检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 44-45页

作者：孟庆文曹素芳李媛金红于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

拟构建绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＰ）基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ_３ＧＦＰ，并观察其在ＭＤＣＫ细胞（大肾细胞系）中的表达。以Ｎｏｔ　Ⅰ切取ＧＦＰ后插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ_... 详细信息

拟构建绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＰ）基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ_３ＧＦＰ，并观察其在ＭＤＣＫ细胞（大肾细胞系）中的表达。以Ｎｏｔ　Ⅰ切取ＧＦＰ后插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ_3，以ＢａｍＨⅠ鉴定方向，以ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥＴＭ将ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ转染至培养的ＭＤＣＫ，经Ｇ４１８筛选ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ阳性克隆，荧光显微镜下观察。结果证实成功构建了含ＧＦＰｃＤＮＡ的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ，并成功转染ＭＤＣＫ，在荧光显微镜下阳性克隆细胞呈绿色。ＧＦＰ基因可在ＭＤＣＫ细胞中成功表达，并发出绿色荧光，是一良好的报告基因和筛选标记。

关键词：绿色荧光蛋白真核表达载体构建表达检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

马传贫病毒白细胞弱毒疫苗毒株反转录酶基因克隆及序列分析比较

引用

中国预防兽医学报 2000年第2期22卷 99-101页

作者：张宝山刘永刚卢景良孔宪刚刘胜旺杨威马云燕中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

本实验从商品化马传贫弱毒疫苗培养物提纯马传贫疫苗毒病毒粒子并抽提病毒RNA后 ,采用RT_PCR方法扩增并首次克隆了马传贫驴强毒反转录酶 (RTase)基因。经核苷酸序列测定得出反转录酶基因全长 1 6 6 8bp ,编码 5 5 6个氨基酸。通过与已... 详细信息

本实验从商品化马传贫弱毒疫苗培养物提纯马传贫疫苗毒病毒粒子并抽提病毒RNA后 ,采用RT_PCR方法扩增并首次克隆了马传贫驴强毒反转录酶 (RTase)基因。经核苷酸序列测定得出反转录酶基因全长 1 6 6 8bp ,编码 5 5 6个氨基酸。通过与已发表其它马传贫病毒反转录酶基因序列比较 ,发现在氨基酸和核苷酸水平差异率分别为 1 4 .0 %和 1 6 .6 %。变异氨基酸随机分布于整个基因上 ,无明显规律。在反转录病毒高度保守的酶基因上发现这样大的差异 ,展示出马传贫驴强毒作为马传贫弱毒疫苗亲本毒株的独特分子特性。

关键词：马传贫驴强毒反转录酶基因克隆序列分析 EIAV

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RT-PCR快速诊断禽流感

引用

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 176-177页

作者：刘明于康震崔尚金孔宪刚唐秀英徐宜为中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果，设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物，不经病毒分离，直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸，ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出３２６ｂｐ的ＮＰ基因片段。采用... 详细信息

根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果，设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物，不经病毒分离，直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸，ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出３２６ｂｐ的ＮＰ基因片段。采用该技术对１４个亚型禽流感病毒标准参考株，４个亚型１２株国内分离野毒株，ＲＴ－ＰＣＲ检测的结果都呈阳性；对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒以及减蛋综合症病毒，ＲＴ－ＰＣＲ扩增结果都呈阴性。禽流感病毒Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ（Ｈ５Ｎ１）和Ａ／Ａｆｒｉｃａｎ　Ｓｔａｒｌｉｎｇ／Ｅｎｇｌａｎｄ（Ｈ７Ｎ１）实验感染鸡样品ＲＴ－ＰＣＲ检测与鸡胚病毒分离阳性率分别为３４／４２、３２／４２；２４／５５、２４／５５，二者符合率大于９５％。ＲＴ－ＰＣＲ最少可检测到１０ｐｇ的病毒核酸。对山东某地发病鸡场样品进行ＲＴ－ＰＣＲ检测，只用６个小时就可得出准确的诊断结果，证明ＲＴ－ＰＣＲ检测方法敏感特异，可用于禽流感的快速诊断。

关键词：禽流感病毒诊断反转录-聚合酶链式反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用杆状病毒系统高效表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因

引用

中国预防兽医学报 2000年第4期22卷 278-281页

作者：周艳君仇华吉王云峰钱平蔡雪晖柴文君翁长江童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_la株囊膜糖蛋白 (GP5 )基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中 ,与杆状病毒线性DNA(Bac_N_BlueTMDNA)共转染昆虫细胞sf9,经过三轮蚀斑纯化后 ,获得重组杆状病毒rBac_GP5。用该重组病毒感染sf9细胞... 详细信息

