检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：戚亭郭巍戴伶俐李雪峰何娜盛明巍赵立平李红梅相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室

2007年,中国新疆地区暴发马流感疫情,我们从新疆乌鲁木齐自治区发病驴体内分离了一株马流感病毒,命名为A/驴/新疆/5/2007。为了分析这个新分离株的遗传特征,根据GenBank上登录的EIV序列,设计了扩增H3N8亚型EIV HA基因的特异性引物,并扩... 详细信息

2007年,中国新疆地区暴发马流感疫情,我们从新疆乌鲁木齐自治区发病驴体内分离了一株马流感病毒,命名为A/驴/新疆/5/2007。为了分析这个新分离株的遗传特征,根据GenBank上登录的EIV序列,设计了扩增H3N8亚型EIV HA基因的特异性引物,并扩增了该株HA基因。对HA蛋白的序列分析、糖基化位点分析以及遗传进化分析表明,A/驴/新疆/5/2007属于美洲系马流感病毒佛罗里达2亚型。A/驴/新疆/5/2007与我国今年来的流行毒株同源性最高,而与我国上世纪的流行毒株,如A/马/青海/1/1994,序列同源性较远。并且,与目前流行的疫苗株相比,A/驴/新疆/5/2007处在不同的进化分支里。这表明我国需要进一步加强对H3N8亚型马流感病毒的监测。

关键词：马流感病毒驴分离序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较

马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：全滟平韩秀娥沈楠赵立平周建华沈荣显相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室

将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13、18、21、23、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR的序列比较发现,驴胎皮肤细胞毒... 详细信息

将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13、18、21、23、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR的序列比较发现,驴胎皮肤细胞毒株LTR的U3负调节区出现大段的插入、点突变、缺失,U3增强子区变异较小。将LTR片段插入到pCAT-basic载体CAT报告基因前,瞬时转染驴胎皮肤细胞,通过检测CAT表达量来评价LTR的启动子活性。驴胎皮肤细胞毒株LTR的启动子活性随着病毒传代次数的增加而逐渐增强,而驴白细胞弱毒株LTR的启动子活性很低。

关键词：马传染性贫血病毒 LTR 基因进化启动子活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核分枝杆菌rv3036c基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

结核分枝杆菌rv3036c基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：陈利苹曹俊刘银冰鄢秋龙刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／动物细菌病研究室，黑龙江哈尔滨 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／动物细菌病研究室，黑龙江哈尔滨 150001 黑龙江八一农垦大学，黑龙江大庆 163319

本研究以结核分枝杆菌强毒株H37Rv基因组DNA为模板，扩增rv3036c基因，将此基因片段连接于表达载体pET-28a(+)，获得重组质粒pET-28a-ru3036c，并将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，经1 mmol／L IPTG诱导表达组氨酸标签融合蛋白R_v3... 详细信息

本研究以结核分枝杆菌强毒株H37Rv基因组DNA为模板，扩增rv3036c基因，将此基因片段连接于表达载体pET-28a(+)，获得重组质粒pET-28a-ru3036c，并将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，经1 mmol／L IPTG诱导表达组氨酸标签融合蛋白R_v3036c，用Ni-NTAHis口Bind Resin纯化目的蛋白，经westem-b10t验证了蛋白的纯化结果。Rv3036c蛋白纯化产物免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体。并通过间接EuSA方法检测抗体效价。结果显示，重组质粒双酶切鉴定和DNA序列测定均完全正确;sDS-PAGE和westem_blot分析结果显示，pET-28a-Rv3036c VT,可溶形式表达，蛋白分子量大小为28ku，且具有很好的免疫原性。以上结果为进一步研究rv3036c基因在结核分枝杆菌致病性中的作用奠定了很好的基础。

关键词：结核分枝杆菌原核表达多克隆抗体蛋白纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛分枝杆菌分枝菌酸环丙烷合酶PCAA的表达与鉴定

牛分枝杆菌分枝菌酸环丙烷合酶PCAA的表达与鉴定

引用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：刘建东刘思国王春来宫强王勇中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家生物重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001 中国农业科学院研究生院北京100081 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家生物重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001 东北农业大学哈尔滨150030

目的:克隆表达牛分枝杆菌持续感染相关蛋白PCAA,并鉴定其免疫活性.方法:以牛分枝杆菌Vallee株基因组为模板,利用PCR方法扩增该菌株的环丙烷-分枝菌酸合酶pcaA基因,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达重组融合... 详细信息

