检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 85-89页

作者：崔尚金于康震唐秀英刘明田国彬李建伟刘尚高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094

本研究对分离到的Ｈ３Ｎ８禽流感病毒株（分离株Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９８，以下简称Ｊ１株）和传代过程中发生变异的变异株（Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９９，以下简称Ｊ２株）进行了生物学和病理学特性的初步研究，发现在... 详细信息

本研究对分离到的Ｈ３Ｎ８禽流感病毒株（分离株Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９８，以下简称Ｊ１株）和传代过程中发生变异的变异株（Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９９，以下简称Ｊ２株）进行了生物学和病理学特性的初步研究，发现在相同的时间内，Ｊ１株病毒致死鸡胚数量明显高于Ｊ２株病毒，病毒ＨＡ的滴度也明显高于Ｊ２；Ｊ１株的ＩＰＶＩ为１．４４，而Ｊ２为０．６４；毒株的致病性试验与ＳＰＦ感染鸡的器官变化表明Ｊ１组的病理学变化较Ｊ２组明显，且主要的嗜器官为肺、肝、法氏囊、胸腺、脾等主要的免疫器官；本研究还对ＳＰＦ感染鸡的病变器官进行了病原学检测、病理组织检测和电镜观察。结果表明两者存在较明显的差异。

关键词：禽流感病毒 H3N8 生物学特征

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牛传染性支气管炎病毒PCR诊断方法的研究

引用

黑龙江畜牧兽医 2000年第4期 1-2页

作者：张桂红童光志王柳仇华吉赵晓岩张绍杰刘宝全东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特... 详细信息

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特异性片段。用此引物对其同属的伪狂犬病毒 (PRV)、马立克氏病毒 (MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒 (ILTV)进行扩增 ,均未见特异性条带 ,证明该引物是特异的 ;检测PCR的敏感性表明 ,该法可检测出 3 pg的病毒DNA。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gB基因 PCR诊断方法

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猪生殖-呼吸道综合征病毒CH-1a株结构蛋白基因的克隆与序列分析

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 2000年第2期10卷 147-153页

作者：童光志仇华吉周彦君郭宝清张绍杰王柳蔡雪晖刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

应用RT-PCR方法克隆了我国首次分离的PRRS病毒CH-1a株的6种结构蛋白基因(ORF2～7),并进行了核苷酸序列测定。利用序列分析软件分析了各基因编码产物的分子量、等电点、疏水性、抗原性和糖基化位点等,并与欧美毒株进行了比较,绘制了其系... 详细信息

应用RT-PCR方法克隆了我国首次分离的PRRS病毒CH-1a株的6种结构蛋白基因(ORF2～7),并进行了核苷酸序列测定。利用序列分析软件分析了各基因编码产物的分子量、等电点、疏水性、抗原性和糖基化位点等,并与欧美毒株进行了比较,绘制了其系统发育进化树。结果显示CH-1a株与流行于北美洲的PRRS病毒株遗传关系很近,而与欧洲的病毒株遗传关系较远,表明流行于我国的PRRS病毒可能来自北美洲。

关键词：猪蛋白基因克隆序列分析 PRRS病毒

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病毒遗传学分析及在疾病防制上的应用

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 194-196页

作者：宋晓华崔尚金王凯波闫林海中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 沈阳市于洪区畜牧技术推广站沈阳110000

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西北地区新城疫病毒分离株F基因的克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第5期22卷 351-355页

作者：梁荣曹殿军陈杰李健强中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 西北农林科技大学动物科学与动物医学学院杨凌712100

从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RN... 详细信息

从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RNA ,RT_PCR扩增其融合蛋白 (F)基因N端 90 8bp的片段 ,经回收、鉴定后 ,克隆到pGEM_T载体上进行核苷酸序列测定。对各毒株核苷酸及推导的氨基酸进行序列和同源性的比较 ,结果表明所有毒株在该区段没有缺失和插入 ,但有多处碱基置换。各分离毒株之间同源性很高 (平均 96 .8% ) ,与疫苗毒株同源性较低 (82 .5 %～ 85 .8% ) ,而分离自青海省的 3个毒株与其他毒株的同源性均较低 (平均 88.0 % )。以 389bp核苷酸绘制系统发育树 ,证实西北地区的新城疫是由基因型Ⅶc和一个新发现的基因型Ⅸ引起的。

