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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会

作者：余丹丹张书霞陈化兰南京农业大学动物医学院南京农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点实验室/兽医生物技术国家重点实验室

目的:研究A/Duck/Guangdong/40/2000(H5N1)(简称DKGD/40/00)和A/Duck/Guangxi/35/2001(简称DKGX/35/01)两株H5N1亚型禽流感病毒的NS1基因对Hela细胞凋亡的影响,为该两株病毒的致病机理提供依据。材料与方法:病毒株A/Duck/Guangdong/40/2000(H5N1)(简称DKGD/40/00)和A/Duck/Guangxi/35/2001(H5N1)(简称DKGX/35/01)由哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室保存;10日龄的SPF鸡胚由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供;引物参照NS1基因序列保守区设计。并引入EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ两个酶切位点,由上海博亚生物技术有限公司合成;病毒NS1基因的克隆与表达

关键词：禽流感病毒 NS1 细胞凋亡

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两株H5N1亚型禽流感病毒诱导鸡胚成纤维细胞凋亡的初步研究

两株H5N1亚型禽流感病毒诱导鸡胚成纤维细胞凋亡的初步研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会

目的:为了弄清禽流感病毒的毒力强弱与细胞凋亡的关系,我们进行了生物学特性差异明显的A/Duck/Guangdong/40/2000(H5N1)和A/Duck/Guangxi/35/2001(H5N1)两株H5N1亚型禽流感病毒对鸡胚成纤维细胞的感染实验,并检测了细胞凋亡指标,以期为... 详细信息

目的:为了弄清禽流感病毒的毒力强弱与细胞凋亡的关系,我们进行了生物学特性差异明显的A/Duck/Guangdong/40/2000(H5N1)和A/Duck/Guangxi/35/2001(H5N1)两株H5N1亚型禽流感病毒对鸡胚成纤维细胞的感染实验,并检测了细胞凋亡指标,以期为该两株病毒的致病机理及相关比较研究提供参考依据。方法:用灭菌PBS将含有两株病毒的尿囊液分别以十倍比稀释到10-4,置于冰上。接种100μl禽流感病毒稀释液于鸡胚成纤维细胞上,37℃吸附30min,PBS洗涤3次,加入5ml 2%DMEM维持液。置37℃5%CO2培养箱培养,逐日观察,出现细胞病变时收集细胞供DNA抽提及流式细胞仪测试。

关键词：鸡胚成纤维细胞禽流感病毒初步研究

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高致病禽流感时空分布规律研究(三)禽流感免疫与流行的生物数学模型初析

高致病禽流感时空分布规律研究(三)禽流感免疫与流行的生物数学模...

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中国畜牧兽医学会信息技术分会成立大会暨首届学术研讨会

作者：崔尚金李曦符芳王靖飞吴春燕童光志孔宪刚于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物疫病诊断于流行病学中心哈尔滨150001

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类的感染或疾病综合症.慢性或亚临床感染可使家禽的生产力严重下降,如增重减缓或不长,产蛋量下降等;高致病力禽流感(HPAI)可造成100﹪死亡,导致全军覆没.1983年美国禽流感和1995年墨西哥禽流感分... 详细信息

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类的感染或疾病综合症.慢性或亚临床感染可使家禽的生产力严重下降,如增重减缓或不长,产蛋量下降等;高致病力禽流感(HPAI)可造成100﹪死亡,导致全军覆没.1983年美国禽流感和1995年墨西哥禽流感分别造成了相当于10亿多美元的直接经济损失.1993年我国证实鸡群中有禽流感流行,1996年又从水禽中分离出对鸡高致病力的H5和H7亚型禽流感毒株.因此,我们必须对此提高警惕,采取积极措施以防禽流感在我国的扩散与流行.本文的目的旨在探讨禽流感发生与流行的有关因素,从而为禽流感的防制找到确实可行的措施,之后对症下药,确保我国养禽业的健康发展.

