检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医科技信息 2019年第7期35卷 4-6页

作者：吴甜甜王笑梅祁小乐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

传统的抗病毒策略多以病毒自身为靶点,随着天然免疫研究的不断深入,宿主的一系列抗病毒靶点相继被鉴定。亲环蛋白A(Cyclophilin A, CypA)是亲环蛋白(Cyclophilins, Cyps)家族中含量最丰富、被研究最多的一个成员。CypA不仅具有多种生理... 详细信息

传统的抗病毒策略多以病毒自身为靶点,随着天然免疫研究的不断深入,宿主的一系列抗病毒靶点相继被鉴定。亲环蛋白A(Cyclophilin A, CypA)是亲环蛋白(Cyclophilins, Cyps)家族中含量最丰富、被研究最多的一个成员。CypA不仅具有多种生理功能,也广泛参与到多种病毒的感染过程中,其作为抗病毒制剂的靶点近来也不断被关注。本文综述了CypA对不同动物病毒感染的调控作用及其分子机制,对于新型抗病毒策略的探索具有重要意义。

关键词：亲环蛋白A 动物病毒抗病毒

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感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达microRNA分析

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中国预防兽医学报 2018年第8期40卷 665-669页

作者：韩亚儒杜承王晓钧内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为研究马传染性贫血病毒(EIAV)感染靶细胞-马单核巨噬细胞(eMDM)后细胞内microRNA (miRNA)表达的变化,本研究采用EIAV强毒株EIAVDLV34感染eMDM,并以未感染组作为对照,提取细胞内总RNA,通过高通量测序分析细胞内miRNA表达谱的变化。结果... 详细信息

为研究马传染性贫血病毒(EIAV)感染靶细胞-马单核巨噬细胞(eMDM)后细胞内microRNA (miRNA)表达的变化,本研究采用EIAV强毒株EIAVDLV34感染eMDM,并以未感染组作为对照,提取细胞内总RNA,通过高通量测序分析细胞内miRNA表达谱的变化。结果显示,与对照相比,感染EIAVDLV34后eMDM有16个miRNA发生差异表达,其中8个miRNA上调表达,8个miRNA下调表达,通过荧光定量PCR技术对这16个miRNA的表达进行了验证,结果与高通量测序一致,最后利用生物信息学方法对这16个miRNA的靶基因及其参与的生物学过程进行了分析,显示靶基因主要参与转录调控、信号转导、细胞凋亡等生物学过程。本研究为进一步分析EIAV与其宿主相互作用、致病机制以及慢病毒相关疾病的预防提供了参考依据。

关键词：马传染性贫血病毒 microRNA 差异表达生物信息学

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农用实验动物猪感染模型的研究概况

农用实验动物猪感染模型的研究概况

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第九届北京实验动物科学国际论坛

作者：王玉娥陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平西路678号 150069

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带有EGFP的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒的构建

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黑龙江畜牧兽医 2018年第10期 107-109,245页

作者：刘天昕陶冶李爱东常亚飞王刚汤艳东刘永刚蔡雪辉吉林农业大学动物科学技术学院长春130018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为了构建带有绿色荧光蛋白（EGFP）的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒（HP-PRRSV HuN4 EGFP）,试验采用分子克隆的方法,将转录调控序列TRS6与EGFP基因克隆至HP-PRRSV HuN4株感染性克隆上,用重组质粒pHP-PRRSV HuN4 EGFP转染Marc-14... 详细信息

为了构建带有绿色荧光蛋白（EGFP）的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒（HP-PRRSV HuN4 EGFP）,试验采用分子克隆的方法,将转录调控序列TRS6与EGFP基因克隆至HP-PRRSV HuN4株感染性克隆上,用重组质粒pHP-PRRSV HuN4 EGFP转染Marc-145细胞拯救重组病毒HPPRRSV HuN4 EGFP,将拯救病毒连续传代观察其稳定性。结果表明：HP-PRRSV HuN4 EGFP感染性克隆构建成功;转染后荧光显微镜下可观察到特异性绿色荧光,表明重组病毒拯救成功;将拯救的病毒连续传5代,仍可观察到绿色荧光,表明该重组病毒稳定性良好。说明试验成功构建并拯救出HP-PRRSV HuN4 EGFP。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征增强性绿色荧光蛋白重组病毒拯救稳定性试验分子克隆

