检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2007年第4期15卷 557-561页

作者：王晓艳高宏雷高玉龙程宇王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病实验室新疆农业大学

以纯化的重组鸡贫血病毒结构蛋白为抗原,免疫6～8周龄的雌性Balb/c鼠,经过3次免疫后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,共获得6株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株。间接免疫荧光实验证实,6株单抗与鸡贫血病毒(Chicken anemia viru... 详细信息

以纯化的重组鸡贫血病毒结构蛋白为抗原,免疫6～8周龄的雌性Balb/c鼠,经过3次免疫后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,共获得6株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株。间接免疫荧光实验证实,6株单抗与鸡贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)感染的MDCC-MSB1细胞发生特异性反应。Western blot结果表明,单抗与杆状病毒表达的VP1重组蛋白发生特异性反应。单克隆抗体亚型鉴定结果表明,6株单抗均为IgG1亚型,轻链均为κ链。用单克隆抗体对分段表达的VP1蛋白进行免疫印迹分析,鉴定出3个抗原表位区,分别位于VP1的218～274氨基酸(aa)以及275～301aa和324～369aa之间。

关键词：鸡贫血病毒(CAV) 结构蛋白(VP1) 单克隆抗体抗原表位

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抗菌肽及其功能研究

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中国生物工程杂志 2007年第1期27卷 115-118页

作者：徐灵龙王云峰石星明童光志东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001

抗菌肽是近年来发现的广泛存在于自然界的一类阳离子抗菌活性肽,越来越多的证据表明它们在宿主先天性免疫和适应性免疫中有着重要的作用。对抗菌肽的研究正不断深入。先从抗菌肽研究的历史背景出发,简要介绍了抗菌肽的特性;然后从抗菌... 详细信息

抗菌肽是近年来发现的广泛存在于自然界的一类阳离子抗菌活性肽,越来越多的证据表明它们在宿主先天性免疫和适应性免疫中有着重要的作用。对抗菌肽的研究正不断深入。先从抗菌肽研究的历史背景出发,简要介绍了抗菌肽的特性;然后从抗菌肽的直接抗菌活性和免疫调节功能这两个方面重点阐述其在宿主防御过程中的作用,最后对抗菌肽的临床应用及前景作了概述。

关键词：抗菌太抗菌活性免疫调节

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鸡传染性法氏囊病病毒vp2基因在杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性研究

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中国预防兽医学报 2007年第6期29卷 427-431页

作者：高玉龙高宏雷王晓艳李俊山邓小芸刘伟王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得... 详细信息

将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacVP2。用Western blot和间接免疫荧光试验分析表明IBDV VP2蛋白在Sf9昆虫细胞获得正确表达,所表达的重组VP2蛋白分子量约50 Ku。以rBacVP2感染Sf9细胞裂解物免疫3周龄SPF鸡,在免疫后7 d可检测到ELISA抗体;免疫后14 d可检测到琼脂免疫扩散抗体。攻毒试验表明,初次免疫后14 d对IBDV超强毒株的攻击保护率为75%,2次免疫后14 d对其的攻击保护率为100%。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒 vp2基因杆状病毒免疫原性

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新城疫病毒D90株对肺癌A549细胞的抑制作用

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中国预防兽医学报 2007年第2期29卷 155-158页

作者：符芳李继昌宋纯李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030 哈尔滨医科大学黑龙江哈尔滨150086

本试验将不同浓度的新城疫D90病毒株感染肺癌A549细胞,光学显微镜下,分别在24h、48h、72h观察细胞形态,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法在不同感染时间,对不同浓度D90作用下的肺癌细胞A549进行细胞生长状况的检测。结果表明,在24h的时间内... 详细信息

本试验将不同浓度的新城疫D90病毒株感染肺癌A549细胞,光学显微镜下,分别在24h、48h、72h观察细胞形态,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法在不同感染时间,对不同浓度D90作用下的肺癌细胞A549进行细胞生长状况的检测。结果表明,在24h的时间内,不同浓度(1×10-1～1×10-4)的D90毒株作用下的细胞形态学变化具有一个共同的特征:小的气泡出现,且细胞发生圆缩,这是典型的凋亡形态学变化。在48h～72h时间段内,细胞迅速且大量崩解、坏死。在MTT试验中,新城疫病毒D90株对A549肺癌细胞产生了明显的抑制作用,不同浓度的D90毒株对A549肺癌细胞的作用差异较为明显,抑制率随着病毒浓度的增加而增大,即抑制率与病毒的浓度呈正相关。

关键词：凋亡新城疫病毒肿瘤

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A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

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黑龙江畜牧兽医 2007年第7期 27-29页

作者：高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力东北农业大学生命科学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

参考GenBank中发表PRVOSU毒株VP6序列ORF两端保守区，设计1对特异引物，以PRVJS株反转录cDNA为模板，通过PCR方法获得约1．3kb的基因片段，并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明：获得了VP6的1320bp全基因序列；将其ORF与... 详细信息

参考GenBank中发表PRVOSU毒株VP6序列ORF两端保守区，设计1对特异引物，以PRVJS株反转录cDNA为模板，通过PCR方法获得约1．3kb的基因片段，并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明：获得了VP6的1320bp全基因序列；将其ORF与国内外9株PRVVP6基因的ORF进行核苷酸和氨基酸同源性比较，核苷酸同源性在77．1％～91．1％之间，氨基酸的同源性在89．7％～99．5％之间；在氨基酸系统发育进化树中，JS毒株与A131、OSU、CN86毒株亲缘关系较近．为一个进化群。

关键词： PRV VP6基因序列分析

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应用SYBR GreenI实时荧光定量PCR检测Ⅱ型猪圆环病毒

