检索结果-内蒙古大学图书馆

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：迟磊常月红云孟克赵福广刘思国宫强王春来赵昆王勇刘建东刘慧芳周媛媛中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001 吉林农业大学生物技术学院长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001 吉林农业大学生物技术学院长春130118

以牛分支杆菌vallee株基因组DNA为模板,应用PCR法扩增hsp65和esat6两个基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建原核重组表达质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌感... 详细信息

以牛分支杆菌vallee株基因组DNA为模板,应用PCR法扩增hsp65和esat6两个基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建原核重组表达质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导(终浓度1mmol/L),进行SDS-PAGE电泳分析,结果表明:Hsp65-ESAT6融合蛋白是以包涵体形式表达,融合蛋白pET65-E6裂解为两部分,即58KD和30KD,两个蛋白分子量相加与预测的88KD相符,将表达的融合蛋白经Ni2+亲和层析的方法纯化.

关键词：牛分之杆菌纯化 PCR法 Hsp65基因片段 ESAT6基因片段融合蛋白

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亚洲1型口蹄疫病毒样颗粒腺病毒表达疫苗及其免疫效果

亚洲1型口蹄疫病毒样颗粒腺病毒表达疫苗及其免疫效果

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2010中国微生物学会学术年会

作者：周国辉王海伟王芳于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其病原为口蹄疫病毒(FMDV)。鉴于口蹄疫对世界经济造成的严重危害，国际兽疫局(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将其列为A类传染病之首，我国也将其列在一类动物传染病的第一位... 详细信息

@@口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其病原为口蹄疫病毒(FMDV)。鉴于口蹄疫对世界经济造成的严重危害，国际兽疫局(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将其列为A类传染病之首，我国也将其列在一类动物传染病的第一位。疫苗接种是特异性预防FMD的有效手段，安全有效的疫苗是成功地预防、控制乃至最终消灭FMD的先决条件。

关键词：亚洲1型口蹄疫病毒颗粒腺病毒表达疫苗免疫效果

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跨膜蛋白截短突变对马传染性贫血弱毒疫苗株体内复制特性和免疫诱导能力的影响

跨膜蛋白截短突变对马传染性贫血弱毒疫苗株体内复制特性和免疫诱...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：姜成刚高旭马建林跃智赵立平吕晓玲周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

验室前期研究发现马传染性贫血病毒(EIAV)疫苗株EIAVFDDV12的跨膜蛋白gp45在马体内发生高频率W261位点翻译终止突变，使该蛋白C末端出现154个氨基酸的截短。为探讨该突变对病毒特性和机体免疫应答的影响，本研究构建了gp45截短型感染性...

验室前期研究发现马传染性贫血病毒(EIAV)疫苗株EIAVFDDV12的跨膜蛋白gp45在马体内发生高频率W261位点翻译终止突变，使该蛋白C末端出现154个氨基酸的截短。为探讨该突变对病毒特性和机体免疫应答的影响，本研究构建了gp45截短型感染性病毒株EIAVFDDC-TM36，检测该截短突变对ELAV疫苗株体内复制特性的影响，以及对强毒攻击免疫保护率。实验结果表明，在接种马体后167 d内未观察到EIA临床表现，经药物免疫抑制后，EIAVFDDV-TM36接种组免疫抑制前后病毒载量和中和抗体效价差异不显著，而其亲本株EIAVFDDV-3-8接种组4匹马中3匹免疫抑制后病毒载量显著上升，同时组内中和抗体效价明显提高。免疫抑制恢复后进行强毒攻击，EIAVFDDV-TM36接种组的死亡率(75％)高于ELAVFDDV-3-8接种组(33％)。以上结果提示，EIAV疫苗的gp45截短型毒株是适应在体外FDD细胞中传代致弱的变异，导致毒力进一步减弱。跨膜蛋白截短型ELAV作为疫苗更为安全，但降低了免疫诱导能力，提示该疫苗的安全性和有效性在一定程度内呈负相关(相互制约)。

关键词：

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口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究

口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究

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第八届全国病毒学学术研讨会

作者：王海伟杨德成薛美于永忠赵磊李万于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活性的单克隆抗体3E11，该单抗识别亚... 详细信息

