCR法扩增B-NK基因(分别命名为B-NK19和B-NK21),克隆至pET-30a原核表达载体中,经酶切和PCR鉴定构建重组质粒。转入到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析外源蛋白的表达。将含有与组氨酸(His)标签融合表达的外源蛋白胶条切下,多点皮下免疫新西兰兔,分别制备B-NK19和B-NK21特异性多克隆抗体。利用Western blot法鉴定其组织相容性复合体(MHC)单倍型特异性。结果成功构建了原核表达重组质粒pET-B-NK19和pET-B-NK21,利用IPTG在37℃诱导4 h后目的蛋白获得表达,免疫5次后收获兔多克隆抗体,Western blot表明B-NK19和B-NK21蛋白存在免疫学交叉反应和部分特异性。结论对多种禽病具有敏感性差异的MHC单倍体型B19和B21鸡的NK细胞抑制性受体B-NK蛋白存在抗原反应交叉性,其多克隆抗体具有部分特异性。

关键词：鸡NK细胞受体 B-NK B19单倍型 B21单倍型多克隆抗体

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马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

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第十届全国免疫学学术大会

作者：李月健贾悦喻进张晨亮卢晓晓李娜娜李欣张宁张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太原市动物疫病预防控制中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室

研究背景:马立克病(MD)是鸡的一种病毒性肿瘤疾病,多年来虽获得了一定的成效,但马立克病仍经常发生。自1981年提出红细胞免以来,人们发现红细胞除运输氧气,还参与免疫、代谢等生理过程,而对鸡的红细胞免疫研究不够深入。

关键词：红细胞马立克病转录组测序红细胞免疫

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雏鸡红细胞免疫相关基因差异表达的时序性研究

雏鸡红细胞免疫相关基因差异表达的时序性研究

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第十届全国免疫学学术大会

作者：贾悦李月健喻进张晨亮李娜娜卢晓晓张宁李欣张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李建慧李桂兰闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太原市动物疫病预防控制中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室

研究背景:红细胞不仅可以运输O2、CO2和调节p H,其自身还拥有一定的免疫功能。红细胞免疫功能方面的研究在哺乳动物及人的无核红细胞中起步较早,发展已比较完善,但在禽类等有核红细胞中起步较晚,发展比较滞后。目的 :本试验就采用转录... 详细信息

研究背景:红细胞不仅可以运输O2、CO2和调节p H,其自身还拥有一定的免疫功能。红细胞免疫功能方面的研究在哺乳动物及人的无核红细胞中起步较早,发展已比较完善,但在禽类等有核红细胞中起步较晚,发展比较滞后。目的 :本试验就采用转录组测序(RNA-Seq)技术对雏鸡不同日龄的红细胞基因表达进行研究,筛选出红细胞差异表达基因,并对其进行相关生物信息学分析。以期发现雏鸡红细胞免疫系统中的重要基因,并分析其表达蛋白的相互关系及其参与的信号通路,为更深入地研究红细胞免疫分子机制、疾病防治及疫苗研制开辟新的途径。方法 :通过RNA-Seq技术筛选雏鸡发育过程中三个不同日龄(13、18和26日龄)红细胞差异表达基因,并对获得的差异表达基因(FC≥2)进行NR、Swiss-Prot、GO、COG和KEGG生物信息学分析。结果 :与13日龄相比,18日龄雏鸡红细胞中检测出319个差异表达基因,其中表达上调的有113个,下调表达的有206个;26日龄与13日龄相比,有693个差异表达基因,上调272个,下调421个;26日龄与18日龄相比,有854个差异表达基因,上调319个,下调535个。将获得的差异表达基因在各个数据库中比对,发现有近83%的差异表达基因可以得到有效注释;这些差异表达基因参与正常的细胞发育且涉及机体发育主要的信号通路;同时随着雏鸡日龄的增加,相关信号通路中所涉及的差异表达基因数量都在逐渐增加;其中红细胞发育、红细胞免疫系统发育和红细胞黏附能力的相关基因表达都呈现时序性变化。结论 :本试验发现雏鸡红细胞同其它成熟细胞一样,基因功能全面,广泛参与机体大多数的生物学过程;同时,随着雏鸡发育过程中机体免疫系统的逐渐完善,红细胞免疫系统以及黏附能力也趋于完善和成熟。为未来研究红细胞免疫的分子机制提供新的途径。

关键词：红细胞雏鸡红细胞免疫系统 RNA-Seq 差异表达基因信号通路

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马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

马立克病毒对鸡红细胞中免疫相关基因的影响

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：李月健贾悦喻进张晨亮卢晓晓李娜娜李欣张宁张鼎郝卫芳马海利高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳韩凌霞宁官保田文霞山西农业大学动物科技学院太谷030801 太原市动物疫病预防控制中心太原030024 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

研究背景：马立克病(MD)足鸡的一种病毒性肿瘤疾病，多年来虽获得了一定的成效，但马立克病仍经常发生。自1981年提出红细胞免以来，人们发现红细胞除运输氧气，还参与免疫、代谢等生理过程，而对鸡的红细胞免疫研究不够深入。

关键词：红细胞马立克病转录组测序红细胞免疫

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