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肠道菌群在宿主免疫应答中的作用及机制研究进展

肠道菌群在宿主免疫应答中的作用及机制研究进展

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第九届北京实验动物科学国际论坛

作者：张贺王玉娥陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平西路678号 150069

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体外弓形虫感染小鼠小胶质细胞及对其极化的影响

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中国预防兽医学报 2018年第3期40卷 243-247页

作者：陈立思胡守萍张交儿张卓刘强贾洪林王龙涛何希君吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为探究体外弓形虫(***)感染小鼠小胶质细胞(Microglia)后对其极化的影响,将PLK株弓形虫接种原代小胶质细胞,分别在弓形虫感染细胞后6 h、12 h、24 h、36 h以及48 h收集细胞及培养上清,利用荧光定量PCR、western blot分别检测小胶质细胞M... 详细信息

为探究体外弓形虫(***)感染小鼠小胶质细胞(Microglia)后对其极化的影响,将PLK株弓形虫接种原代小胶质细胞,分别在弓形虫感染细胞后6 h、12 h、24 h、36 h以及48 h收集细胞及培养上清,利用荧光定量PCR、western blot分别检测小胶质细胞M1型以及M2型标记分子的表达水平。采用Griess法和精氨酸酶活性试验分别检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arginase-1)的酶活性。结果显示,弓形虫感染细胞后M1型标记分子iNOS与IL-6的mRNA转录水平与蛋白水平均显著上调(p<0.001),而M2型标记分子Arginase-1与IL-10无明显变化(p>0.05)。此外,酶活性检测结果显示iNOS在弓形虫感染6 h～48 h与对照组相比其表达水平有显著差异(p<0.001),而Arginase-1在该时间段表达差异并不显著。本研究结果表明,弓形虫感染小胶质细胞后能够明显诱导静息状态的小胶质细胞向M1型极化,从而改变小胶质细胞的表型和生物学功能,本研究为进一步阐明弓形虫与机体免疫系统相互作用提供了依据。

关键词：弓形虫小胶质细胞极化

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伪狂犬病病毒变异株EP0基因缺失株的构建及其致病力评价

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中国预防兽医学报 2018年第4期40卷 279-282页

作者：刘继婷汤艳东王同云蔡雪辉吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

EP0(Early Protein 0)基因是伪狂犬病病毒(PRV)早期表达的转录激活因子,可以结合并激活多种病毒基因启动子,调节基因的表达,同时其也是毒力相关基因。为探究EP0基因对PRV变异株毒力的影响,本研究采用CRISPR/Cas9系统敲除PRV变异株HeN1的... 详细信息

EP0(Early Protein 0)基因是伪狂犬病病毒(PRV)早期表达的转录激活因子,可以结合并激活多种病毒基因启动子,调节基因的表达,同时其也是毒力相关基因。为探究EP0基因对PRV变异株毒力的影响,本研究采用CRISPR/Cas9系统敲除PRV变异株HeN1的EP0基因,通过噬斑纯化筛选与基因测序鉴定,成功构建1株EP0基因缺失病毒株PRV-EP0。小鼠毒力试验显示PRV-EP0株虽然体外复制能力降低,但其致病力与野生病毒株HeN1相比并无变化。本研究构建的EP0基因敲除病毒为研究PRV变异株EP0的功能奠定基础。

关键词：伪狂犬病病毒 CRISPR-Cas9 基因编辑 EP0基因

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猪脑心肌炎病毒VP1蛋白与宿主RPS20蛋白相互作用研究

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中国预防兽医学报 2018年第8期40卷 715-719页