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中国兽医杂志 2007年第12期43卷 13-14页

作者：许洪喜符芳鲁晶红李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319

Ⅱ型猪圆环病毒(porcine circovirus type2,PCV-2)为近年来引起多种综合征的重要病原,且经常与猪呼吸与繁殖障碍综合症、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流感病毒发生混合感染。建立对于该病毒的快速检测及准确定量的方法,无疑对于病原... 详细信息

Ⅱ型猪圆环病毒(porcine circovirus type2,PCV-2)为近年来引起多种综合征的重要病原,且经常与猪呼吸与繁殖障碍综合症、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流感病毒发生混合感染。建立对于该病毒的快速检测及准确定量的方法,无疑对于病原诊断及病因学研究具有重要的意义。实时荧光定量PCR具有敏感性高、重复性好、速度快、操作简便和污染少等优点。[第一段]

关键词：实时荧光定量PCR Ⅱ型猪圆环病毒荧光定量PCR检测繁殖障碍综合症猪伪狂犬病病毒应用病原诊断猪细小病毒

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消毒的种类及其应用

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猪业科学 2007年第6期24卷 21-25页

作者：崔尚金岳丰雄中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

消毒,是指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。消毒是贯彻“预防为主”方针的一项重要措施。消毒的目的就是消灭传染源,切断病原体的传播途径,达到预... 详细信息

消毒,是指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。消毒是贯彻“预防为主”方针的一项重要措施。消毒的目的就是消灭传染源,切断病原体的传播途径,达到预防疾病的继续蔓延。

关键词：洗必泰水溶液广谱结核杆菌细菌繁殖体杀菌作用结核分枝杆菌分枝杆菌属环氧乙烷灭菌器消毒剂碱性戊二醛

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规模化养猪场的消毒措施

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猪业科学 2007年第6期24卷 20-25页

作者：杨汉春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

随着养猪业的迅速发展，疾病的流行也越来越复杂，这些疾病主要是由于外界病原微生物的侵入及扩散或场内猪群本身存在的条件病原微生物扩散造成的，消毒是控制疾病发生的一个非常重要的措施，通过消毒工作可以达到杀灭和抑制病原微生物... 详细信息

随着养猪业的迅速发展，疾病的流行也越来越复杂，这些疾病主要是由于外界病原微生物的侵入及扩散或场内猪群本身存在的条件病原微生物扩散造成的，消毒是控制疾病发生的一个非常重要的措施，通过消毒工作可以达到杀灭和抑制病原微生物扩散或传播的效果。但是，如果在消毒过程中药物选择或方法不当，常导致消毒失败。本期将详细介绍一下猪场的消毒措施。

关键词：规模化养猪场消毒措施病原微生物应用种类疾病发生消毒工作药物选择

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规模化养猪场的消毒措施——消毒的种类及其应用

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猪业科学 2007年第6期24卷 20-25页

作者：崔尚金岳丰雄中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室　　哈尔滨　　（150001）

关键词：规模化养猪场消毒措施病原微生物应用种类疾病发生消毒工作药物选择

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基因修饰的鸡新城疫病毒F48E9株HN基因DNA疫苗的构建及其免疫效力评价

基因修饰的鸡新城疫病毒F48E9株HN基因DNA疫苗的构建及其免疫效力...

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第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会

作者：贺笋王云峰木古丽石星明王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

DNA 疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量和免疫原性有直接关系,为了提高目的基因的表达量,增强其免疫效果,本研究对 NDV FE株的 HN 基因进行了修饰,将 NDV FE株的 HN 基因的密码子全部替换为鸡体内偏嗜性密码子,同时在 HN 基因的5′端加... 详细信息

DNA 疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量和免疫原性有直接关系,为了提高目的基因的表达量,增强其免疫效果,本研究对 NDV FE株的 HN 基因进行了修饰,将 NDV FE株的 HN 基因的密码子全部替换为鸡体内偏嗜性密码子,同时在 HN 基因的5′端加上同样已替换密码子的禽流感病毒 HA 蛋白信号肽序列。修饰后 HN 基因命名为 SoptiHN,剔除信号肽的 HN 基因命名为 optiHN。将 SoptiHN、optiHN 和 F（48）E株的 HN 基因分别克隆到真核表达载体 pVAX1和含有多个鸡体内最适免疫刺激序列 CpG-ODN 的载体 pVAX1-CpG 中,将他们分别命名为 pV-SoptiHN、pVC-SoptiHN、pV-optiHN、 DVC-optiHN 和 pV-HN、pVC-HN,用这些质粒转染293T 细胞,48h 后间接免疫荧光和 West-blotting 检测细胞中瞬时表达的 HN 蛋白。结果显示,与未经修饰的 HN 基因相比,修饰后的 HN 基因体外瞬时表达水平明显提高,并且密码子优化与添加信号肽序列这两种途径都可以提高 HN 基因的体外表达量。将质粒 pVAX1、pVAX1-CpG、pV-HN、pVC-HN、pV-Sop- tiHN 和 pVC-SoptiHN 采用四头肌多点注射三周龄 SPF 鸡,每只鸡200μg,PBS 设为空对照组;一免后三周以相同的剂量加强免疫,二免后以10～3 EID NDV 的 FE强毒株进行攻毒,计算发病率、死亡率、以及排毒情况。免疫前后,及攻毒前后每周采集血清和外周血淋巴计算 HI 抗体和细胞因子 IFN-γ和 IL-18动态变化情况。分析结果表明,相比 NDV FE株的 HN 基因而言,修饰后的 HN 基因可以诱导更加强烈的免疫反应,产生更好的保护效率。

关键词： NDV DNA 疫苗密码子优化信号肽免疫印迹

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