将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_la株囊膜糖蛋白 (GP5 )基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中 ,与杆状病毒线性DNA(Bac_N_BlueTMDNA)共转染昆虫细胞sf9,经过三轮蚀斑纯化后 ,获得重组杆状病毒rBac_GP5。用该重组病毒感染sf9细胞后 ,应用间接免疫荧光试验、SDS_PAGE和Westernblot检测表明 ,GP5基因在杆状病毒系统中获得了高效表达 ,表达产物因糖基化程度差异 ,表观分子量有 2 2、2 5和 30kDa三种总计约占细胞蛋白总量的 2 6 .4%。

关键词：杆状病毒表达系统 GP5基因 PRRS 重组疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽轮状病毒的分离鉴定及部分特性研究

引用

中国预防兽医学报 2000年第1期22卷 1-2页

作者：崔尚金王云峰邓国华于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

从北京某自然腹泻的鸡场中成功地分离到一株禽轮状病毒,并经鸡胚单层肝细胞和MA104 细胞进行了传代培养,对其生物学特性作了部分研究,从而为我国禽轮状病毒的毒株鉴定。

关键词：禽轮状病毒分离鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人与动物流行性感冒病毒

引用

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 185-188页

作者：崔尚金宋晓华王凯波于康震刘尚高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

流行性感冒病毒是引起人与动物流感的重要病原。正如世界卫生组织的一位官员所说，今后２０年很可能再次发生大范围的流感流行。鉴于此，本文综述了流感病毒结构组成和形态学、基因组结构及功能、复制、宿主范围、宿主特异性的遗传基础... 详细信息

流行性感冒病毒是引起人与动物流感的重要病原。正如世界卫生组织的一位官员所说，今后２０年很可能再次发生大范围的流感流行。鉴于此，本文综述了流感病毒结构组成和形态学、基因组结构及功能、复制、宿主范围、宿主特异性的遗传基础、传播和感染、遗传变异（转换和漂移）以及预防和治疗等方面的最新知识，以便帮助人们认识流感与禽流感，从而更好地防制该病。１概述流行性感冒病毒（以下简称流感病毒）是人类与动物呼吸道疾病的重要病原。大多数人经历过流感感染，临床症状为高热和疲劳。人们通常不需要治疗就可在一周内康复。但对于老年人和患有潜在性（心脏的，代谢的和呼吸的）疾病的人，流感传染可以致命。在挪威，在严重的流行病期间，流感在１个季度里引起大约１０００－２０００人死亡。在２０世纪，大的流感流行已经发生多次，在大的流行的间隔中还有小的流行，这表现为死亡率（包括健康的年轻的人）极大的增加。流感引起巨大的经济上的损失，除了较高的医疗保健成本外，还包括由于工作的中断而造成的劳动力的巨大的损失。流感病毒通过变异或／和基因重组一直发生变化，这使它能逃脱宿主机体以前因感染已具备的免疫。对Ａ型流感最有效的预防措施是注射疫苗预防或抗病毒药预防。由于病毒总在...

关键词：流感病毒亚型抗原性动物宿主范围编码流感病毒病流行性感冒聚合酶蛋白宿主蛋白血凝素亚单位疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株鸭源H5N1亚型禽流感病毒株部分基因的克隆及序列分析

引用

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 182-183页

作者：李建伟李曦于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室唐秀英田国彬邓国华崔尚金傅朝阳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

禽流感病毒（ＡＩＶ）属正粘病毒科Ａ型流感病毒属。据其血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）抗原性的不同，可分为１５个ＨＡ亚型和９个ＮＡ亚型，其中Ｈ５和Ｈ７亚型的高致病力毒株可引起高致病性禽流感（ＨＰＡＩ）的发生。到目前为... 详细信息

禽流感病毒（ＡＩＶ）属正粘病毒科Ａ型流感病毒属。据其血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）抗原性的不同，可分为１５个ＨＡ亚型和９个ＮＡ亚型，其中Ｈ５和Ｈ７亚型的高致病力毒株可引起高致病性禽流感（ＨＰＡＩ）的发生。到目前为止，ＨＰＡＩ已在全世界发生数次大暴发，每一次大暴发都给当地养禽业造成巨大的经济损失。因此，多年来禽流感一直受到禽病工作者的密切关注。尤其是１９９７年香港发生了ＡＩＶ感染人的事件，在全世界引起了轩然大波，世界卫生组织投入了大量的人财物力进行禽流感方面的研究。我国的禽流感研究工作者也付出了艰苦的努力，在禽流感研究方面取得了极大的进展。我国于１９９６年从鹅体内分离到一株对鸡具有高致病力的ＡＩＶ－Ａ／Ｇｏｏｓｅ／ＧｕａｎｇＤｏｎｇ／９６（Ｈ５Ｎ１），并进行了基因克隆和测序。今年，又从鸭体内分离到一株ＡＩＶ，血凝抑制（ＨＩ）和神经氨酸酶抑制（ＮＩ）实验结果表明是Ｈ５Ｎ１亚型。我们对其核蛋白（ＮＰ）基因、基质蛋白（Ｍ）、聚合酶（ＰＢ１、ＰＢ２）基因及ＨＡ、ＮＡ基因分别进行了克隆和测序，结果表明各基因片段长度分别为：ＨＡ－１７３１ｂｐ，ＮＡ－１３７１ｂｐ，ＮＰ－１５４２ｂｐ，Ｍ－１０２０ｂｐ，ＰＢ１－２３?

