检索结果-内蒙古大学图书馆

我国牛病毒性腹泻/黏膜病研究进展及防控策略

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中国奶牛 2016年第11期 25-29页

作者：薛飞朱远茂马磊中国农业科学院哈尔滨兽医研究所大动物传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

本文从病毒分离及基因分型、血清流行病学、诊断方法、免疫研究四个方面介绍了我国牛病毒性腹泻黏膜病的研究进展情况,并提出了防控策略。

关键词：牛病毒腹泻/黏膜病研究进展防控策略

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常州市金坛区畜禽免疫抗体监测的情况分析

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2016年第12期 130-132页

作者：蔡文博吴少莲徐荣军陆则基周娟杨文卫韩凌霞陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 常州市金坛区动物疫病预防控制中心江苏常州213200

为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清... 详细信息

为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清样品进行O型、亚洲Ⅰ型FMD和小反刍兽疫(PPR)的抗体检测;利用血凝抑制试验(HI)对采集的933份鸡血清样品进行高致病性禽流感(HPAI)、新城疫(ND)的抗体检测。结果表明:HPAI、ND、HP-PRRS免疫效果最好,平均免疫抗体合格率基本达到100%;HP-PRRS平均免疫抗体合格率超过99%;PPR、CSF、猪FMD免疫效果较好,平均免疫抗体合格率分别为93.33%、88.84%、88.84%;羊FMD免疫效果良好,O型和亚洲Ⅰ型FMD平均免疫抗体合格率分别为80.00%和82.22%。说明常州市金坛区2015年度春防畜禽免疫情况总体良好,但在免疫程序、动物饲养管理以及免疫技术等方面仍需改进。

关键词：免疫猪瘟高致病性猪蓝耳病口蹄疫小反刍兽疫高致病性禽流感新城疫抗体检测酶联免疫吸附试验(ELISA)

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中国兽医科学 2016年第2期46卷 258-263页

作者：邵家日王显兵汪洋李媛刘素丽王琪陈莹高丽萍周长平辛九庆吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

为研究牛支原体脂质相关膜蛋白(LAMPs)激活MAPK信号通路诱导EBL细胞释放IL-1β的分子机制,用牛支原体脂质相关膜蛋白刺激EBL细胞,发现牛支原体LAMPs能够诱导IL-1β的表达。进一步研究表明,p38 MAPK,ERK MAPK和JNK MAPK信号通路在牛支原... 详细信息

为研究牛支原体脂质相关膜蛋白(LAMPs)激活MAPK信号通路诱导EBL细胞释放IL-1β的分子机制,用牛支原体脂质相关膜蛋白刺激EBL细胞,发现牛支原体LAMPs能够诱导IL-1β的表达。进一步研究表明,p38 MAPK,ERK MAPK和JNK MAPK信号通路在牛支原体LAMPs刺激EBL细胞诱导IL-1β表达中起重要作用。过表达TLR1、TLR2,LAMPs刺激EBL细胞,IL-1β的表达量增加。进一步研究表明,TLR接合体髓样化初级反应因子88(My D88)和IRAK4在LAMPs刺激IL-1β诱导中起重要作用。结果表明,牛支原体LAMPs刺激EBL由TLR2、TLR1、MyD88和IRAK4 MAPK信号通路细胞诱导IL-1β的表达。

关键词：牛支原体脂质相关膜蛋白 MAPK信号通路

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2009年～2012年内蒙古地区狂犬病毒分离株遗传变异分析与免疫保护效果研究

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中国预防兽医学报 2016年第6期38卷 458-462页

作者：周微微王金玲祖述龙王雪莲葛金英张立娜步志高东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010010

为了解内蒙古自治区狂犬病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,本研究于2009年~2012年,在内蒙古地区分离得到16株RABV,测序后获得16条N基因和G基因序列。序列分析表明N基因核苷酸相似性为86.5%~100%,G基因核苷酸相似性为83.9%~100%。N基因和... 详细信息

