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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

457 篇 期刊文献
289 篇 会议

馆藏范围

746 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

706 篇 农学
- 662 篇 兽医学
- 58 篇 作物学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
61 篇 工学
- 54 篇 生物工程
- 7 篇 化学工程与技术
- 1 篇 林业工程
59 篇 理学
- 59 篇 生物学
16 篇 医学
- 7 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 4 篇 临床医学
- 4 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 法学
- 1 篇 政治学

主题

76 篇 猪圆环病毒2型
54 篇 单克隆抗体
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
37 篇 猪瘟病毒
36 篇 原核表达
33 篇 序列分析
28 篇 猪流行性腹泻病毒
27 篇 抗原表位
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
22 篇 新城疫病毒
22 篇 分离鉴定
20 篇 传染性法氏囊病病...
18 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 鉴定
17 篇 猪圆环病毒
14 篇 生物学特性
14 篇 抗体检测试剂盒
13 篇 酵母双杂交

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
150 篇 东北农业大学
112 篇 中国农业科学院哈...
106 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
28 篇 中国农业科学院哈...
24 篇 黑龙江八一农垦大...
24 篇 中国农业科学院上...
19 篇 东北林业大学
18 篇 新疆农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
11 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
10 篇 内蒙古农业大学
8 篇 华南农业大学
8 篇 河北北方学院
8 篇 中国农业科学院哈...
7 篇 延边大学

作者

163 篇 刘长明
140 篇 危艳武
111 篇 王笑梅
108 篇 高玉龙
106 篇 黄立平
94 篇 高宏雷
86 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
78 篇 童光志
73 篇 吴洪丽
68 篇 郭龙军
64 篇 冯力
61 篇 陈建飞
58 篇 秦立廷
58 篇 韩宗玺
58 篇 王云峰
58 篇 仇华吉
57 篇 时洪艳
52 篇 崔尚金
51 篇 石星明

语言

746 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物传染病研究室"

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抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not ... 详细信息

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not I酶切位点，将PcR产物克隆到pGEx-6P-1载体，构建的重组质粒命名为pGEx-TTV1-ORF1-c1。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后进行诱导表达，获得了含GST标签的PTTv1-rCap重组融合蛋白，经SDS-AGE电泳分析和western blOt鉴定，目的蛋白获得了高效表达，分子量约为64．0kDa，以包涵体形式存在。用纯化的重组蛋白免疫Balb／c小鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术获得了8株稳定分泌抗PTTv1rCap蛋白的杂交瘤细胞株，依次命名为1H4、1E9、1E11、4G12、5c5、788、8c2、8G2，MAb亚类鉴定均为IgG1，轻链为K型;MAb培养上清效价为400～3200倍，腹水为4．0×105～6．4×1 06倍;有7株单抗与PTTVl=Cap蛋白产生特异性反应，另1株MAb(1E11)呈阴性，可能针对构象表位。为验证8株单抗与真核表达的cap蛋白的免疫反应性，将全长与截短的PTTV1-0RF-基因片段克隆到pcDNA3-1/V5-His TOPO表达载体，转染293T细胞进行蛋白表达，采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测表明，这8株MAb均能够与表达的c印蛋白产生特异性反应。本研究表达的PTTV1-Cap蛋白及制备的MAb，为该病毒诊断方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础。

关键词：猪输血传播病毒重组cap蛋白单克隆抗体抗性鉴定

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猪瘟病毒E2蛋白和猪RACK1相互作用的鉴定

猪瘟病毒E2蛋白和猪RACK1相互作用的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：凌理军仇华吉李素董泓贺番冯烁廖亚金申梁孙元翁长江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为筛选和鉴定与猪瘟病毒(csFv)E2蛋白相互作用的猪宿主蛋白，采用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞表达文库得到与猪瘟病毒csFV E2蛋白相互作用的宿主细胞RAcKl蛋白，经共转化试验和GsTpull-down试验进一步证实两者可以特异性结合，且... 详细信息

为筛选和鉴定与猪瘟病毒(csFv)E2蛋白相互作用的猪宿主蛋白，采用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞表达文库得到与猪瘟病毒csFV E2蛋白相互作用的宿主细胞RAcKl蛋白，经共转化试验和GsTpull-down试验进一步证实两者可以特异性结合，且共聚焦试验表明两者共定位于细胞的细胞浆。本研究证实E2蛋白与宿主细胞RACK1蛋白存在相互作用，RACK1在CSFV感染过程中所发挥的功能有待进一步研究。

关键词：猪瘟病毒E2蛋白猪宿主蛋白酵母双杂交猪巨噬细胞表达文库

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：危艳武范培虎郭龙军吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况，本试验采用第5代、10代和125代PRRSV-HBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征... 详细信息

