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文献类型

526 篇 期刊文献
308 篇 会议

馆藏范围

834 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

793 篇 农学
- 747 篇 兽医学
- 62 篇 作物学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 林学
67 篇 工学
- 58 篇 生物工程
- 8 篇 化学工程与技术
- 1 篇 林业工程
- 1 篇 风景园林学（可授工...
63 篇 理学
- 63 篇 生物学
17 篇 医学
- 8 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 4 篇 临床医学
- 4 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 法学
- 1 篇 政治学

主题

76 篇 猪圆环病毒2型
66 篇 单克隆抗体
40 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 原核表达
38 篇 猪瘟病毒
34 篇 序列分析
31 篇 抗原表位
30 篇 猪流行性腹泻病毒
27 篇 分离鉴定
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
24 篇 新城疫病毒
21 篇 传染性法氏囊病病...
20 篇 鉴定
19 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 猪圆环病毒
16 篇 免疫原性
15 篇 分离
14 篇 生物学特性

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
159 篇 东北农业大学
115 篇 中国农业科学院哈...
112 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
29 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 黑龙江八一农垦大...
24 篇 中国农业科学院上...
21 篇 新疆农业大学
19 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 东北林业大学
17 篇 中国农业科学院哈...
15 篇 内蒙古农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
9 篇 中国农业科学院哈...
9 篇 吉林农业大学

作者

166 篇 刘长明
141 篇 危艳武
115 篇 王笑梅
112 篇 高玉龙
108 篇 黄立平
98 篇 高宏雷
92 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
79 篇 童光志
77 篇 冯力
73 篇 吴洪丽
71 篇 陈建飞
69 篇 郭龙军
65 篇 时洪艳
61 篇 韩宗玺
59 篇 仇华吉
58 篇 秦立廷
58 篇 王云峰
55 篇 崔尚金
51 篇 石星明

语言

834 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室传染病研究室"

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共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答

共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的“自杀...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：孙建富赵和平李娜孙元夏照和周艳君王煜祁巧芬鲁承仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室延边大学农学院动物医学系

为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载... 详细信息

为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS-E2中。为了增强免疫效果,在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位(PADRE),在CSFV E2基因后融合伪狂犬病病毒(PrV)UL49基因,获得了6种重组质粒。间接免疫荧光试验显示,PRRSV GP5和CSFV E2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达。将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测血清抗体水平,通过基于CSFE/WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫。结果显示,除pSFV1CS组外,从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体;各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖;部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组。这表明,这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫,PrV UL49可以增强其细胞免疫应答。

关键词： "自杀性"DNA疫苗猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒泛DR表位 VP22转导蛋白共表达

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同时检测猪瘟病毒和北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的复合荧光定量RT-PCR方法的建立

同时检测猪瘟病毒和北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的复合荧光定...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：成丹赵建军李娜孙元周艳君朱妍田志军涂长春童光志仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室新疆农业大学动物医学院军事医学科学院军事兽医研究所

本研究应用猪瘟病毒(CSFV)及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)特异性引物和TaqMan水解探针,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT-PCR方法。该方法可检测到3.2TCID50的猪瘟病毒和1.8TCID50的北... 详细信息

本研究应用猪瘟病毒(CSFV)及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)特异性引物和TaqMan水解探针,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT-PCR方法。该方法可检测到3.2TCID50的猪瘟病毒和1.8TCID50的北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒,比常规PCR方法敏感性高50倍以上。用复合荧光定量RT-PCR方法对155份现地样品进行检测,73份为CSFV阳性,16份为PRRSV阳性,与常规RT-PCR的符合率高达99.4%。该复合荧光定量RT-PCR方法敏感、特异、重复性好。

关键词：猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒复合荧光定量RT-PCR

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几种中国鸡传染性支气管炎致弱毒株对流行毒株CK/CH/LDL/97I的保护作用评价

几种中国鸡传染性支气管炎致弱毒株对流行毒株CK/CH/LDL/97I的保...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张晓楠李成仁王钰刘乔然韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北农业大学黑龙江八一农垦大学

本研究选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110和tl/CH/LDT3/03F120和1株同种毒株CK/CH/LDL/97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL/97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,... 详细信息

本研究选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110和tl/CH/LDT3/03F120和1株同种毒株CK/CH/LDL/97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL/97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,研究了CK/CH/LDL/97Ⅰ与其他病毒的基因型关系。证明CK/CH/LDL/97Ⅰ属于有别于其它IBV毒株的一个独立的基因群。在此基础上,通过血清抗体检测、攻毒后发病率、死亡率、临床症状、病理变化观察以及气管和肾脏中病毒分离等方面研究了同种致弱毒株和异种致弱毒株对CK/CH/LDL/97Ⅰ的免疫效力。结果显示,同种致弱毒株对CK/CH/LDL/97Ⅰ强毒的攻击可提供100%的免疫保护,临床和病毒分离均为阴性。异种毒株tl/CH/LDT3/03F120可提供100%的临床保护,但呼吸道病毒检出率达50%,表明对呼吸系统的保护效果不好。异种毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110免疫组临床发病率为50%,气管样品病毒检出率为100%。免疫保护。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因交叉保护同种异种