关键词： NDV F基因克隆测序系统发育树西北地区新城疫病毒

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马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗gag基因的序列测定及分析

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病毒学报 2000年第4期16卷 361-364页

作者：杨威张宝山刘永刚刘胜旺孔宪刚曹殿军刘相冬卢景良刘宝全刘建华东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学公共卫生学院黑龙江哈尔滨150001

以马传染性贫血病毒 (EIAV)驴白细胞弱毒疫苗株 (DLA)病毒基因组RNA为材料 ,用RT PCR方法扩增出EIAVgag基因 ,经平端连接将其克隆到质粒载体 pUC19中。由于疫苗不是克隆株 ,因此通过 5次单独克隆与测序 ,推导出EIAV DLA gag基因的优势... 详细信息

以马传染性贫血病毒 (EIAV)驴白细胞弱毒疫苗株 (DLA)病毒基因组RNA为材料 ,用RT PCR方法扩增出EIAVgag基因 ,经平端连接将其克隆到质粒载体 pUC19中。由于疫苗不是克隆株 ,因此通过 5次单独克隆与测序 ,推导出EIAV DLA gag基因的优势序列。gag基因全长 145 8个碱基 ,编码一 486个氨基酸残基的前体蛋白。与美国EIAVWyoming 136 9株比较 ,核苷酸同源性为 80 % ,氨基酸同源性为 84 47%。其中 ,衣壳蛋白P2 6的主要同源区 (MHR)、核衣壳蛋白P11的两个CCHC型锌指结构及酸性蛋白P9的YXXL基元为高度保守的结构。为进一步研究马传染性贫血病毒弱毒疫苗的致弱机理提供了理论依据。

关键词：马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒核苷酸序列

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新型兽用疫苗的研究进展

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生物技术通报 2000年第4期16卷 28-32页

作者：智海东刘红全童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

新型兽用疫苗是免疫学和病毒学的研究热点 ,主要包括亚单位疫苗、基因工程缺失苗、重组病毒活载体疫苗和基因疫苗。目前已经被广泛的应用于研究和疫病的防治上。最近的疫苗发展方向集中于在基因疫苗上。高效、安全、稳定、成本低是疫苗... 详细信息

新型兽用疫苗是免疫学和病毒学的研究热点 ,主要包括亚单位疫苗、基因工程缺失苗、重组病毒活载体疫苗和基因疫苗。目前已经被广泛的应用于研究和疫病的防治上。最近的疫苗发展方向集中于在基因疫苗上。高效、安全、稳定、成本低是疫苗开发的重点。本文介绍了新型疫苗的现状 ,以及今后发展的趋势和策略。

关键词：免疫亚单位疫苗基因缺失疫苗兽用疫苗

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伪狂犬病病毒Bartha-K61株TK基因的分离鉴定

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中国兽医科技 2000年第3期30卷 6-7页

作者：仇华吉周彦君孔令达张绍杰钱平王柳童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学内蒙古呼和浩特010018

提取伪狂犬病病毒 (PRV )Bartha K61株基因组DNA ,用限制性内切酶KpnⅠ充分消化 ,回收 5 .9× 10 3 b片段(J片段 ) ,将其克隆于质粒 pUC119KpnⅠ位点上 ,获得pBKJ。用一对针对PRVTK基因的特异性引物对重组质粒进行PCR鉴定 ,证明其... 详细信息

提取伪狂犬病病毒 (PRV )Bartha K61株基因组DNA ,用限制性内切酶KpnⅠ充分消化 ,回收 5 .9× 10 3 b片段(J片段 ) ,将其克隆于质粒 pUC119KpnⅠ位点上 ,获得pBKJ。用一对针对PRVTK基因的特异性引物对重组质粒进行PCR鉴定 ,证明其中含有PRVTK基因。然后用KpnⅠ、PstⅠ和BamHⅠ等限制性内切酶对其进行酶切分析 ,确定了克隆片段的物理图谱。进一步研究证实TK基因位于其中的KpnⅠ BamHⅠ或KpnⅠ PstⅠ片段中。然后亚克隆此KpnⅠ PstⅠ片段 ,并进行了序列测定。

