检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2023年

作者：焦爽李长尧张朝霞翁长江熊涛长江大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/基础免疫创新团队黑龙江省兽医免疫重点实验室

本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病毒(PRV)gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化，并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体(mAb)。小鼠经三次免疫后，利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价，并将抗体效... 详细信息

本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病毒(PRV)gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化，并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体(mAb)。小鼠经三次免疫后，利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价，并将抗体效价达到2×104以上的小鼠进行细胞融合。随后通过iELISA和IFA实验对阳性杂交瘤细胞进行筛选。经3-4次亚克隆筛选后，得到了一株可以稳定分泌gB mAb的杂交瘤细胞株293。同时，对其进行亚类鉴定发现该株细胞分泌的抗体类型为IgM型。本研究为建立新型ELISA检测试剂盒、新型疫苗的开发以及后续中和抗体的研究提供了良好的生物材料。

关键词：伪狂犬病毒 gB基因昆虫杆状病毒单克隆抗体

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国际病毒分类委员会第十次病毒分类报告简介及分析

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中国预防兽医学报 2021年

作者：张莹王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

目前,国际病毒分类委员会公布的第十次病毒分类报告已经在线可用(http://***/report/),这是一个完全开放的,并完全取代了以往纸质印刷版、不断更新的网络版。为了及时了解国际病毒分类研究的新变化,本文对新版病毒分类系统进行了概括和... 详细信息

目前,国际病毒分类委员会公布的第十次病毒分类报告已经在线可用(http://***/report/),这是一个完全开放的,并完全取代了以往纸质印刷版、不断更新的网络版。为了及时了解国际病毒分类研究的新变化,本文对新版病毒分类系统进行了概括和介绍,并重点介绍了与兽医工作关系密切的动物病毒代表种毒株和部分常见毒株,有助于大家及时了解国际病毒分类动态。

关键词：病毒分类分类阶元代表种毒株

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可诱导快速免疫保护兽用疫苗的种类及其诱导机体免疫反应的机制

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中国预防兽医学报 2023年第3期45卷 319-325页

作者：李树稳黄淑坚李永锋仇华吉佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528231 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

疫苗免疫是预防传染病的重要策略。合理使用疫苗可以诱导宿主产生特异性免疫保护^([1]),优良的疫苗应当具有快速产生免疫保护和持久保护的特点。可诱导快速免疫保护的兽用疫苗能够在免疫早期激活畜禽的免疫系统,为畜禽提供快速的免疫保... 详细信息

疫苗免疫是预防传染病的重要策略。合理使用疫苗可以诱导宿主产生特异性免疫保护^([1]),优良的疫苗应当具有快速产生免疫保护和持久保护的特点。可诱导快速免疫保护的兽用疫苗能够在免疫早期激活畜禽的免疫系统,为畜禽提供快速的免疫保护,可用于畜禽的紧急免疫。本文列举了几种可诱导动物机体快速免疫保护的兽用疫苗,并阐述它们诱导快速免疫保护的关键免疫学机制,为研发可诱导快速免疫保护的疫苗提供新的思路和理论指导。

关键词：兽用疫苗免疫保护紧急免疫特异性免疫免疫学机制机体免疫反应快速免疫免疫系统

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非洲猪瘟病毒MGF300-1L蛋白的生物学特性分析

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中国兽医学报 2023年第1期43卷 1-9页

作者：罗瑞王涛钟代浪潘力孙茂文孙元黄淑坚仇华吉佛山科学技术学院、生命科学与工程学院广东佛山528231 中国农业科学院、哈尔滨兽医研究所、兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为了解非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)编码的未知功能蛋白MGF300-1L的基本生物学特性,利用生物信息学手段分析了该蛋白的保守性、理化性质,并对其翻译后修饰、结构与功能进行预测;通过实时荧光定量PCR分析在病毒感染条件... 详细信息

为了解非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)编码的未知功能蛋白MGF300-1L的基本生物学特性,利用生物信息学手段分析了该蛋白的保守性、理化性质,并对其翻译后修饰、结构与功能进行预测;通过实时荧光定量PCR分析在病毒感染条件下MGF300-1L的表达特性;最后,利用MGF300-1L的真核表达质粒,通过激光共聚焦试验分析其亚细胞定位,并采用间接免疫荧光试验(IFA)分析其免疫原性。结果显示,MGF300-1L蛋白在基因Ⅱ型ASFV中高度保守,为碱性疏水膜蛋白,具有糖基化和磷酸化修饰,与G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2(GIT2)结构的同源性为21%;MGF300-1L为ASFV的早期基因,其编码蛋白主要定位于细胞质;IFA未检测到ASFV感染猪的阳性血清中存在针对MGF300-1L蛋白的抗体。本研究发现,MGF300-1L为ASFV高度保守的非必需早期基因,其编码蛋白具有跨膜区及糖基化、磷酸化修饰,并定位于细胞质,免疫原性较差,为进一步探究MGF300-1L蛋白在ASFV复制周期中的功能奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒 MGF300-1L蛋白亚细胞定位免疫原性