目的:克隆表达牛分枝杆菌持续感染相关蛋白PCAA,并鉴定其免疫活性.方法:以牛分枝杆菌Vallee株基因组为模板,利用PCR方法扩增该菌株的环丙烷-分枝菌酸合酶pcaA基因,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达重组融合蛋白,并利用Ni亲和层析的方法纯化出重组蛋白.再通过免疫印迹鉴定其免疫活性.结果:扩增出了牛分枝杆菌中pcaA基因并纯化出了重组的融合蛋白,通过免疫印迹发现,重组蛋白可与牛结核阳性血清发生特异性反应.结论:成功的表达了PCAA重组融合蛋白,并且鉴定出重组蛋白与牛结核阳性血清发生特异性免疫反应,为进一步研究牛分枝杆菌的致病机理与毒力开发奠定基础.

关键词：牛分枝杆菌持续感染 pcaA基因 PCAA表达环丙烷合酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊传染性胸膜肺炎病原体国内分离株的分子特征研究

山羊传染性胸膜肺炎病原体国内分离株的分子特征研究

引用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：李媛张建华胡守萍王亮辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室基础条件及技术服务中心哈尔滨150001

[目的]山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(*** ***,Mccp)引起的高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病.我国目前对于CCPP的病原的分类地位的看法与国际标准不符... 详细信息

[目的]山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(*** ***,Mccp)引起的高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病.我国目前对于CCPP的病原的分类地位的看法与国际标准不符.本实验计划对4株丝状支原体簇中国分离菌种进行分子生物学鉴定,确定其真正分类.[方法]针对三段不同基因使用三对引物,对扩增产物进行酶切鉴定和测序,将结果与丝状支原体簇的6个成员进行遗传衍化分析.[结果]该4株支原体以M5M6为引物扩增后PstI酶切的产物与Mccp相同,为548、420、128等3条DNA条带,丝状支原体山羊亚种(M mycoides ***,MmC)等其他丝状支原体簇成员只有420、128bp 2条带.在rpsG和fusA基因段与f38同源性为99.5％,与Mcc kid为98.9％,与MmC ZZ株仅为95.4％.在H2和H2prim段,与MmC PG3株同源性为67.4％-67.6％,与两株Mcc 8601-50和California Kid同源性为95.1％-98.4％,与三株Mccp 97097ET、Gabes和F38的同源性为99.6-99.8％.[结论]87001、87002、367、1653等4株中国分离的CCPP病原菌与山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)亲缘关系更近,故建议其归属为Mccp.

关键词：传染性胸膜肺炎丝状支原体山羊支原体山羊肺炎亚种分子特征

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

引用

中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 87-91页

作者：王琪汪洋李媛刘素丽邵家日陈莹高丽萍周长平李春艳辛九庆东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径。为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL)IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测... 详细信息

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径。为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL)IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测IL-1β的m RNA表达水平,结果显示LAMPs可以诱导EBL细胞分泌IL-1β,并确定Mmm的LAMPs刺激EBL细胞的最佳时间为6 h,最佳剂量为1μg/m L;将JNK、P38及ERK抑制剂分别加入培养的EBL细胞后,IL-1β的m RNA表达水平均受到显著抑制(p<0.05);将p CMV-HA-TLR2转染EBL细胞使其过表达和抗体封闭TLR2两种方式处理,并采用JNK、P38及ERK抑制剂分别处理EBL细胞,经检测过表达TLR2实验组的IL-1βm RNA表达水平上调,然而抗体封闭TLR2实验组的IL-1βm RNA表达水平下调,表明TLR2通过MAPK信号通路对IL-1β的分泌进行调控;采用牛IL-1β的ELISA试剂盒对细胞上清液中IL-1β浓度的检测结果显示,其与IL-1β的m RNA表达水平变化趋势一致。上述结果表明Mmm的LAMPs可以诱导EBL细胞,激活TLR2依赖的MAPK信号通路,从而引起IL-1β的分泌。

关键词：丝状支原体丝状亚种脂质相关蛋白 MAPK信号通路 IL-1β

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗马传染性贫血病毒Rev蛋白单克隆抗体的制备

引用

中国预防兽医学报 2014年第2期36卷 157-159页

作者：郭纪珂戈曼张泽力马建申之义王晓钧内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010010 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为制备马传染性贫血病毒(EIAV)蛋白表达调控因子Rev的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的重组EIAV Rev为免疫原,免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得一株能够稳定... 详细信息