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以BAC为基础的疱疹病毒反向遗传技术研究进展

以BAC为基础的疱疹病毒反向遗传技术研究进展

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：崔红玉王云峰石星明童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室河北北方学院动物科技学院动物医学系

近年来,BAC分子克隆化病毒在现代疫苗的研究和应用仍处于活跃的探索阶段,其表现出来的优势令人鼓舞。BAC系统以其容量大(可至数Mb),能够稳定遗传且易于操作的载体系统巨大优势,成为众多分子生物学工作者实现对大基因组病毒进行

关键词：反向遗传技术疱疹病毒 BAC

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2005年～2006年黑龙江省部分地区健康野鸟NDVF基因分子特征

2005年～2006年黑龙江省部分地区健康野鸟NDVF基因分子特征

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘怀然李东伟刘培欣刘胜旺华育平孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北林业大学野生动物资源学院

将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV),通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后,每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序列测定,并进行进化分析。根... 详细信息

将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV),通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后,每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序列测定,并进行进化分析。根据F基因47～420nt片段构建的分子进化树分析表明,可将其中13/14株野鸟NDV归于基因Ⅶd亚型,具有该型毒株典型的F蛋白裂解位点,属于我国目前流行的优势基因型毒株,与上世纪90年代分离自我国的鸡、水禽、珍禽基因Ⅶd亚型NDV核苷酸序列同源性在93%～97.3%之间。1/14株野鸟NDV属于基因Ⅲ型,与代表毒株Mutkeswar间核苷酸和氨基酸同源性均为100%。健康野鸟携带的Ⅶ亚型和基因Ⅲ型NDV,与目前优势NDV流行毒株和中等毒力疫苗毒株亲源关系相近,表明野鸟与家禽、水禽携带的NDV可以相互传染,对家禽构成巨大潜在威胁,提示加强野鸟NDV的监控及流行病学研究的紧迫性和重要性。

关键词：新城疫病毒黑龙江省健康野鸟基因型

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EIAV驴白细胞弱毒疫苗株减毒过程第61代毒前病毒全基因组DNA的克隆与分析

EIAV驴白细胞弱毒疫苗株减毒过程第61代毒前病毒全基因组DNA的克...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：赵薇薇王雪峰马建吕晓玲赵玉军周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/ 大动物传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001 沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳 110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/ 大动物传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001 沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳 110161

马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒株EIAVDLV是EIAV驴强毒株EIAVDV在驴白细胞传120余代减毒而成。为阐明EIAV疫苗的致弱机理，本研究选取减毒过程中兼有强毒株和弱毒株生物学特性的中间代次毒株EIAVDLV61(体外61代毒株)，采用LA-PCR(Long accu... 详细信息

马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒株EIAVDLV是EIAV驴强毒株EIAVDV在驴白细胞传120余代减毒而成。为阐明EIAV疫苗的致弱机理，本研究选取减毒过程中兼有强毒株和弱毒株生物学特性的中间代次毒株EIAVDLV61(体外61代毒株)，采用LA-PCR(Long accurate PCR)技术扩增几乎全长的前病毒基因组，获得了7941bp的片段。经T-A克隆和核苷酸序列测定，共得到16个EIAVDLV61的几乎全长的基因组克隆。测序结果显示，EIAVDLV61序列平均长为8234bp，16个克隆的核苷酸同源率为98.1±0.4％，与已发表的我国EIAV强毒辽宁株DIAVLV和疫苗株EIAVDLV的核苷酸同源率分别为98.0％和97.9％。本研究比较和分析了EIAVDLV61与EIAV强毒株和疫苗株基因组差异，为进一步探讨马传贫疫苗的致弱机理及免疫保护机制提供了有益的参考数据。

关键词：序列分析马贫血病毒减毒过程驴白细胞致弱机理生物学特性 EIAV疫苗

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果子狸源呼肠孤病毒的分离鉴定

果子狸源呼肠孤病毒的分离鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：邵昱昊韩宗玺陈露菲孔宪刚刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江省疾病预防控制中心

在广东省采集的果子狸样品共192份,处理后接种Vero-E6细胞,从中分离到1株病毒。该病毒在Vero-E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变,表现为细胞内颗粒增多,细胞收缩、变圆,最后细胞从瓶壁脱落。经电镜观察发现,病毒粒子无囊膜,有双层衣... 详细信息

在广东省采集的果子狸样品共192份,处理后接种Vero-E6细胞,从中分离到1株病毒。该病毒在Vero-E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变,表现为细胞内颗粒增多,细胞收缩、变圆,最后细胞从瓶壁脱落。经电镜观察发现,病毒粒子无囊膜,有双层衣壳,呈正二十面体对称,具有呼肠孤病毒的形态特征,将病毒命名为Masked Palm Civet/China/2004(MPC/04)。红细胞凝集试验表明该病毒能凝集健康人O型血红细胞,不能凝集SPF鸡、实验用普通级牛、大鼠和豚鼠的红细胞,这与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型的红细胞凝集谱相符。理化特性试验表明该病毒对氯仿有抵抗力;能耐受pH3.0的酸性环境;50℃水浴1h病毒未丧失感染能力;1mol/LMgCl2能提高病毒对热的抵抗力。为了进一步从分子水平上证实该病毒是呼肠孤病毒,用哺乳动物呼肠孤病毒特异性引物进行反转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR),扩增得到了预期大小的片段。测序结果经NCBI BLAST比较,选取同源性较高者进行序列同源性分析,发现该片段与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型参考毒株核苷酸同源性最高。以上结果证明该病毒为呼肠孤病毒科的成员。