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兔多杀性巴氏杆菌和兔出血症病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用

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中国预防兽医学报 2023年第2期45卷 150-155页

作者：王豪杰陈见兴王梦杰林欢夏长友刘家森陈洪岩朱良全张贺王玉娥中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学创新团队黑龙江哈尔滨150069 中国兽医药品监察所北京100081

为建立兔多杀性巴氏杆菌(Pm)和兔出血症病毒(RHDV)的双重PCR检测方法,本研究根据Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,设计2对特异性引物,经PCR分别扩增Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,构建重组质粒pMD-Pm和pMD-RHDV,并经菌液PCR... 详细信息

为建立兔多杀性巴氏杆菌(Pm)和兔出血症病毒(RHDV)的双重PCR检测方法,本研究根据Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,设计2对特异性引物,经PCR分别扩增Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,构建重组质粒pMD-Pm和pMD-RHDV,并经菌液PCR和测序鉴定后作为重组质粒标准品。经各反应条件优化后初步建立了检测Pm和RHDV的双重PCR方法。反应条件优化结果显示,该方法的最适退火温度为59℃,扩增kmt1和VP60基因的最优引物浓度均为0.5μL(10μmol/L)。对Pm和RHDV及其他病原包括兔源支气管败血波氏杆菌、产气荚膜梭菌等20种相关病原的特异性试验结果显示,除Pm和RHDV有特异性扩增条带外,其余相关病原均无扩增条带,特异性较强。将两种重组质粒标准品分别10倍倍比稀释并等体积混合后作为模板,经该双重PCR方法扩增。结果显示,该方法对pMD-Pm的检测限为17.9拷贝/μL,对pMD-RHDV的检测限为1260拷贝/μL,敏感性较高;对两种病原的DNA和cDNA混合物的批内和批间重复性试验结果均一致,重复性较好。对100份临床患病兔肺脏样品的检测结果显示,Pm和RHDV的阳性率分别为13%(13/100)和7%(7/100),二者混合感染率为37%(37/100),与已报道的Pm和RHDV单一PCR方法的检测结果均一致。表明该方法检测的准确性较高,可以用于临床样品的检测。本研究建立的同时快速检测Pm和RHDV的双重PCR方法为临床这两种病的诊断提供了技术支持。

关键词：多杀性巴氏杆菌兔出血症病毒双重PCR

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人工感染禽腺病毒血清1型对SPF鸡天然免疫反应的影响

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东北农业大学学报 2022年第12期53卷 35-45页

作者：马得莹焦亚茹李雪峰李慧昕王芳芳范佳慧谢晶晶东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

试验旨在探究禽腺病毒血清1型(Fowl adenovirus serotype 1,FAdV-1)感染SPF鸡后产生的天然免疫反应及免疫调控机制。结果表明,感染FAdV-1后,观察组、感染组、对照组SPF鸡均无明显发病和死亡,剖检肌胃和腺胃可见轻微病变。感染初期小肠... 详细信息

试验旨在探究禽腺病毒血清1型(Fowl adenovirus serotype 1,FAdV-1)感染SPF鸡后产生的天然免疫反应及免疫调控机制。结果表明,感染FAdV-1后,观察组、感染组、对照组SPF鸡均无明显发病和死亡,剖检肌胃和腺胃可见轻微病变。感染初期小肠组织中Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)、5、7、21;禽β-防御素5(Avian β-defensins 5,AvBD5)、8;白细胞介素8(Inter leukin-8,IL-8)、18;MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)、C-Rel及p65基因表达量显著升高(P<0.05)。TLR2、TLR5、AvBD8、IL-8、MyD88、C-Rel和p65在感染后36 h(hour post-infection,hpi)表达趋势一致。感染后期,部分组织中TLR15、AvBD10、AvBD12、IL-8基因表达量显著上调(P<0.05)。试验说明SPF鸡感染FAdV-1初期的先天免疫应答是小肠中通过TLR2、5-MyD88途径产生并调控AvBDs及细胞因子清除病毒。试验为今后可通过外源条件提高禽类天然免疫机能,预防控制FAdV-1及相似病原提供重要理论依据。

关键词：禽腺病毒血清1型 SPF鸡 Toll样受体禽β防御素天然免疫反应

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猪源和犬源ELF4蛋白的亚细胞定位比较研究

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畜牧与兽医 2024年第3期56卷 45-53页

作者：高翠翠喻娇唐青海侯鑫军刘婷全飞杨刘建行赵婷芳赵铖朱钰英危艳武衡阳师范学院生命科学学院/南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室湖南衡阳421008 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

本研究旨在对比分析猪E74样因子4(sELF4)和犬E74样因子4(cELF4)的亚细胞定位,为深入开展二者功能研究提供依据。利用PCR截短扩增sELF4和cELF4,分别克隆至真核表达载体pEGFP-C1中,构建17个sELF4重组真核表达载体和13个cELF4重组真核表达... 详细信息