关键词：伪狂犬病病毒 TK基因病毒活载体分离鉴定

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鸡贫血病毒荷兰弱毒株基因序列比较研究

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中国预防兽医学报 2000年第2期22卷 116-119页

作者：辛九庆宋秀龙周方红杨雨辉于健陈奖励中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所哈尔滨150070

用CA5、CA6和CA7、CA8两对引物对鸡贫血病毒荷兰弱毒株进行PCR扩增。将扩增产物 1 .5kb和 0 .8kb的DNA片段分别克隆到pUC1 1 9、pBluescript(SK +)载体质粒中 ,并进行核苷酸序列分析。通过与 2 6P4毒株进行核苷酸序列比较发现二者有 32... 详细信息

用CA5、CA6和CA7、CA8两对引物对鸡贫血病毒荷兰弱毒株进行PCR扩增。将扩增产物 1 .5kb和 0 .8kb的DNA片段分别克隆到pUC1 1 9、pBluescript(SK +)载体质粒中 ,并进行核苷酸序列分析。通过与 2 6P4毒株进行核苷酸序列比较发现二者有 32个核苷酸的差异。荷兰和 2 6P4两毒株间VP1蛋白质同源率为 97% ,没有发生特异性变化 ;VP3蛋白质同源率为 95 % ,在 1～ 30个氨基酸之间发生了特异性变化 ,我们推测这些变化可能是 2 6P4致弱的主要原因。

关键词：鸡贫血病毒荷兰弱毒株基因序列分析

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猪不同直径卵泡中卵母细胞体外培养的成熟潜力

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中国兽医学报 2000年第2期20卷 183-187页

作者：韩毅冰施维民秦鹏春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江省家畜繁育指导站黑龙江哈尔滨150000 东北农业大学生物工程系黑龙江哈尔滨150030

比较研究了猪卵巢表面直径 0 .5～ 1 mm、1～ 2 mm、2～ 6mm、>6mm卵泡中卵母细胞所处的生发泡阶段。结果表明 ,0 .5～ 1 mm卵泡中卵母细胞主要处于 GV- 期和 GV- 期 2个阶段 ,比例分别为 67.2 %和2 0 .6%;而 1～ 2 mm和 2～ 6mm直... 详细信息

比较研究了猪卵巢表面直径 0 .5～ 1 mm、1～ 2 mm、2～ 6mm、>6mm卵泡中卵母细胞所处的生发泡阶段。结果表明 ,0 .5～ 1 mm卵泡中卵母细胞主要处于 GV- 期和 GV- 期 2个阶段 ,比例分别为 67.2 %和2 0 .6%;而 1～ 2 mm和 2～ 6mm直径卵泡中 ,卵母细胞大部分则处于 GV- 期 ,比例分别为 91 .9%和89.6%;>6mm直径卵泡中 ,卵母细胞逐渐发生老化 ,GV- 期比例仅为 53 .2 %,一部分处于 GV- 期和GVBD期。体外培养试验表明 ,1～ 2 mm卵泡中卵母细胞的体外成熟率比较低 ,其中一部分卵母细胞不能发生 GVBD( 2 5.1 %) ,另有一部分卵母细胞 ( 3 9.8%)达到第 1次减数分裂中期后 ,不能继续向前发育。培养 0～ 2 0 h时 ,添加 1 mmol/ L dbc AMP,能够显著抑制 1～ 2 mm和 2～ 6mm直径卵泡中卵母细胞发生 GVBD。培养 2 0 h后 ,去除 dbc AMP,显著增加了培养到 4 4h阶段的 M- 期比率。 dbc AMP主要是降低了培养 4 4h阶段 GV期阻滞的比率 ,而对 M- 期阻滞的比例没有影响。因此 ,dbc

关键词：卵泡卵母细胞减数分裂体外成熟 dbcAMP 猪

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