为了解内蒙古自治区狂犬病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,本研究于2009年~2012年,在内蒙古地区分离得到16株RABV,测序后获得16条N基因和G基因序列。序列分析表明N基因核苷酸相似性为86.5%~100%,G基因核苷酸相似性为83.9%~100%。N基因和G基因核苷酸遗传进化分析显示本次分离到的病毒株均属于基因I型,其中12株G蛋白V^(332)I突变属于亚洲Asian谱系,其他4株G蛋白T^(36)A突变属于Cosmopolitan谱系,为内蒙古主要流行的两个谱系。CTN-1(Asian谱系)和ERA(Cosmopolitan谱系)疫苗免疫BALB/c小鼠对分离株NM4(Asian谱系)和NM8(Cosmopolitan谱系)的攻击均能够提供有效保护。本研究初步证实了目前疫苗能够有效地保护人和动物对RABV的感染。

关键词：狂犬病毒遗传进化分析免疫保护

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副猪嗜血杆菌间接ELISA检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2016年第7期38卷 576-579页

作者：刘双红李大鹏徐胜奎谢芳李刚李婷孙斌王春来黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学方法,本实验采用重组表达的HPS细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(r Cdt B)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测HPS血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测HPS阳性血清和其他猪病病原... 详细信息

为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学方法,本实验采用重组表达的HPS细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(r Cdt B)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测HPS血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测HPS阳性血清和其他猪病病原阳性血清,除了HPS阳性血清呈阳性外,其余均为阴性,表明该方法特异性良好。批内重复和批间重复的最大变异系数分别小于7%和8%。此外,将Cdt B-ELISA方法与商品化试剂盒Bio Chek HPS-Opp A间接ELISA抗体检测方法对背景明确的116份HPS阳性血清和112份HPS阴性血清进行检测,商品化试剂盒阳性符合率为25%,阴性血清符合率为100%,总符合率为62%,其中Cdt B-ELISA方法对阳性血清的检出率高于商品化试剂盒。应用Cdt B-ELISA方法检测330份临床猪血清样品,结果显示,HPS抗体阳性检出率为11.8%。该方法可以用于HPS的临床检测,为HPS流行病学调查和防控提供了一种快速有效的检测方法。

关键词：副猪嗜血杆菌 rCdtB 间接ELISA

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大肠杆菌肽基脯氨酰顺反异构酶slyD基因缺失株的构建及生物学特性研究

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中国预防兽医学报 2016年第1期38卷 6-10页

作者：周薇刘松艳王曼宇衣菲田秋丰陈志宝刘思国于申业黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIases)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是专一性催化已磷酸化的丝/苏-脯氨酞顺/反异构。为研究大肠杆菌PPIases sly D基因缺失对其生物学特性的影响,本研究利用改进的Red重组方法构建大肠杆菌BL21株的sly D... 详细信息

肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIases)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是专一性催化已磷酸化的丝/苏-脯氨酞顺/反异构。为研究大肠杆菌PPIases sly D基因缺失对其生物学特性的影响,本研究利用改进的Red重组方法构建大肠杆菌BL21株的sly D缺失株,命名为BL21Δsly D;并通过突变株的形态学变化、生长特性、生化代谢特性、耐酸性、耐渗透压能力、耐温度缺氧能力对其进行鉴定。结果表明,缺失株生长速率、耐高温缺氧能力与亲本株相比差异不显著,然而突变株的耐酸性与耐渗透压能力则显著低于亲本株(p<0.01),表明大肠杆菌PPIases sly D基因可能影响双组份调控系统的调节作用。本研究构建的大肠杆菌sly D基因缺失株BL21Δsly D为进一步研究大肠杆菌sly D基因的功能奠定了基础。

关键词：大肠杆菌肽基脯氨酰顺反异构酶生物学特性环境压力

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中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 87-91页

作者：王琪汪洋李媛刘素丽邵家日陈莹高丽萍周长平李春艳辛九庆东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径。为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL)IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测... 详细信息