本研究旨在对比分析猪E74样因子4(sELF4)和犬E74样因子4(cELF4)的亚细胞定位,为深入开展二者功能研究提供依据。利用PCR截短扩增sELF4和cELF4,分别克隆至真核表达载体pEGFP-C1中,构建17个sELF4重组真核表达载体和13个cELF4重组真核表达质粒,转染HeLa细胞、Hoechst33342染色,荧光倒置显微镜观察亚细胞定位,运用生物信息学软件分析其编码氨基酸序列特征。结果表明,sELF4和cELF4蛋白全长均定位在细胞核中,sELF4 196~291 aa(586~873 bp)之间有可能存在两个细胞质核定位信号肽,cELF4的核定位信号肽分布在203~291 aa(607~873 bp),cELF4 292~663 aa(874~1 992 bp)、sELF4 292~662 aa(874~1 989 bp)在细胞中发生聚集现象。cELF4与sELF4氨基酸序列在第169~303位氨基酸之间均高度保守,其他区段均存在不同程度的差异。综上,sELF4蛋白全长和cELF4蛋白全长均定位在细胞核中,截短表达的羧基端功能区有聚集现象,二者的核定位信号肽分布有一定差异。

关键词：猪ELF4蛋白犬ELF4蛋白真核表达亚细胞定位

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猪丁型冠状病毒S1-CTD相互作用宿主蛋白的筛选和鉴定

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畜牧兽医学报 2022年第7期53卷 2260-2267页

作者：汤荣锋范前进郭龙军张鑫石达时洪艳陈建飞冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪消化道传染病创新团队哈尔滨150069

猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域(S1-CTD)是诱导中和抗体产生的主要区域,为研究与其相互作用的宿主蛋白,采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了S1-CTD,提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白,通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的... 详细信息

猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域(S1-CTD)是诱导中和抗体产生的主要区域,为研究与其相互作用的宿主蛋白,采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了S1-CTD,提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白,通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的蛋白并进行质谱分析,发现32个疑似相互作用的宿主蛋白。构建其中可能与S1-CTD互作的蛋白KIF1 binding protein(KIFBP)的真核表达质粒,通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证上述宿主蛋白与S1-CTD是否存在相互作用,结果表明KIFBP和S1-CTD之间存在相互作用,共同转染时在细胞质共定位。进一步研究表明,过表达KIFBP能够有效降低病毒RNA水平和病毒滴度,其中mRNA水平降低了约70%,病毒滴度降低了10^(1.6)TCID_(50)。综上,本研究筛选并鉴定出一种与PDCoV S1-CTD相互作用的宿主蛋白KIFBP,为了解PDCoV的致病机制提供了理论基础。

关键词：猪丁型冠状病毒 S1-CTD蛋白相互作用 KIFBP

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益生菌的多重抗病毒作用及其机制

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微生物学报 2022年第9期62卷 3345-3357页

作者：黄京山王妍瑾杨桂连仇华吉孙元吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

病毒性疾病对人类和动物健康造成了重大威胁。由于现有的免疫接种和抗病毒疗法的局限性,开发安全、广谱、廉价的新型抗病毒制剂极为迫切。益生菌是摄入后能对机体产生多种有益作用的活性微生物,其抗病毒作用及潜在机制是当前的研究热点... 详细信息

病毒性疾病对人类和动物健康造成了重大威胁。由于现有的免疫接种和抗病毒疗法的局限性,开发安全、广谱、廉价的新型抗病毒制剂极为迫切。益生菌是摄入后能对机体产生多种有益作用的活性微生物,其抗病毒作用及潜在机制是当前的研究热点。本文介绍了益生菌通过促进肠道细胞的紧密连接和产生有利物质来维护机体黏膜屏障;与病毒竞争结合靶点或直接捕获并抑杀病毒;刺激机体免疫系统,调节固有免疫反应和适应性免疫反应;分泌具有抗病毒作用的代谢产物来发挥抗病毒作用及其作用机制,以期为益生菌的抗病毒相关研究提供参考。

关键词：益生菌抗病毒作用抗病毒机制黏膜屏障免疫调节

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假病毒技术在猪病原研究中的应用

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中国兽医科学 2023年第6期53卷 764-771页

作者：刘弘毅陈洪岩夏长友高彩霞中国农业科学院、哈尔滨兽医研究所、兽医生物技术国家重点实验室、实验动物与比较医学创新团队、国家禽类实验动物资源库黑龙江哈尔滨150069

假病毒作为一种安全和便捷的研究工具,在病毒学尤其是在高致病性病毒基础研究和疫病防控研究中发挥着重要作用。本文通过介绍假病毒的定义和特性、分类和构建、常见的包装系统和报告基因,并重点阐述了假病毒在猪病原研究中的应用,旨在... 详细信息

假病毒作为一种安全和便捷的研究工具,在病毒学尤其是在高致病性病毒基础研究和疫病防控研究中发挥着重要作用。本文通过介绍假病毒的定义和特性、分类和构建、常见的包装系统和报告基因,并重点阐述了假病毒在猪病原研究中的应用,旨在为假病毒的发展与猪重要疫病的防控研究提供技术参考。

关键词：假病毒猪病原研究进展应用

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