检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2016年第2期46卷 258-263页

作者：邵家日王显兵汪洋李媛刘素丽王琪陈莹高丽萍周长平辛九庆吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

为研究牛支原体脂质相关膜蛋白(LAMPs)激活MAPK信号通路诱导EBL细胞释放IL-1β的分子机制,用牛支原体脂质相关膜蛋白刺激EBL细胞,发现牛支原体LAMPs能够诱导IL-1β的表达。进一步研究表明,p38 MAPK,ERK MAPK和JNK MAPK信号通路在牛支原... 详细信息

为研究牛支原体脂质相关膜蛋白(LAMPs)激活MAPK信号通路诱导EBL细胞释放IL-1β的分子机制,用牛支原体脂质相关膜蛋白刺激EBL细胞,发现牛支原体LAMPs能够诱导IL-1β的表达。进一步研究表明,p38 MAPK,ERK MAPK和JNK MAPK信号通路在牛支原体LAMPs刺激EBL细胞诱导IL-1β表达中起重要作用。过表达TLR1、TLR2,LAMPs刺激EBL细胞,IL-1β的表达量增加。进一步研究表明,TLR接合体髓样化初级反应因子88(My D88)和IRAK4在LAMPs刺激IL-1β诱导中起重要作用。结果表明,牛支原体LAMPs刺激EBL由TLR2、TLR1、MyD88和IRAK4 MAPK信号通路细胞诱导IL-1β的表达。

关键词：牛支原体脂质相关膜蛋白 MAPK信号通路

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肠炎沙门菌延伸因子EF-Tu缺失株对环境压力的应答变化

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中国预防兽医学报 2016年第1期38卷 31-34页

作者：刘松艳周薇司微王曼宇张童利刘思国于申业中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江大庆163319 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

延伸热不稳定因子(EF-Tu)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是在蛋白质合成过程中负责肽链的延伸。为研究肠炎沙门菌EF-Tu的tuf A基因缺失对环境压力的应答变化,本研究利用改进的Red同源重组方法构建肠炎沙门氏菌SM6株的tuf A缺失株,... 详细信息

延伸热不稳定因子(EF-Tu)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是在蛋白质合成过程中负责肽链的延伸。为研究肠炎沙门菌EF-Tu的tuf A基因缺失对环境压力的应答变化,本研究利用改进的Red同源重组方法构建肠炎沙门氏菌SM6株的tuf A缺失株,命名为SM6Δtuf A,并鉴定缺失株的形态学变化,分析耐酸性、渗透应力、温度缺氧应力、氧化应力的改变。结果表明缺失株对酸性条件及升温缺氧的耐受与亲本株相似;对渗透压的耐受稍强于亲本株,但差异不显著;对氧化压力的耐受显著弱于亲本株。本研究构建的肠炎沙门氏菌tuf A基因缺失株SM6Δtuf A,为进一步研究EF-Tu在沙门氏菌的生物学和致病机制中的作用奠定了基础。

关键词：延伸因子EF-Tu Red同源重组沙门氏菌生物学特性环境压力

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通过暂时免疫抑制研究跨膜蛋白C末端缺失对EIAV疫苗株EIAV_(FDDV12)体内复制的影响

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中国预防兽医学报 2010年第11期32卷 829-833页

作者：姜成刚马建林跃智赵立平吕晓玲华育平刘娣周建华黑龙江省农业科学院畜牧研究中心博士后工作站黑龙江哈尔滨150086 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北林业大学博士后流动站黑龙江哈尔滨150086

马传染性贫血病毒(EIAV)减毒疫苗是世界首例慢病毒疫苗,但其作用机理尚不明了。我们的前期研究发现EIAV疫苗株EIAVFDDV12编码跨膜蛋白gp45的基因在马体内发生高频率G2230A点突变形成终止子,使该蛋白C末端出现154个氨基酸的截短。为了探... 详细信息