关键词：禽流感病毒流感病毒群亚型 H5N1 基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡细胞因子研究进展

引用

中国预防兽医学报 2000年第6期22卷 474-476页

作者：刘胜旺孔宪刚卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

与人类和哺乳动物比较 ,以鸡为主的非哺乳动物细胞因子的研究不但在研究鸡免疫系统的发生及其免疫调节机理中具有重要作用 ,而且在与人类和哺乳动物的比较免疫学、生物发育和进化的研究中具有重要意义。本文从发现、生物学特性及分子特... 详细信息

与人类和哺乳动物比较 ,以鸡为主的非哺乳动物细胞因子的研究不但在研究鸡免疫系统的发生及其免疫调节机理中具有重要作用 ,而且在与人类和哺乳动物的比较免疫学、生物发育和进化的研究中具有重要意义。本文从发现、生物学特性及分子特征等方面对鸡白细胞介素 - 1、6、8、骨髓单核细胞生长因子、转移生长因子_β家族、肿瘤坏死因子_α。

关键词：鸡细胞因子免疫调节白细胞介素肿瘤坏死因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB在重组鸡痘病毒中的表达

引用

中国预防兽医学报 2000年第3期22卷 205-208页

作者：张绍杰童光志王柳仇华吉倪建强孟松树于力王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

本试验首先用PCR方法扩增出ILTVgB基因 ,将其克隆到质粒pUC1 1 9中 ,并进行了序列分析。将克隆的gB基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中 ,然后 ,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,筛选蓝色的重组病毒 ,并... 详细信息

本试验首先用PCR方法扩增出ILTVgB基因 ,将其克隆到质粒pUC1 1 9中 ,并进行了序列分析。将克隆的gB基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中 ,然后 ,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,筛选蓝色的重组病毒 ,并对其进行了 6轮蚀斑纯化。该重组病毒通过PCR方法鉴定证明其基因组中含有完整的鸡传染性喉气管炎gB基因。

关键词：鸡糖蛋白gB 重组鸡痘病毒 ILTV 基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽流感病毒河北株的分离鉴定

引用

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 175-176页

作者：李曦田国彬唐秀英于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ）是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类的病毒性传染病，被国际兽疫局确定为Ⅰ类烈性传染性病。该病毒属正粘病毒科，几乎所有的野生与家养禽类均可感染。１８７８年在意大利的鸡群中首次暴发，其后... 详细信息

禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ）是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类的病毒性传染病，被国际兽疫局确定为Ⅰ类烈性传染性病。该病毒属正粘病毒科，几乎所有的野生与家养禽类均可感染。１８７８年在意大利的鸡群中首次暴发，其后许多国家和地区都相继报道ＡＩＶ存在的事实，近几年，我国在不同地区都分离到禽流感病毒，广泛存在的主要是Ｈ９亚型病毒，且多为中等以下毒力的毒株。本试验采集病料主要针对河北省养鸡业较为发达的几个县市的七个小型养鸡场，选择未注过流感疫苗，临床症状出现产蛋下降和呼吸道症状严重的鸡只，剖杀，采集病变明显的脏器，如胰、肝、肺、脾、气管、肾、泄殖腔及其干酪样物等，剪碎研磨，加抗生素处理后，接种９－１０日龄鸡胚，弃掉２４小时内死亡的鸡胚，收集２４－７２小时死亡鸡胚的尿囊液，盲传三代，并做血凝试验，对于ＨＡ阳性的样品，进一步做ＨＩ试验，结果有２株禽流感病毒为Ｈ９亚型；进一步测定其神经氨酸酶活性，结果为Ｎ２。取１：１０稀释的尿液０．２ｍｌ肌肉接种８只８周龄ＳＰＦ鸡测其致病力指数，观察１０天内鸡只发病情况，结果第三天鸡群精神稍有沉郁，其中一只出现歪脖的神经症状。

关键词：禽流感病毒 H9N2 分离鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：