检索结果-内蒙古大学图书馆

畜禽业 2003年第1期14卷 44-45页

作者：智海东王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

目前RNA病毒的反向遗传操作的发展非常迅速,已经在新城疫病毒得到应用。本文简述了新城疫病毒感染性分子克隆构建的基本机理,以及采用反向遗传操作技术利用新城疫病毒制备标记疫苗、研究病毒基因的结构与功能、制备表达外源基因的重组... 详细信息

目前RNA病毒的反向遗传操作的发展非常迅速,已经在新城疫病毒得到应用。本文简述了新城疫病毒感染性分子克隆构建的基本机理,以及采用反向遗传操作技术利用新城疫病毒制备标记疫苗、研究病毒基因的结构与功能、制备表达外源基因的重组病毒等方面的研究进展。

关键词：反向遗传操作新城疫病毒应用鸡感染性分子克隆

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DNA微阵列与基因表达研究概况

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动物医学进展 2003年第6期24卷 15-18页

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

DNA微阵列技术是 90年代兴起的一种对成百上千甚至上万个基因同时进行检测的新技术 ,它具有高通量和并行化的特点 ,广泛应用于基因表达、预测基因功能、检测基因突变和多态性分析、发现新药物和药物靶器官以及疫苗设计等方面。文章对 DN... 详细信息

DNA微阵列技术是 90年代兴起的一种对成百上千甚至上万个基因同时进行检测的新技术 ,它具有高通量和并行化的特点 ,广泛应用于基因表达、预测基因功能、检测基因突变和多态性分析、发现新药物和药物靶器官以及疫苗设计等方面。文章对 DNA微阵列的基本原理、DNA微阵列制备技术、杂交信号检测以及数据分析。 c DNA微阵列与细胞周期相关基因表达、细菌基因表达、病毒基因表达、肿瘤基因表达进行了概述。

关键词： DNA微阵列基因表达技术原理杂交信号检测基因功能基因突变多态性分析

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鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备

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农业生物技术学报 2003年第4期11卷 412-416页

作者：萨仁高娃刘胜旺孔宪刚丁忠庆乌尼哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室内蒙古农业大学动物科学与医学学院哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018

将编码鸡(Gallusgallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)原核表达载体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。SDS-P... 详细信息

将编码鸡(Gallusgallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)原核表达载体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。SDS-PAGE和Westernblot分析显示,表达的鸡IL-2融合蛋白分子量约为19kD。融合蛋白经薄层扫描发现目的蛋白表达量约占菌体蛋白的30%。包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-2融合蛋白及其纯化产物免疫家兔,制备兔抗鸡IL-2多克隆抗血清,并用琼脂扩散实验对多克隆抗血清进行鉴定,表明其与纯化的重组鸡IL-2蛋白具有良好的反应性,而且该反应是特异的。

关键词：鸡IL-2融合蛋白表达抗体制备

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旋毛虫排泄/分泌抗原研究进展

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动物医学进展 2003年第1期24卷 58-61页

作者：郑宝亮宋铭忻王秀荣路义鑫东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

旋毛虫病由于其对人、畜危害严重历来被人们所重视 ,其免疫防制是当今国内外学者研究的重要方向。通过对旋毛虫几种抗原的对比研究 ,排泄 /分泌抗原效果最好 ,它具有双重的免疫学功能 ,成为众多学者研究的热点 ,人们对排泄 /分泌抗原成... 详细信息

旋毛虫病由于其对人、畜危害严重历来被人们所重视 ,其免疫防制是当今国内外学者研究的重要方向。通过对旋毛虫几种抗原的对比研究 ,排泄 /分泌抗原效果最好 ,它具有双重的免疫学功能 ,成为众多学者研究的热点 ,人们对排泄 /分泌抗原成分进行了大量研究。作为蛋白质其主要成分是三种糖蛋白 (分子量分别为4.5万 ,4.9万 ,5.3万 ) ,他们可以发生免疫学交差反应。目前人们已经获得了编码这三种蛋白的基因序列 ,并通过分子生物学技术对其基因进行克隆和表达 ,将表达蛋白用于旋毛虫病的防制。本文介绍了旋毛虫排泄 /分泌抗原的组成成分与功能 ,以及检测抗原和免疫原方面研究状况。

关键词：旋毛虫旋毛虫病排泄/分泌抗原制备检测抗原免疫原

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部分省市猪群猪流感的血清学调查及猪流感病毒的分离与鉴定

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动物医学进展 2003年第3期24卷 67-72页

作者：李海燕于康震辛晓光李雁冰蔡雪辉杨焕良毕英佐王自振中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 华南农业大学动物科学学院广东广州510642 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

对黑龙江、吉林、辽宁、安徽、山东、内蒙、河南、河北、江苏、安徽、浙江、湖北、福建、广东、海南、上海等省、市猪群进行了猪流感的血清学和病原学调查研究。从 130 6份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到 39株H3N2亚型猪... 详细信息

