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526 篇 期刊文献
308 篇 会议

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日期分布

学科分类号

793 篇 农学
- 747 篇 兽医学
- 62 篇 作物学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 林学
67 篇 工学
- 58 篇 生物工程
- 8 篇 化学工程与技术
- 1 篇 林业工程
- 1 篇 风景园林学（可授工...
63 篇 理学
- 63 篇 生物学
17 篇 医学
- 8 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 4 篇 临床医学
- 4 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 法学
- 1 篇 政治学

主题

76 篇 猪圆环病毒2型
66 篇 单克隆抗体
40 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 原核表达
38 篇 猪瘟病毒
34 篇 序列分析
31 篇 抗原表位
30 篇 猪流行性腹泻病毒
27 篇 分离鉴定
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
24 篇 新城疫病毒
21 篇 传染性法氏囊病病...
20 篇 鉴定
19 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 猪圆环病毒
16 篇 免疫原性
15 篇 分离
14 篇 生物学特性

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
159 篇 东北农业大学
115 篇 中国农业科学院哈...
112 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
29 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 黑龙江八一农垦大...
24 篇 中国农业科学院上...
21 篇 新疆农业大学
19 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 东北林业大学
17 篇 中国农业科学院哈...
15 篇 内蒙古农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
9 篇 中国农业科学院哈...
9 篇 吉林农业大学

作者

166 篇 刘长明
141 篇 危艳武
115 篇 王笑梅
112 篇 高玉龙
108 篇 黄立平
98 篇 高宏雷
92 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
79 篇 童光志
77 篇 冯力
73 篇 吴洪丽
71 篇 陈建飞
69 篇 郭龙军
65 篇 时洪艳
61 篇 韩宗玺
59 篇 仇华吉
58 篇 秦立廷
58 篇 王云峰
55 篇 崔尚金
51 篇 石星明

语言

834 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室传染病研究室"

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两株猪细小病毒分离株的分子特征分析

两株猪细小病毒分离株的分子特征分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪细小病毒在临床上出现了一些新的特征,为了解猪细小病毒在我国的遗传变异情况,本文应用PCR方法对两株猪细小病毒现地分离株BQ株和ZJ株进行了基因组测序,并结合已经报道的若干国内猪细小病毒序列和国外代表株序列做了相关分析.测序结... 详细信息

猪细小病毒在临床上出现了一些新的特征,为了解猪细小病毒在我国的遗传变异情况,本文应用PCR方法对两株猪细小病毒现地分离株BQ株和ZJ株进行了基因组测序,并结合已经报道的若干国内猪细小病毒序列和国外代表株序列做了相关分析.测序结果表明猪细小病毒BQ株和ZJ株基因组全长分别为5013m和5031nt,其编码区序列均不存在碱基的插入与缺失,但在VP1/VP2终止密码子处的非编码区存在不同程度的碱基缺失,分别缺少63和45个碱基,推测可能与毒力变化有关。根据VP2蛋白的多序列比对结果以及VP2蛋白215位、378位、383位、436位和565位等关键氨基酸位点的变异情况,发现猪细小病毒感染的临床病理型(生物型)与VP2蛋白这些关键氨基酸位点的改变密切相关。遗传进化分析表明,我国猪细小病毒的演化主要发生基因漂移,其对抗原性的影响需要进一步研究。

关键词：猪细小病毒基因组序列比对遗传变异

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鸡传染性法氏囊病病毒Gt株vp5基因缺失株感染性克隆的构建

鸡传染性法氏囊病病毒Gt株vp5基因缺失株感染性克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：秦立廷祁小乐高玉龙高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

传染性法氏囊病病毒(IBDV)是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Birnaviridae)禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组由A、B两个节段组成,编码4个结果VP1-VP4和非结构蛋白VP5。已有报道,VP5蛋白在病毒复制和体内外致病性中发挥重要作用,其... 详细信息

传染性法氏囊病病毒(IBDV)是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Birnaviridae)禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组由A、B两个节段组成,编码4个结果VP1-VP4和非结构蛋白VP5。已有报道,VP5蛋白在病毒复制和体内外致病性中发挥重要作用,其分子机制至今不清楚。本研究利用体外定点突变法,缺失IBDVGt株VP5基因。在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz)。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGG的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtA△VP5HRT,该感染性克隆与pCAGGmGtBHRT共转染DFⅠ细胞。RT-PCR、间接免疫荧光、均显示拯救出了重组IBDV。IBDV非结构蛋白VP5基因缺失感染性克隆的成功构建为从分子水平上深入研究5基因功能奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP5 核酶结构病毒拯救