为制备马传染性贫血病毒(EIAV)蛋白表达调控因子Rev的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的重组EIAV Rev为免疫原,免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得一株能够稳定分泌抗Rev的杂交瘤细胞株。MAb亚型鉴定为IgG2a/κ。Western blot与间接免疫荧光试验结果显示,获得的MAb与真核表达的Rev呈阳性反应。本研究首次制备了抗EIAV Rev的MAb,为Rev的功能研究奠定了基础。

关键词：马传染性贫血病毒 Rev 单克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛支原体脂质相关膜蛋白诱导胎牛肺细胞差异表达的转录组学研究

引用

中国预防兽医学报 2017年第4期39卷 267-271页

作者：王显兵汪洋李媛邵家日王琪陈莹周长平于艳超王莉莉辛九庆马红霞吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150069 东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

为阐明牛支原体(Mycoplasma bovis,***)脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导胎牛肺(EBL)细胞的免疫应答机制,本研究采用转录组测序(RNA-seq)技术结合生物信息学方法分析*** LAMPs诱导EBL细胞产生的差异表达基因。本实验首先分别构建LAMPs诱导组... 详细信息

为阐明牛支原体(Mycoplasma bovis,***)脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导胎牛肺(EBL)细胞的免疫应答机制,本研究采用转录组测序(RNA-seq)技术结合生物信息学方法分析*** LAMPs诱导EBL细胞产生的差异表达基因。本实验首先分别构建LAMPs诱导组与对照组EBL细胞的c DNA文库并对其进行高通量测序,利用MAS3.0软件对差异表达基因进行筛选,结果显示共筛选得到706个差异表达基因,其中上调和下调差异基因分别为364个和342个;GO注释显示,差异表达基因编码蛋白主要与细胞黏附、免疫应答以及细胞增殖等相关;利用荧光定量PCR对部分差异表达基因(PIM2、F2RL1以及PTPN2)的表达情况进行验证,结果与RNA-seq测序结果相符。本研究为进一步阐述***的致病机制及宿主的免疫应答机制提供依据。

关键词：牛支原体脂质相关膜蛋白胎牛肺细胞细胞转录组测序

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛支原体及其脂质相关膜蛋白诱导胎牛肺细胞IL-1β表达的分子机制研究

引用

中国预防兽医学报 2015年第6期37卷 444-447页

作者：刘素丽汪洋李媛周玉梅高利萍邵佳日王琪陈莹辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

为研究牛支原体(***)及其脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导胎牛肺(EBL)细胞IL-1β表达的分子机制,本研究首先以***及其LAMPs刺激EBL细胞,利用荧光定量PCR检测细胞因子IL-1β的动态变化;然后将融合表达的细胞p65(Rel A)蛋白和绿色荧光蛋白重组... 详细信息

为研究牛支原体(***)及其脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导胎牛肺(EBL)细胞IL-1β表达的分子机制,本研究首先以***及其LAMPs刺激EBL细胞,利用荧光定量PCR检测细胞因子IL-1β的动态变化;然后将融合表达的细胞p65(Rel A)蛋白和绿色荧光蛋白重组质粒p EGFP-p65转染EBL细胞,以LAMPs刺激EBL细胞,通过激光共聚焦观察p65的亚细胞分布。荧光定量PCR结果显示,***及其LAMPs能够诱导EBL细胞IL-1β的表达;而且LAMPs作用的最佳剂量为2μg/m L,最佳时间为12 h。同时,激光共聚焦试验检测到LAMPs能够诱导p65进入EBL细胞核中。上述实验结果表明LAMPs能够诱导EBL细胞中p65进入细胞核内,从而激活NF-κB信号通路,诱导IL-1β上调表达。

关键词：牛支原体脂质相关膜蛋白胎牛肺细胞 NF-κB信号通路 IL-1β IL-1β

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多重耐药基因cfr在动物源细菌中的流行病学及传播机制研究

多重耐药基因cfr在动物源细菌中的流行病学及传播机制研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：张万江王秀梅张荣民刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／细菌病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

cfr首次在2000年由德国联邦农业研究中心，动物育种研究所分子微生物和诊断室的Stefan Schwarz教授从患有呼吸道疾病的小牛鼻腔中分离到的松鼠葡萄球菌中发现。本文介绍了cfr基因的作用机制、流行情况、传播机制。

关键词：动物源细菌多重耐药基因流行病学传播机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：