@@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活性的单克隆抗体3E11，该单抗识别亚洲1型FMDV一个构象型中和表位。对3E11单抗逃逸病毒进行序列比对分析发现，VP1蛋白G1y144是单抗3E11识别的一个重要氨基酸，由此将该构象型中和表位定位于VP1蛋白的G1y144周围。

关键词：口蹄疫病毒构象型中和表位病毒鉴定单克隆抗体比对分析

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Leachii支原体研究进展

Leachii支原体研究进展

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2010中国微生物学会学术年会

作者：常继涛于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。呈球形、双球形及丝状的不规则形态，球形直径约100nm-800nm，能繁殖的最小单位为300nm，丝状体直径为100-40... 详细信息

@@支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。呈球形、双球形及丝状的不规则形态，球形直径约100nm-800nm，能繁殖的最小单位为300nm，丝状体直径为100-400nm，长度为3-100um，可通过450nm微孔滤膜，压挤下可通过220nm滤膜。支原体于1898年由Nocard等首次分离，1956年正式命名为支原体，在微生物分类中建立了一个新的独立的纲-柔膜体纲(Mollicutes)，并成为一门独立的学科，即支原体学。目前已经测定的支原体全基因组序列中，生殖支原体(Mycoplasma genitalium)基因组最小，为580kb，穿透支原体(Mycoplasmapeaetrarts)基因组最大，为1358kb。目前分离鉴定的支原体中，大多数为寄生菌或共生菌，部分有致病作用，其致病机理主要是抑制机体的免疫反应，从而导致炎性变化。

关键词： Leachii支原体致病机理免疫反应炎性变化

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一个非中和性表位关键氨基酸的改变对口蹄疫病毒中和表位活性的影响

一个非中和性表位关键氨基酸的改变对口蹄疫病毒中和表位活性的影...

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第八届全国病毒学学术研讨会

作者：杨德成于永忠于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@0型泛亚潜系口蹄疫病毒在上个世纪末大规模流行于亚、非、欧以及南美大陆，造成严重的经济损失，目前该病毒仍然在一些国家和地区流行。本研究用泛亚口蹄疫病毒反向遗传操作平台，对近20年间的泛亚口蹄疫病毒的抗原演化进行定点回复... 详细信息

@@0型泛亚潜系口蹄疫病毒在上个世纪末大规模流行于亚、非、欧以及南美大陆，造成严重的经济损失，目前该病毒仍然在一些国家和地区流行。本研究用泛亚口蹄疫病毒反向遗传操作平台，对近20年间的泛亚口蹄疫病毒的抗原演化进行定点回复突变，进而将这些拯救的突变株与一系列泛亚口蹄疫病毒的单克隆抗体反应，发现P153Q突变病毒不能与单抗1F6(不具备中和活性)结合。

关键词：非中和性表位关键氨基酸口蹄疫病毒中和活性单克隆抗体反应定点回复突变

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猪肺炎支原体P97 C末端基因重组腺病毒的构建与鉴定

猪肺炎支原体P97 C末端基因重组腺病毒的构建与鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：陈超辛九庆李媛王亮郭丹曹培丽乔祖建中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室

从猪肺炎支原体基因组中扩增其黏附因子P97C末端基因,然后通过KpnⅠ和SalⅠ酶切位点把该基因克隆入经过同样双酶切的穿梭载体pShuttle-CMV中。将鉴定正确的的重组穿梭质粒经PemⅠ线性化后电转化入内含腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞... 详细信息

从猪肺炎支原体基因组中扩增其黏附因子P97C末端基因,然后通过KpnⅠ和SalⅠ酶切位点把该基因克隆入经过同样双酶切的穿梭载体pShuttle-CMV中。将鉴定正确的的重组穿梭质粒经PemⅠ线性化后电转化入内含腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞中,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA。纯化后的重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞获得重组腺病毒。重组腺病毒经间接免疫荧光和Western Blot鉴定,证明了该重组腺病毒成功的表达了P97C末端蛋白。将该重组病毒进行纯化并进行滴度测定,获得了高纯度、高滴度的表达P97C末端基因的重组腺病毒,为研制新型猪肺炎支原体疫苗奠定了基础。