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径。为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL)IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测IL-1β的m RNA表达水平,结果显示LAMPs可以诱导EBL细胞分泌IL-1β,并确定Mmm的LAMPs刺激EBL细胞的最佳时间为6 h,最佳剂量为1μg/m L;将JNK、P38及ERK抑制剂分别加入培养的EBL细胞后,IL-1β的m RNA表达水平均受到显著抑制(p<0.05);将p CMV-HA-TLR2转染EBL细胞使其过表达和抗体封闭TLR2两种方式处理,并采用JNK、P38及ERK抑制剂分别处理EBL细胞,经检测过表达TLR2实验组的IL-1βm RNA表达水平上调,然而抗体封闭TLR2实验组的IL-1βm RNA表达水平下调,表明TLR2通过MAPK信号通路对IL-1β的分泌进行调控;采用牛IL-1β的ELISA试剂盒对细胞上清液中IL-1β浓度的检测结果显示,其与IL-1β的m RNA表达水平变化趋势一致。上述结果表明Mmm的LAMPs可以诱导EBL细胞,激活TLR2依赖的MAPK信号通路,从而引起IL-1β的分泌。

关键词：丝状支原体丝状亚种脂质相关蛋白 MAPK信号通路 IL-1β

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非人灵长类动物疫病研究进展

非人灵长类动物疫病研究进展

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：尹海畅赵丽丽陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

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鸡毒支原体S6株P25蛋白粘附特性的研究

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中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 105-110页

作者：高利萍李媛周长平刘素丽邵家日王琪陈莹王显兵辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用。为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码... 详细信息

鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用。为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码225个氨基酸,分子量约25 ku,将其命名为P25)。通过MG膜蛋白组分的提取及western blot鉴定,结果显示P25分布在MG膜的表面。利用PCR扩增MG p25基因并通过定点突变将其序列中TGA终止密码子突变为TGG(编码色氨酸),通过原核表达其编码的重组P25蛋白(r P25),并以r P25作为免疫原免疫兔子制备高免血清。激光共聚焦显微镜观察显示r P25和MG均对鸡胚成纤维细胞系(DF-1)具有明显的粘附作用,而ELISA和流式细胞仪检测结果则表明r P25和MG对DF-1细胞的粘附为特异性粘附,其中r P25抗血清可以明显抑制r P25和MG对DF-1细胞的粘附作用,从而证明P25为MG的一个粘附相关蛋白。

关键词：鸡毒支原体 DF-1细胞激光共聚焦 ELISA 流式细胞仪

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去除信号肽有利鸡白细胞介素-10在真核细胞胞浆的积聚

去除信号肽有利鸡白细胞介素-10在真核细胞胞浆的积聚

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：韩凌霞杨柳彭蔚宇王丽廷王兴童陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

目的分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,获得稳定表达chIL-10的细胞系.方法采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信号肽(euehIL-10F)和去信号肽(euchIL-1... 详细信息

目的分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,获得稳定表达chIL-10的细胞系.方法采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信号肽(euehIL-10F)和去信号肽(euchIL-10M)的chILL-10编码基因,克隆人含有报告基因eGFP和新霉素抗性基因(neo)的真核表达载体pEGFP-N1中,获得重组质粒N1-euchIL-10F和N1-euchIL-10M.分别转染中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1),经G418加压筛选、纯化,获得稳定表达chIL-10蛋白的CHO-K1细胞系,利用激光共聚焦试验观察外源蛋白的细胞定位.结果通过RT-PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验,表明euchIL-10F和euchIL-10M均整合入细胞基因组中,且N1-euchIL-10M在胞浆大量表达较强的绿色荧光,而N1-euchIL-10F表达的荧光较弱,且胞浆内含量很低.结论去除信号肽利于chIL-10基因在体外真核细胞胞浆的表达.

关键词：鸡白细胞介素-10 信号肽真核表达 CHO-K1细胞

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