马传染性贫血病毒(EIAV)减毒疫苗是世界首例慢病毒疫苗,但其作用机理尚不明了。我们的前期研究发现EIAV疫苗株EIAVFDDV12编码跨膜蛋白gp45的基因在马体内发生高频率G2230A点突变形成终止子,使该蛋白C末端出现154个氨基酸的截短。为了探讨该截短蛋白对EIAV疫苗株生物学特性的作用,本研究以EIAV弱毒疫苗株感染性克隆基础上,构建了gp45截短型感染性克隆,脂质体转染细胞,增殖传代,获得病毒株EIAVFDDVTM-36,接种到马体内。在接种后167 d内未观察到临床症状,连续注射10 d地塞米松以暂时抑制免疫系统,并用迟发性超敏反应和淋巴细胞增殖实验评价免疫抑制效果。结果显示,截短型跨膜蛋白疫苗株EIAVFDDVTM-36接种组免疫抑制前后病毒载量和中和抗体效价差异不显著,而完整型跨膜蛋白疫苗株感染性克隆EIAVFDDVTM-45接种组4匹马中3匹免疫抑制后病毒载量显著上升,同时组内中和抗体效价明显提高。以上结果表明,马体特异性免疫压力对EIAVFDDVTM-36复制无影响,而对亲本株EIAVFDDVTM-45复制有抑制,显示跨膜蛋白截短型EIAV作为疫苗更为安全。但免疫抑制造成的gp45跨膜蛋白未截短型疫苗株感染性克隆体内病毒载量升高,可以促使机体产生更高的中和抗体效价,提示该疫苗的安全性和有效性在一定程度内呈负相关(相互制约)。因此,安全性和有效性的平衡是慢病毒减毒疫苗研发需注意的重要因素。

关键词：马传染性贫血病毒跨膜蛋白截短突变体内复制免疫抑制

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马传染性贫血病毒囊膜基因gp90 V4区糖基化回复突变感染性克隆的构建

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中国预防兽医学报 2009年第3期31卷 165-169页

作者：韩秀娥张萍王雪峰孔宪刚周建华相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江省乳品工业技术开发中心黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150001

为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜... 详细信息

为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLGFD3-8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行了糖基化序列回复突变操作,构建了全基因感染性克隆pLGFDg9。将其转染驴胎皮肤细胞(FDD),通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性。结果表明,在FDD细胞中盲传3代后,在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性,RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳性,电镜下见到典型的EIAV颗粒。

关键词：马传染性贫血病毒 N-连接糖基化定点突变感染性克隆

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马传染性贫血病毒基质蛋白p15单克隆抗体的制备

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中国预防兽医学报 2009年第9期31卷 730-733页

作者：张萍于在江韩秀娥王雪峰朱远茂周建华魏萍东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150001 兽医生物技术国家重点实验室／大动物病研究室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江省乳品工业技术开发中心黑龙江哈尔滨150001

为制备抗马传染性贫病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组EIAV基质蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗EIAV基质蛋白p15抗体的杂交瘤细胞。应用重组p15和EIAV总蛋白为抗原建立的ELISA以及EIAV感... 详细信息

为制备抗马传染性贫病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组EIAV基质蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗EIAV基质蛋白p15抗体的杂交瘤细胞。应用重组p15和EIAV总蛋白为抗原建立的ELISA以及EIAV感染细胞的间接免疫荧光法,对杂交瘤细胞进行了有限稀释法筛选,获得了7株稳定分泌抗p15抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为:1F12、1E2、1E3、4B10、4H7、5E5、4G5。这些抗p15 MAb均能与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的相应蛋白结合。抗体效价叠加实验表明,这7株MAb中含有至少3种识别不同抗原决定簇的抗体。这些p15 MAb的获得有助于对EIAV和慢病毒的深入研究。

关键词：马传染性贫血病毒基质蛋白p15 单克隆抗体

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肠炎沙门氏菌三种主要毒力岛基因缺失株的构建及其免疫效力研究

肠炎沙门氏菌三种主要毒力岛基因缺失株的构建及其免疫效力研究

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：吕雪莲周薇刘松艳曹俊张童利王曼宇刘思国于申业中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院

目的：沙门氏菌病属于重要的食源性致病菌之一，经常通过污染的水和食物引起人类疾病。沙门氏菌的致病性与其毒力岛基因密切相关。因此，构建沙门氏菌单个或多个毒力岛的基因缺失株，并评估这些毒力岛对沙门氏菌致病性的影响以及在鸡体...