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致病性猪伪狂犬病病毒PRV-JF株的分离与鉴定

致病性猪伪狂犬病病毒PRV-JF株的分离与鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张超范刘长明危艳武刘霓虹中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从临床疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织病料中,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染,采用无PCV1污染的猪肾细胞系(PK-15)分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育一株细胞培养适应毒,命名为PRV-JF株。分离株经细胞培养传代,... 详细信息

从临床疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织病料中,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染,采用无PCV1污染的猪肾细胞系(PK-15)分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育一株细胞培养适应毒,命名为PRV-JF株。分离株经细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第24代毒价达108.5TCID50/mL。免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质内。病毒感染细胞可被已知PRV阳性血清中和。电镜负染观察到病毒粒子呈椭圆或圆形外观,无囊膜的病毒粒子直径约110nm～150nm,有囊膜的成熟病毒粒子直径约150nm～180nm。PCR鉴定该毒株含有gE基因,其序列与GenBank登录的7株PRV同源性为97.7～100%。用不同剂量病毒培养物接种家兔于24h～72h内全部死亡。研究表明,PRV-JF分离株对易感动物具有高致病性,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究奠定基础。

关键词：猪伪狂犬病病毒强毒株分离鉴定

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两株猪细小病毒分离株的分子特征分析

两株猪细小病毒分离株的分子特征分析

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪细小病毒在临床上出现了一些新的特征,为了解猪细小病毒在我国的遗传变异情况,本文应用PCR方法对两株猪细小病毒现地分离株BQ株和ZJ株进行了基因组测序,并结合已经报道的若干国内猪细小病毒序列和国外代表株序列做了相关分析。测序结... 详细信息

猪细小病毒在临床上出现了一些新的特征,为了解猪细小病毒在我国的遗传变异情况,本文应用PCR方法对两株猪细小病毒现地分离株BQ株和ZJ株进行了基因组测序,并结合已经报道的若干国内猪细小病毒序列和国外代表株序列做了相关分析。测序结果表明猪细小病毒BQ株和ZJ株基因组全长分别为5013nt和5031nt,其编码区序列均不存在碱基的插入与缺失,但在VP1/VP2终止密码子处的非编码区存在不同程度的碱基缺失,分别缺少63和45个碱基,推测可能与毒力变化有关。根据VP2蛋白的多序列比对结果以及VP2蛋白215位、378位、383位、436位和565位等关键氨基酸位点的变异情况,发现猪细小病毒感染的临床病理型(生物型)与VP2蛋白这些关键氨基酸位点的改变密切相关。遗传进化分析表明,我国猪细小病毒的演化主要发生基因漂移,其对抗原性的影响需要进一步研究。

关键词：猪细小病毒基因组序列比对遗传变异

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猪圆环病毒2型IPMA抗体检测试剂盒的研制及应用

猪圆环病毒2型IPMA抗体检测试剂盒的研制及应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘长明张超范危艳武张朝霞袁婧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),用于猪圆环病毒2型(PCV2)血清抗体检测。对IPMA反应条件进行了优化,并组装成诊断试剂盒。研究结果表明,用IPMA检测PCV2人工感染猪血清,于感染后第3周抗体阳转,第3周～10周抗体阳性检... 详细信息

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),用于猪圆环病毒2型(PCV2)血清抗体检测。对IPMA反应条件进行了优化,并组装成诊断试剂盒。研究结果表明,用IPMA检测PCV2人工感染猪血清,于感染后第3周抗体阳转,第3周～10周抗体阳性检出率为92.8%(52/56),同设对照组猪血清抗体检测均为阴性(33/33)。试剂盒在-20℃稳定保存18个月,对其他几种猪病毒参考血清无交叉反应,与用重组蛋白抗原建立的rcELISA符合率为89.2%。对来自黑龙江、吉林、河北、上海、内蒙、云南、江西等地猪场健康成年猪血清480份和发病猪血清424份进行了检测,抗体检出率分别为91.7%和79.2%,表明我国猪群中PCV2污染相当严重。试剂盒的研制为我国PCV2流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒

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截短的猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的原核表达

截短的猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的原核表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

本文根据GenBank上登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒序列,设计一对引物用于扩增和截短表达M蛋白。经过PCR、酶切及测序鉴定,成功地构建了PRRSV M蛋白原核表达载体。重组菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析可检测到分子量大小约为27.3 ku的目的... 详细信息