关键词：禽流感时空分布免疫生物数学模型

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禽流感发生的流行病学分析

禽流感发生的流行病学分析

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中国畜牧兽医学会信息技术分会成立大会暨首届学术研讨会

作者：崔尚金李曦符芳王靖飞吴春燕童光志孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物疫病诊断于流行病学中心哈尔滨150001

2004年以来在亚洲蔓延的高致病性禽流感引起人们的强烈关注.禽流感虽然没有像2003年的SARS疫情那样明显地影响和改变我们的生活,但接连由动物引发的威胁到人类健康甚至生存的瘟疫,还是让人产生很多的联想和思索.微生物远在人类出现之前... 详细信息

2004年以来在亚洲蔓延的高致病性禽流感引起人们的强烈关注.禽流感虽然没有像2003年的SARS疫情那样明显地影响和改变我们的生活,但接连由动物引发的威胁到人类健康甚至生存的瘟疫,还是让人产生很多的联想和思索.微生物远在人类出现之前就存在于这个星球上了,也将伴随着人类生命的进化而进化,或许它在人类生命消失之后还会存在于这个星球.从一定程度上说,在地球上,面对微生物,人类更像是客人.而由于微生物对环境的适应力极强,它不会像动物或者植物那样出现某个种类的灭绝,科学的发展,也只能是尽力控制病毒.流感病毒也是如此.今次导致禽流感流行传染的原因除了周边国家发生禽流感以外,主要有如下:对禽类检疫力不够或缺少主动监测;候鸟迁徙导致疫情漫延;对已发禽流感缺乏检测和扑灭措施;人畜禽间保持密切接触.禽流感的发生和流行有其必然的因素.

关键词：禽流感流行病学畜牧兽医学禽类检疫力

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高致病禽流感时空分布规律研究(一)传播的风险评估框架的初步建立

高致病禽流感时空分布规律研究(一)传播的风险评估框架的初步建立

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中国畜牧兽医学会信息技术分会成立大会暨首届学术研讨会

作者：崔尚金王靖飞吴春燕李曦符芳童光志孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物疫病诊断于流行病学中心哈尔滨150001

为实现对高致病性禽流感传播的风险评估,以在该病的控制中制定科学有效的控制策略,本研究在分析高致病性禽流感传播风险因素的基础上,汲取各类风险分析的原则,确定了高致病性禽流感传播风险评估指标,并采用层次分析法(AHP)确定各风险因... 详细信息

为实现对高致病性禽流感传播的风险评估,以在该病的控制中制定科学有效的控制策略,本研究在分析高致病性禽流感传播风险因素的基础上,汲取各类风险分析的原则,确定了高致病性禽流感传播风险评估指标,并采用层次分析法(AHP)确定各风险因素的权重,结合多指标综合评价函数,建立了包括评估指标体系、指标评价标准、指标权重、综合评分和数据采集五个方面的高致病性禽流感传播风险评估框架.

关键词：高致病性禽流感风险因素风险评估框架层次分析法权重多指标综合评价法

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高致病禽流感时空分布规律研究(二)温度对我国禽流感传播影响的时空模式分析

高致病禽流感时空分布规律研究(二)温度对我国禽流感传播影响的时...

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中国畜牧兽医学会信息技术分会成立大会暨首届学术研讨会

为研究温度对禽流感传播的影响,本文根据禽流感传播最适温度6-16℃确立了风险分析标准,以中国各个气象站的各月平均气温为基础数据,运用本实验室二次开发的地理信息系统软件绘制了风险图.研究结果显示风险区域随时间变化而转移,其时空... 详细信息

为研究温度对禽流感传播的影响,本文根据禽流感传播最适温度6-16℃确立了风险分析标准,以中国各个气象站的各月平均气温为基础数据,运用本实验室二次开发的地理信息系统软件绘制了风险图.研究结果显示风险区域随时间变化而转移,其时空模式为:1-5月,风险区域从南向北迁移;6-8月,除青藏高原外,全国基本处于低风险;9-12月,从北向南迁移.其时空转移规律与2004年第一季度的禽流感疫情扩散趋势基本吻合.

关键词：禽流感风险评估 GIS 时空模式

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镉致鸡脾淋巴细胞凋亡及对p53mRNA表达的影响

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中国环境科学 2004年第4期24卷 456-459页

作者：李金龙徐世文熊永忠李术王秀荣东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

应用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色(AO/EB)法、DNA琼脂糖凝胶电泳及半定量RT-PCR法检测了氯化镉在浓度0～30μmol/L范围内对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞凋亡及对p53mRNA表达的影响.结果表明,浓度为0～30μmol/L的镉能引起鸡脾脏淋巴细胞凋亡及... 详细信息

应用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色(AO/EB)法、DNA琼脂糖凝胶电泳及半定量RT-PCR法检测了氯化镉在浓度0～30μmol/L范围内对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞凋亡及对p53mRNA表达的影响.结果表明,浓度为0～30μmol/L的镉能引起鸡脾脏淋巴细胞凋亡及干扰p53mRNA的表达,低浓度镉引起的细胞凋亡与p53mRNA的表达密切相关,而高浓度的镉能够导致鸡脾脏淋巴细胞坏死.