作者：张元峰张昆丽薛娟黄丽杨玉莹翁长江长江大学动物科学学院湖北荆州434025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所基础免疫创新团队/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为筛选并鉴定与猪脑心肌炎病毒(EMCV) VP1蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交系统筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库。酵母共转化和免疫共沉淀试验表明VP1和RPS20蛋白之间存在特异性相互作用。激光共聚焦试验显示,过表达的VP1和... 详细信息

为筛选并鉴定与猪脑心肌炎病毒(EMCV) VP1蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交系统筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库。酵母共转化和免疫共沉淀试验表明VP1和RPS20蛋白之间存在特异性相互作用。激光共聚焦试验显示,过表达的VP1和RPS20共定位于细胞质中。本研究初步证实了RPS20与EMCV VP1蛋白之间的相互作用,为进一步研究RPS20蛋白在EMCV感染过程中的生物学功能奠定了基础。

关键词：猪脑心肌炎病毒 VP1蛋白核糖体蛋白S20 病毒-宿主相互作用

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传染性法氏囊病病毒基因组A节段3'-UTR对病毒复制影响的研究

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中国预防兽医学报 2018年第3期40卷 177-180,185页

作者：杨搏陈泽华韩春燕么帅祁小乐高立高玉龙刘长军张艳萍杨玉莹王永强王笑梅长江大学动物科学学院湖北荆州434025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽免疫抑制病研究团队黑龙江哈尔滨150069

为探究传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组A节段3'-UTR是否影响IBDV的复制,本实验应用融合PCR技术将IBDV弱毒Gt株A节段的3'-UTR替换为超强毒Gx株的相应区段,并利用反向遗传操作系统拯救嵌合病毒r Gt-Gx3'UTR,对拯救病毒进行鉴... 详细信息

为探究传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组A节段3'-UTR是否影响IBDV的复制,本实验应用融合PCR技术将IBDV弱毒Gt株A节段的3'-UTR替换为超强毒Gx株的相应区段,并利用反向遗传操作系统拯救嵌合病毒r Gt-Gx3'UTR,对拯救病毒进行鉴定。结果显示嵌合病毒拯救成功,Gt株的RNA依赖的RNA聚合酶既能识别Gt株的3'-UTR,也能识别超强毒Gx株的3'-UTR。通过比较嵌合病毒与亲本病毒的体外复制曲线,表明3'-UTR能够影响IBDV的复制。3'-UTR二级结构的预测结果表明其可能是以特定的二级结构而非一级序列发挥其功能。本研究为认识IBDV复制特点奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒反向遗传 3'-UTR 病毒复制

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猪伪狂犬病病毒HeN1株gB蛋白单克隆抗体的制备及B细胞线性表位鉴定

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中国预防兽医学报 2018年第9期40卷 854-857页

作者：赵微田志军王倩倪宏波彭金美黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)gB蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究将PRV HeN1株全病毒免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接免疫荧光方法筛选,获得了一株稳定分泌抗PRV g B蛋白的杂交瘤细胞株1E7。Western blo... 详细信息

为制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)gB蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究将PRV HeN1株全病毒免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接免疫荧光方法筛选,获得了一株稳定分泌抗PRV g B蛋白的杂交瘤细胞株1E7。Western blot结果显示,MAb 1E7与PRV全病毒和真核表达的g B蛋白均能够反应。阻断ELISA试验显示MAb 1E7与PRV的结合可以被猪阳性血清阻断。抗体亚类鉴定显示MAb 1E7的重链为Ig G2b亚类,轻链为kappa链。利用大肠杆菌原核表达系统,表达一系列截短的g B蛋白,最终确定1E7识别的抗原表位是^(81)SAEESLE^(87)。序列分析和western blot结果表明该表位在各PRV病毒株间相对保守。该MAb的制备为建立具有广泛适用性检测PRV野毒感染和疫苗免疫效果评价的阻断ELISA方法奠定了基础。

关键词：猪伪狂犬病病毒 gB蛋白单克隆抗体表位

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