关键词：果子狸呼肠孤病毒分离鉴定

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猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：华秋东吴志军姜成刚沈楠陈维多相文华周建华东北农业大学哈药集团中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室/慢病毒及马病课题组

利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增猴免疫缺陷病毒(SIV)衣壳蛋白p27基因,并将其插入表达载体pET32a构成重组质粒pET32a-p27。重组子经测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,对其产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,并将纯化定量... 详细信息

利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增猴免疫缺陷病毒(SIV)衣壳蛋白p27基因,并将其插入表达载体pET32a构成重组质粒pET32a-p27。重组子经测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,对其产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,并将纯化定量后的表达产物免疫小鼠,制备单克隆抗体。结果显示,gag基因的p27相应片段为763bp,其表达产物相对分子量为46ku。经镍柱纯化,获得目的蛋白p27纯度可达90%以上。利用淋巴细胞杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗p27的单克隆抗体细胞株,分别命名为1A5、1C7、3C2、2D12、3D12。5株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价分别为1:12800、1:25600、1:819200、1:51200和1:409600。免疫球蛋白类型均为IgG1型,轻链均为λ链。Western blot和IFA试验结果表明所获得的单克隆抗体均对病原检测具有很高的特异性。该研究为进一步开发SIV早期诊断试剂盒奠定了基础。

关键词：猴免疫缺陷病毒 p27蛋白单克隆抗体

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新疆地区一株马流感病毒的分离及鉴定

新疆地区一株马流感病毒的分离及鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：郭巍闫妍王英原刘霓虹戴伶俐李雪峰赵立平张春生贺磊周建华相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室慢病毒及马病课题组新疆动物卫生监督所

2007年10月,我国新疆维吾尔自治区阿勒泰地区富蕴县发现马匹出现呼吸道疾病,发病马表现出典型的流行性感冒症状。经过临床诊断、病原分离、电镜观察以及病毒基因序列分析,确定病原为马流行性感冒病毒,属于H3N8亚型,该株病毒与近年来马... 详细信息

2007年10月,我国新疆维吾尔自治区阿勒泰地区富蕴县发现马匹出现呼吸道疾病,发病马表现出典型的流行性感冒症状。经过临床诊断、病原分离、电镜观察以及病毒基因序列分析,确定病原为马流行性感冒病毒,属于H3N8亚型,该株病毒与近年来马流行性感冒病毒北美洲流行株的同源性较高,命名为:A/equine/XinjiangFuyun/3/2007(H3N8)。

关键词：马流行性感冒流感病毒 H3N8

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鸡马立克氏病病毒在鸡淋巴细胞和羽髓中的复制动力学分析

鸡马立克氏病病毒在鸡淋巴细胞和羽髓中的复制动力学分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：李晶梅刘长军张艳萍施维松曲鹏刘爱玲闫福海中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北农业大学生命科学学院东北农业大学动物医学院

马立克氏病(MD)是由鸡马立克氏病病毒血清1型(MDV1)引起的鸡高度接触性淋巴细胞增生性疾病。MDV1在体内的复制状况与其致病性强弱及传播能力直接相关。本实验选择近年从国内不同地区MD暴发鸡场分离的6株MDV1强毒株、弱毒疫苗"814&q... 详细信息

马立克氏病(MD)是由鸡马立克氏病病毒血清1型(MDV1)引起的鸡高度接触性淋巴细胞增生性疾病。MDV1在体内的复制状况与其致病性强弱及传播能力直接相关。本实验选择近年从国内不同地区MD暴发鸡场分离的6株MDV1强毒株、弱毒疫苗"814"株和国内标准MDV1强毒J-1株,分别人工感染SPF鸡。采用双重实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,检测感染后1d～28d病毒在淋巴细胞和羽髓中的复制状况。结果显示,接种1d后即可在淋巴细胞中检测到MDV1(102.6～105.2copies/106cells);在检测期间,淋巴细胞中病毒载量略有上升的趋势,总体呈现不规律变化,且变化并不明显。接种7d后羽髓中病毒载量开始显著增加,14d～21d达到峰值,超强毒株峰值处病毒载量可达到107copies/106cells,峰值期病毒载量是感染前期(1d～7d)的100～10000倍。强毒株在体内的病毒载量高于弱毒株,即复制能力高于弱毒株。研究表明,MDV1国内流行的毒株有增殖速度快,病毒载量高的新特点;MDV1致病性的高低与在其在体内的复制能力的高低正相关。

关键词：复制动力学马立克氏病病毒血清1型双重荧光定量PCR 分离株病毒载量

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