关键词：镉鸡脾脏淋巴细胞凋亡坏死 p53mRNA

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表达H5亚型禽流感病毒HA基因的DNA疫苗免疫保护效力研究

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中国农业科学 2004年第7期37卷 1071-1075页

作者：姜永萍于康震邓国华田国斌乔传玲陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

表达高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1) [GD/1/96(H5N1)]HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA5具有良好的免疫保护性,为了将其开发并应用于实际,对其免疫保护效力进行了进一步的研究。结果表明,用10、40、70、100和150g pCIHA... 详细信息

表达高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1) [GD/1/96(H5N1)]HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA5具有良好的免疫保护性,为了将其开发并应用于实际,对其免疫保护效力进行了进一步的研究。结果表明,用10、40、70、100和150g pCIHA5和油苗1次免疫后,其免疫保护率分别为12.5%(1/8)、58.3%(7/12)、72.7%(8/11)、50.0%(6/12)、66.7%(8/12)和100%(12/12),其中70和100g剂量组的病毒分离结果为1/8和2/6;用剂量为5、20、35和50g pCIHA5分别免疫2次,免疫保护率分别为45.5%(5/11)、58.3%(7/12)、58.3%(7/12)和91.7%(11/12),5g的病毒分离结果为1/5,其余组未分离出病毒;pCIHA5免疫后AGP抗体均未检出,油苗免疫后其HI抗体虽高,但AGP抗体也呈阳性。结果显示,加强免疫应为DNA疫苗质粒pCIHA5的安全免疫方式,DNA疫苗质粒pCIHA5虽具有较为稳定的免疫原性和免疫保护性,但有必要进一步提高其在肌肉组织中的有效表达水平和抗体反应水平。

关键词：禽流感病毒血凝素基因 DNA疫苗免疫保护效力

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共表达禽流感病毒HA和NA基因的重组禽痘病毒在SPF鸡的免疫效力试验

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中国农业科学 2004年第4期37卷 605-608页

作者：乔传玲姜永萍于康震田国斌陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的HA和NA2个基因同源重组到禽痘病毒基因组中,获得了能同时高效表达这2种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)。将rFPV-HA-NA经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡,免疫后4周分别用10LD50的高致病力... 详细信息

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的HA和NA2个基因同源重组到禽痘病毒基因组中,获得了能同时高效表达这2种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)。将rFPV-HA-NA经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡,免疫后4周分别用10LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)和A/FPV/Rostock/34(H7N1)毒株进行攻击。结果重组禽痘病毒免疫鸡群诱导产生了高水平的抗体,能够完全抵抗H5N1和H7N1亚型病毒的致死性攻击;并可有效阻止病毒在泄殖腔的排出。而禽痘病毒免疫组和非免疫对照组在攻毒后全部发病并死亡。

关键词：禽流感病毒 HA NA 重组禽痘病毒免疫效力

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禽流感病毒N3亚型神经氨酸酶基因的克隆

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中国预防兽医学报 2004年第3期26卷 161-164页

作者：邓国华王秀荣张立春刘振勇乔传玲田国彬于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

本研究应用11日龄SPF鸡胚增殖禽流感病毒标准株A/Duck/Germany/1215(H2N3),用LSTRIAZOL试剂盒提取病毒RNA,应用自行设计的NA基因半特异性引物进行RT＿PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18＿T载体上,并进行鉴定和序列测定。测... 详细信息

本研究应用11日龄SPF鸡胚增殖禽流感病毒标准株A/Duck/Germany/1215(H2N3),用LSTRIAZOL试剂盒提取病毒RNA,应用自行设计的NA基因半特异性引物进行RT＿PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18＿T载体上,并进行鉴定和序列测定。测定结果表明所获得的NA基因DNA片段长1451bp,编码469个氨基酸残基,与其他亚型的NA基因编码的氨基酸长度相一致。根据推导的氨基酸序列进行预测,该蛋白具有6个潜在的糖基化位点和19个半胱氨酸残基。与其他亚型的NA基因相比较发现克隆的NA基因符合神经氨酸的分子结构特征,本研究首次获得N3亚型NA基因全序列。

关键词：禽流感病毒神经氨酸酶 N3 NA基因克隆

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