本文根据GenBank上登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒序列,设计一对引物用于扩增和截短表达M蛋白。经过PCR、酶切及测序鉴定,成功地构建了PRRSV M蛋白原核表达载体。重组菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析可检测到分子量大小约为27.3 ku的目的蛋白带,通过PRRSV猪阳性血清的Western-blotting检测,出现特异性的反应条带,结果表明表达的蛋白具有良好的特异性,这为该蛋白的应用研究,特别是在临床诊断上的应用奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白原核表达

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猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定

猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

利用PCR技术扩增PPVLXB-PPV-20-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET-32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序。测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中。通过对表达宿主菌的选择,PPV LXB-PPV-20-06... 详细信息

利用PCR技术扩增PPVLXB-PPV-20-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET-32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序。测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中。通过对表达宿主菌的选择,PPV LXB-PPV-20-06株NS1基因在Rosetta(DE)plysS菌中的到良好的表达,并确定了NS1基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.6mmol/L、诱导时间为3.5h、诱导温度为37℃。表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为97ku的重组蛋白,除了包涵体形式表达外,一部分重组蛋白以可溶性形式表达。重组蛋白经Western blot检测,可与PPV阳性血清反应。这为NS1蛋白在临床诊断中的应用打下基础。

关键词：猪细小病毒LXB-PPV-20-06株 NS1基因原核表达鉴定

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猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育与鉴定

猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育与鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘长明张超范危艳武谭斌陆月华谷守林中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从临床表现为断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染,用猪肾细胞系(PK15)分离培养,并连续传代,培育成一株细胞培养适应毒,命名为PCV2/LG株。分离毒株经细胞传25代后毒价显... 详细信息

从临床表现为断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染,用猪肾细胞系(PK15)分离培养,并连续传代,培育成一株细胞培养适应毒,命名为PCV2/LG株。分离毒株经细胞传25代后毒价显著提升,第35代毒价可达105.6TCID50/mL。采用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验(IPMA)、免疫电镜技术、分子克隆及核酸序列分析等鉴定表明:病毒感染细胞后抗原主要分布在细胞核及细胞质中;病毒感染的阳性细胞呈点式分布,阳性细胞数可达50%以上;免疫电镜观察到病毒免疫复合物呈实心小颗粒样粒子团,单粒子直径约为17nm;病毒基因组由1768核苷酸构成,与GenBank登录的8个PCV2基因组序列同源性达96.2%以上。用剂量为2mL的病毒细胞培养物,接种30日龄PCV2抗体阴性仔猪3头,可引起典型的PMWS临床症状。该研究结果为开展PCV2的致病性、疫苗免疫、诊断及分子生物学等研究奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型毒株培育分离鉴定

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猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定

猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

利用PCR技术扩增PPV LXB-PPV020-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET=32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序。测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中。通过对表达宿主菌的选择,PPVLXB-PPV-20-06... 详细信息

利用PCR技术扩增PPV LXB-PPV020-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET=32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序。测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中。通过对表达宿主菌的选择,PPVLXB-PPV-20-06株NS1基因在Rosetta(DE)plysS菌中的到良好的表达,并确定了NS1基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.6mmol/L、诱导时间为3.5h、诱导温度为37℃。表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为97kDa的重组蛋白,除了包涵体形式表达外,一部分重组蛋白以可溶性形式表达。重组蛋白经Western blot检测,可与PPV阳性血清反应。这为NS1蛋白在临床诊断中的应用打下基础。

关键词：猪细小病毒LXB-PPV-20-06株 NS1基因原核表达鉴定

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猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救

猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华张朝霞袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

用PCR法扩增猪圆环病毒1型(PCV1)全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ酶切位点作为分子靶标,拯救出带有分子标记的克隆病毒,命名为recPCV1/G株。通... 详细信息

用PCR法扩增猪圆环病毒1型(PCV1)全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ酶切位点作为分子靶标,拯救出带有分子标记的克隆病毒,命名为recPCV1/G株。通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)在病毒感染细胞中检出病毒抗原,其抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。克隆毒株基因组内插入一个SalⅠ酶切位点,可用PCR结合限制性片断长度多态性分析法(PCR-RFLP)与亲本病毒相鉴别。该毒株经细胞连续传10代,体外培养增殖性能稳定,病毒滴度达104.8TCID50/mL。构建的PCV1感染性克隆,为今后开展该病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒1型感染性克隆病毒拯救

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