检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医文摘 2014年第11期30卷 66-66页

作者：姜莉莉祁小乐高玉龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒（REV）长末端重复序列（LTR）的特异性引物作为检测引物，对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖，进行病毒的分离，经PCR和间接免疫荧光（IFA）方法鉴定，确定分... 详细信息

利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒（REV）长末端重复序列（LTR）的特异性引物作为检测引物，对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖，进行病毒的分离，经PCR和间接免疫荧光（IFA）方法鉴定，确定分离到2株REV，分别来自于针尾鸭和绿头鸭，将分离病毒分别命名为DBYR1101和DBYR1102。克隆2个病毒株的主要保护性抗原基因gp90，并进行序列分析。结果显示，2个分离株gp90基因氨基酸相似性为99．5％；DBYR1101gp90基因与REV3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95．7％、94．2％和98．2％；DBYR1102gp90基因与REV3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95．2％、93．7％和97．7％；与中国早期南方分离株HA9901的氨基酸序列相似性分别为94．7％和94．2％；与中国北方分离株氨基酸序列相似性为99．2％-100％。核苷酸遗传进化分析表明，2个野鸟源REV分离株与现有的东北分离株亲缘关系较近，趋于形成1个北方分离群；与SNV株亲缘关系最远；与170A株亲缘关系较远；与美国和中国台湾地区的某些分离株相似性较高。该研究首次自野鸭体内分离NREV，丰富了REV流行病学资料，同时提醒我们重视野生鸟类迁徙在疾病传播中所扮演的角色，为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定基础。

关键词：禽网状内皮组织增生症病毒分离株鉴定鸭源 gp90基因序列相似性间接免疫荧光 PCR检测

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基于ASFV转录报告系统的高通量筛选将臭椿酮鉴定为一种广谱抗病毒化合物

基于ASFV转录报告系统的高通量筛选将臭椿酮鉴定为一种广谱抗病毒...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：张宇航张振江张帆张继文焦俊侯敏钱年超赵东明郑晓峰谭旭湖南农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室清华大学医学院传染病研究中心清华大学药学院北京市结构生物学高精尖创新中心清华大学-北京大学生命科学联合中心合肥综合性国家科学中心大健康研究院

非洲猪瘟(ASF)是一种急性、高度传染性和致命的猪病毒性疾病,正在严重危害全球养猪业。但是,目前为止没有可用于ASF防控的权威疫苗和抗病毒药物。非洲猪瘟病毒(ASFV)是ASF的病原体,在ASFV蛋白中,p72是病毒体中最丰富的成分,不仅占病毒...

非洲猪瘟(ASF)是一种急性、高度传染性和致命的猪病毒性疾病,正在严重危害全球养猪业。但是,目前为止没有可用于ASF防控的权威疫苗和抗病毒药物。非洲猪瘟病毒(ASFV)是ASF的病原体,在ASFV蛋白中,p72是病毒体中最丰富的成分,不仅占病毒颗粒总质量的32%,还是病毒组装过程中的关键衣壳蛋白,因此是抗ASFV药物设计的潜在靶标。本研究中,我们构建了一个由p72启动子驱动的荧光素酶报告系统(p72-Fluc),该系统由共转染的ASFV RNA聚合酶复合物驱动转录。使用该系统,我们筛选了3000多种化合物并获得了三种有效的抗ASFV化合物。我们进一步评估了三种化合物抗ASFV的效果,并证明在三个候选物中,臭椿酮(AIL)在纳摩尔浓度下能有效抑制p72-Fluc系统的荧光强度和ASFV的复制(IC50=15 nmol/L)。此外,采用中国流行毒株ASFV-HLJ-2018毒株进一步评估AIL对野生毒株ASFV的抗病毒作用,血细胞吸附试验和蛋白质印迹试验结果表明,AIL可以剂量依赖性方式有效抑制该野生型ASFV毒株的复制。据报道,AIL会抑制HSP90与其辅助伴侣蛋白p23之间的相互作用,并导致HSP90的客户蛋白错误折叠或降解。我们在体外实验中,通过过表达和敲低HSP90的辅助伴侣蛋白p23,发现过表达p23能显著上调p72-Fluc系统的荧光强度和ASFV的感染比例,而敲低p23会下调p72-Fluc系统的荧光强度和ASFV的复制,表明AIL的抗病毒作用与其抑制HSP90-p23辅助伴侣蛋白有关,p23促进ASFV的复制并缓解AIL的抑制作用。近百种病毒蛋白已被报道为HSP90伴侣循环的客户蛋白,由于p23既是HSP90伴侣循环的重要元件也是AIL的靶标,我们推测AIL有可能成为一种广谱抗病毒药物,并评估了其对寨卡病毒(Zika)和乙型肝炎病毒(HBV)的抗病毒能力。结果表明,AIL对寨卡病毒和乙型肝炎病毒具有显著的抗病毒活性,进一步证明AIL是一种潜在的广谱抗病毒剂。据我们所知,这是第一份关于AIL广谱抗病毒作用的报告。未来的研究可能探索AIL作为抗病毒药物的精确分子机制和临床效果。

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