目的：沙门氏菌病属于重要的食源性致病菌之一，经常通过污染的水和食物引起人类疾病。沙门氏菌的致病性与其毒力岛基因密切相关。因此，构建沙门氏菌单个或多个毒力岛的基因缺失株，并评估这些毒力岛对沙门氏菌致病性的影响以及在鸡体内诱导免疫应答变化是非常重要的。

关键词：

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中国3种旧大陆猴TRIMCyp嵌合基因的存在状况及基因特性研究

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中国预防兽医学报 2011年第8期33卷 615-619页

作者：那雷于长清季芳汤艳东李亮林跃智吕晓玲刘晓明郑永辉周建华曲娟娟东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 广东省昆虫研究所华南灵长类研发中心广东广州510030 Microbiology and Molecular Genetics Michigan State University

本研究应用PCR方法检测了中国3种旧大陆猴(恒河猴、食蟹猴及藏酋猴)的TRIMCyp嵌合基因型个体的存在状况,并首次发现携带TRIMCyp嵌合基因中国品系恒河猴。同时本实验应用建立RT-PCR方法在mRNA水平上进一步检测了恒河猴和食蟹猴的TRIMCyp... 详细信息

本研究应用PCR方法检测了中国3种旧大陆猴(恒河猴、食蟹猴及藏酋猴)的TRIMCyp嵌合基因型个体的存在状况,并首次发现携带TRIMCyp嵌合基因中国品系恒河猴。同时本实验应用建立RT-PCR方法在mRNA水平上进一步检测了恒河猴和食蟹猴的TRIMCyp嵌合基因序列和特性。其编码的融合蛋白TRIMCyp丧失了对HIV-1复制的限制功能,推测具有该基因型旧大陆猴对HIV-1更易感,可用于建立新型的艾滋病非人灵长类动物模型。本研究结果将促进逆转录病毒跨种间传播的研究和建立HIV-1易感非人灵长类动物模型。

关键词： RT-PCR 中国旧世纪猴 TRIMCyp HIV-1

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口蹄疫病毒一个共享抗原表位的鉴定和精确定位

口蹄疫病毒一个共享抗原表位的鉴定和精确定位

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第六届全国免疫学学术大会

作者：于永忠赵磊周国辉张春媛于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的一种主要侵害偶蹄动物的急性、热性、高度接触性动物传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物传染病之首,我国也将其列为一类动物传染病的第一位。在我国,防控口蹄疫的关键是建立快速诊... 详细信息

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的一种主要侵害偶蹄动物的急性、热性、高度接触性动物传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物传染病之首,我国也将其列为一类动物传染病的第一位。在我国,防控口蹄疫的关键是建立快速诊断方法和使用有效

关键词：口蹄疫病毒抗原表位精确定位

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Asia 1型口蹄疫病毒空衣壳在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析

Asia 1型口蹄疫病毒空衣壳在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王芳王海伟于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是偶蹄动物的烈性传染病,严重危害畜牧业的发展。传统的病毒灭活疫苗预防口蹄疫虽然有效,但存在病毒从工厂逃逸以及灭活不彻底的,安全性隐患。因此,研制安全、有效、而且廉价的新型口蹄疫疫苗,对于... 详细信息

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是偶蹄动物的烈性传染病,严重危害畜牧业的发展。传统的病毒灭活疫苗预防口蹄疫虽然有效,但存在病毒从工厂逃逸以及灭活不彻底的,安全性隐患。因此,研制安全、有效、而且廉价的新型口蹄疫疫苗,对于采用免疫预防策略防制口蹄疫的国家尤为重要。毕赤酵母表达系统作为一种新型酵母表达系统,它既有原核生物的特点,又有真核生物的特性,可

关键词：口蹄疫病毒空衣壳 Asia 1 免疫原性分析毕赤酵母

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副结核分枝杆菌MAP1588C蛋白的原核表达与抗原性分析

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中国动物传染病学报 2012年第6期20卷 36-39页

作者：刘银冰陈利苹鄢秋龙曹俊刘思国黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001

从副结核分支杆菌K-10菌株基因组中扩增出516 bp的MAP1588C基因片段,插入原核表达载体pET-28b(+),转化至大肠杆菌BL21(DE3),在0.5 mmol/L的IPTG诱导下进行表达;利用融合蛋白的组氨酸标签进行亲和层析纯化重组蛋白;通过抗6 His标签抗体的... 详细信息

从副结核分支杆菌K-10菌株基因组中扩增出516 bp的MAP1588C基因片段,插入原核表达载体pET-28b(+),转化至大肠杆菌BL21(DE3),在0.5 mmol/L的IPTG诱导下进行表达;利用融合蛋白的组氨酸标签进行亲和层析纯化重组蛋白;通过抗6 His标签抗体的Western blot验证了纯化蛋白产物;另外,副结核阳性牛血清可检测到该蛋白条带。结果表明,表达的重组蛋白MAP1588C的蛋白分子量为21 kDa,具有良好抗原性,有望将此抗原用于建立副结核的ELISA诊断方法。

关键词：副结核分支杆菌 MAP1588C蛋白重组表达免疫性

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