关键词：猪肺炎支原体猪喘气病 P97 重组腺病毒

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蛋鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定

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中国家禽 2020年第5期42卷 36-40页

作者：王雨龙范林进姜楠高玉龙李凯高立刘长军崔红玉潘青张艳萍王笑梅祁小乐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 世界动物卫生组织传染性法氏囊病参考实验室黑龙江哈尔滨150001 江苏高校动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在成为养禽业健康发展新的重要威胁。目前报道的IBDV新型变异株均来自肉鸡群的感染。为了解IBDV新型变异株感染蛋鸡的情况,通过对黑龙江省一个疑似非典型IBD发病... 详细信息

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在成为养禽业健康发展新的重要威胁。目前报道的IBDV新型变异株均来自肉鸡群的感染。为了解IBDV新型变异株感染蛋鸡的情况,通过对黑龙江省一个疑似非典型IBD发病蛋鸡群样品进行RT-PCR检测及相关分析,结果显示,引起该鸡群非典型IBD的病原是IBDV新型变异株。这是蛋鸡感染IBDV新型变异株的首次报道,对于更全面了解IBDV新型变异株的流行态势具有重要意义。

关键词：传染性法氏囊病病毒新型变异株蛋鸡

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马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体的制备

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中国预防兽医学报 2011年第7期33卷 565-567页

作者：韩秀娥张萍王雪峰李萌魏萍周建华尹杰超东北农业大学黑龙江省乳品工业技术开发中心黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学院黑龙江哈尔滨150030

为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获... 详细信息

为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获得两株能够稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为E11和F8。经试验证明,这些抗p26MAb均能够与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的p26蛋白结合。这两株p26蛋白MAb的获得将为EIAV的检测及鉴别诊断奠定基础。

关键词：马传染性贫血病毒 p26蛋白单克隆抗体

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携带cfr基因的猪源大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2序列分析

携带cfr基因的猪源大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2序列分析

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：张万江徐兴然王秀梅刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/细菌病研究室黑龙江哈尔滨 150001 西南大学重庆400715

[目的]获得cfr基因阳性大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2的全核酸序列,并分析cfr基因的遗传背景及新的传播方式.[方法]2010年从猪场分离到1株cfr基因阳性大肠杆菌,通过S1-PFGE、Southern杂交、接合转移试验、电击转化和质粒复制子分型等方法对p... 详细信息

[目的]获得cfr基因阳性大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2的全核酸序列,并分析cfr基因的遗传背景及新的传播方式.[方法]2010年从猪场分离到1株cfr基因阳性大肠杆菌,通过S1-PFGE、Southern杂交、接合转移试验、电击转化和质粒复制子分型等方法对pSCEC2质粒进行研究;同时采用454 GS-FLX测序仪对pSCEC2质粒进行序列全测定.[结果]最终获得一个全长为135,615 bp的pSCEC2,该质粒含有200编码大于100个氨基酸的开放阅读框.序列分析显示,pSCEC2质粒含有两个耐药基因簇,分别为floR耐药区和cfr耐药区.由cfr和两个转录方向相同的IS256插入元件组成的一个4.4 kb的片段,其中IS256被认为与cfr基因的转移有关.另一个耐药区包含floR、tet (A)-tetR、strA/strB和sul2耐药基因,该耐药基因簇在之前发现的其他IncA/C类型的质粒中都有发现.除了这2个耐药基因簇外,pSCEC2的质粒骨架和其他IncA/C类型的质粒骨架和核酸序列同源性＞99％.[结论]首次在宿主范围广、转移能力强以及稳定的IncA/C家族质粒中发现了多重耐药基因cfr,pSCEC2质粒将加速cfr基因的传播.cfr的基因环境分析表明,cfr基因两端各有一个完整的IS256插入元件,而且反向PCR也能得到由cfr和其中一个IS256组成的环状结构,这也再次提示IS256可介导cfr基因的移动.

关键词：恶唑烷酮耐药多重耐药食品源动物

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