对黑龙江、吉林、辽宁、安徽、山东、内蒙、河南、河北、江苏、安徽、浙江、湖北、福建、广东、海南、上海等省、市猪群进行了猪流感的血清学和病原学调查研究。从 130 6份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到 39株H3N2亚型猪流感病毒 ,12株 H1亚型猪流感病毒及其它亚型猪流感病毒 ,病毒粒子在透射电镜下呈现典型的正粘病毒特征 ,有囊膜和纤突 ,多为椭圆形、圆形、或杆形 ,直径约 80～ 12 0 nm。对 1997- 2 0 0 1年 3895份猪血清的血清学调查结果表明 ,近年中国多个地区猪群存在抗SWTN77(H1)、SWCO77(H3)、DKAT6 9(H1)、TKUK6 3(H3)流感病毒抗体 ;1998年来自河北的猪血清中抗 SWTN77阳性率高达 33.3% ;1999年来自内蒙的猪血清中抗 TKUK6 3和SWCO77阳性率分别为 13.3%和 2 6 .7% ;2 0 0 0- 2 0 0 1年调查的所有省市的猪群中均存在抗SWCO77抗体 ,阳性率从 3.2 %～ 10 0 %。说明近年我国猪群中

关键词：猪群猪流感血清学调查流感病毒分离鉴定

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猴天花在美暴发

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畜牧兽医科技信息 2003年第7期19卷 63-页

作者：安同庆仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

"非典恐慌"尚未完全平息的美国,西尼罗病在24个州卷土重来,而且中西部地区又暴发了"猴天花".这是西半球首次发现人感染猴天花的病例.

关键词：天花病例痘疹天花疫苗猴痘病毒啮齿类动物野生动物土拨鼠天花病毒痘病毒

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马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株及其亲本驴强毒株长末端重复序列(LTR)的启动子活性比较

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病毒学报 2002年第4期18卷 342-347页

作者：周家喜孔宪刚张宝山刘胜旺刘丽玲孙成群刘相东刘永刚杨威中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将马传染性贫血病毒驴强毒(donkey adaptedequineinfectiousanemiavirus,D AEIAV)、马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒(donkeyleukocyteattenuatedEIAV,DLAEIAV)及EIAVWyoming株的全长长末端重复序列(LTR)分别克隆到报告基因载体pCAT Basicvector中,获得重组质粒p D A LTR CAT、p DLA LTR CAT及p Wyo LTR CAT。将这3个重组质粒分别体外转染EIAV阴性健康驴的白细胞,比较这三者LTR启动报告基因CAT表达的基础活性和在tat pcDNA3共转染条件下激活活性的差异。结果表明:在驴白细胞中,DLAEIAVLTR启动CAT表达的活性略高于D AEIAVLTR;而与EIAVWyoming株LTR比较,DLAEIAV与D AEIAV二者LTR启动CAT表达的活性都较低。在有共转染重组表达质粒tat pcDNA3条件下,D AEIAV、DLAEIAV及EIAVWyoming株LTR起始CAT表达的活性都得到提高,分别提高了4 8倍、6 0倍和3 2倍。上述结果提示,LTR可能是体现DLAEIAV驴白细胞适应性的因素,不一定是影响其毒力减弱的根本原因。

关键词：马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株亲本驴强毒株长末端重复序列启动子活性比较

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猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株非结构基因的分子克隆及其基因特征的研究

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 81-87页

作者：刘光清薛强仇华吉蔡雪晖童光志郭宝清中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;... 详细信息

对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;与LV株的核苷酸同源性分别为 5 4%、6 3.3%。ORF1编码两个聚合蛋白 ,其中ORF1a编码的聚合蛋白经裂解后产生 6个成熟的非结构蛋白 (Nsp1α、Nsp1β、Nsp2_5 ) ,以Nsp2的变异性最为显著 ,它与LV株的氨基酸同源性为 41%。ORF1b编码的聚合蛋白经裂解后 ,产生 4个成熟的非结构蛋白 (RdRpCP2_4) ,其中RdRp为病毒的复制酶 ,CP4表现出较大的变异性 ,与LV株的氨基酸同源性为 48%。在ORF1a_ORF1b的衔接区有保守的庚核苷酸滑动序列和拟节结构 ,它们是核糖体移码翻译所必需的结构。在基因组末端存在非编码区 ,其中 5’NCR长 190nt,比LV株 5’NCR短 31nt,其核苷酸同源性为 6 1%。 3’NCR长 15 1nt,比LV株 3’NCR长 37nt,保守性稍高 ,其与VR2 332株和LV株的核苷酸同源性分别为 95 .4%和 78.2 %。在 3’NCR末端有一个poly(A)尾巴 ,长 2 0nt。在Poly(A)尾上游有保守的八核苷酸序列 ,是复制酶识别并结合的区域。

关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒 CH-1a株非结构基因分子克隆基因特征序列分析非结构蛋白编码区

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细胞免疫与PRRSV感染

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中国预防兽医学报 2002年第3期24卷 237-250页

作者：孙庆申蔡雪晖童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）于1987年首先暴发于美国，然后迅速向世界各地蔓延。该病病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），1991年在荷兰首次分离到，以后在美国、加拿大、欧洲国家、中国以及日本陆续分离到。根据形态学及生化特性... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）于1987年首先暴发于美国，然后迅速向世界各地蔓延。该病病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），1991年在荷兰首次分离到，以后在美国、加拿大、欧洲国家、中国以及日本陆续分离到。根据形态学及生化特性将其归入动脉炎病毒科，该病毒为有囊膜的单股正链RNA病毒，含有8个读码框。

关键词：细胞免疫 PRRVS感染分子基础猪繁殖呼吸综合征

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禽用基因工程疫苗的研究进展及应用前景

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中国家禽 2002年第19期24卷 3-9页

作者：童光志兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 150001

疫苗研究的历史回顾原始疫苗自然强毒苗:仅限非致死性病原,如口蹄疫,牛痘,一些疱疹病毒病等.自然弱毒苗:火鸡疱疹病毒,伪狂犬病,传染性喉气管炎等.

关键词：禽基因工程疫苗应用现状发展

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