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况，本试验采用第5代、10代和125代PRRSV-HBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征”为特点的症候群，第5代毒株感染组死亡率达40％(2／5)，第10代感染组症状明显减轻且无死亡，第125代毒株感染组基本无临床症状。这3个代次的毒株感染组于第3 d检测病毒血症呈阳性，第7～14 d到达高峰，第125代于21 d消失，较第5和10代毒株提前1 w。病毒感染后抗原检测主要分布于脾脏、扁桃体、淋巴结等组织，第5和10代毒株感染组脏器出现严重的病理损伤，第125代毒株感染组仅见轻微病理损伤。对3个代次毒株的ORF5、ORF6和ORF7测序显示，仅在ORF5出现了3个氨基酸位点突变，第29位：第5、10代为缬氨酸一第125代为丙氨酸;第32位：第5、125代为丝氨酸，第10代为甘氨酸;第196位：第5、10代为谷氨酰胺→第125代为精氨酸。研究表明，低代次毒株能够完全复制出典型的“猪高热综合征”，而高代次毒株无明显临床症状，证明该毒株经细胞传代后毒力下降。鉴于高代次毒株感染动物仍能够引起毒血症和持续感染，表明其仍具一定毒力，作为疫苗种毒需要进一步毒力弱化。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株代次水平毒力分析

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应用定量RT-PCR检验猪瘟兔化弱毒疫苗

应用定量RT-PCR检验猪瘟兔化弱毒疫苗

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：韩文王楠张兴娟葛叶韩秋颖孙元李素仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

前期的研究表明猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR与兔体定型热试验之间存在正相关性，本研究利用荧光定量RT-PcR方法对278批次猪瘟兔化弱毒疫苗进行检测，分别检测其疫苗含量及牛病毒性腹泻病毒污染情况。结果表明，278批次猪瘟疫苗中有6... 详细信息

前期的研究表明猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR与兔体定型热试验之间存在正相关性，本研究利用荧光定量RT-PcR方法对278批次猪瘟兔化弱毒疫苗进行检测，分别检测其疫苗含量及牛病毒性腹泻病毒污染情况。结果表明，278批次猪瘟疫苗中有66批(24％)疫苗含量达不到规程标准，有42批(15％)疫苗存在牛病毒性腹泻病毒污染;从中抽取6份荧光定量检测疫苗含量较低的疫苗用兔体定型热试验进行验证，两种方法结果吻合。

关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗实时荧光定量RT-PCR 牛病毒性腹泻病毒疫苗质量

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稳定表达猪瘟病毒Npro蛋白PK-1 5细胞系的建立

稳定表达猪瘟病毒Npro蛋白PK-1 5细胞系的建立

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：凌理军李素李永锋杨硕廖亚金孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系，本研究采用PCR方法，以pOKl2／F1-9质粒为模板扩增Npro基因，并引入Flag标签序列，将其连到plRES2-EGFP载体，构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将***转染至PK-15细胞中，利用G418... 详细信息

为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系，本研究采用PCR方法，以pOKl2／F1-9质粒为模板扩增Npro基因，并引入Flag标签序列，将其连到plRES2-EGFP载体，构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将***转染至PK-15细胞中，利用G418加压筛选、纯化得到稳定表达Npro蛋白的细胞系;连续传代30代后，进行RT—PCR、Western blot和激光共聚焦试验，结果表明获得了稳定表达CSFV Npro蛋白的PK—15细胞系。该细胞系可应用于免疫共沉淀与N印蛋白相互作用的宿主蛋白，为进一步研究CSFV N印的功能奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒细胞系蛋白表达基因定位

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猪输血传播病毒流行病学与遗传变异的研究进展

猪输血传播病毒流行病学与遗传变异的研究进展

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：刘建波刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

本文介绍了猪的输血传播病毒(Torque teno virus，TTV)的病原学和流行病学研究进展以及对病毒遗传变异分析和诊断技术的研究进展。

关键词：猪输血传播病毒流行病学病原学遗传变异临床诊断

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禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：负炳岭高玉龙王笑梅刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法，以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体，p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心EusA(DAs-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.2... 详细信息

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法，以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体，p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心EusA(DAs-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/ML，且与禽类常见的病毒(IBV，MDV，ILTV等)无交叉反应。动物感染实验结果表明该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的ALV。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品，与PCR方法符合率分别为96.5％和93.8％。结果表明，该方法具有方便、快速、敏感等优点，该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。

关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心酶联免疫吸附测定

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表达V5表位的重组猪圆环病毒2型毒株及其生物学特性鉴定

表达V5表位的重组猪圆环病毒2型毒株及其生物学特性鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：黄立平陆月华危艳武郭龙军吴洪丽张飞雁付玉洁刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为了探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作为表达外源表位的可行性，本研究构建了以PCV2基因组为骨架。在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转染细胞，拯救出一株表... 详细信息

为了探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作为表达外源表位的可行性，本研究构建了以PCV2基因组为骨架。在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转染细胞，拯救出一株表达V5表位标签的重组毒株，命名为recPCV2／CL—V5。采用免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、血清中和试验(SNA)、捕获ELISA及免疫电镜对重组毒株进行了鉴定。结果表明：在recPCV2／CL-V5株感染细胞中检出PCV2和V5表位抗原;PCV2阳性血清和中和性单克隆抗体(1D2)能够完全中和recPCV2／CL-V5株的细胞感染性;recPCV2／CL．V5株在繁殖动力学和形态学上与亲本病毒基本一致。鉴于recPCV2／CL-V5株插入了一个v5表位，采用PCR、IPMA和捕获ELISA与亲本毒株相鉴别。recPCV2／CL-V5株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，毒价可达106.25TCID50、mL。拯救的带有V5表位标签的重组PCV2毒株，为深入研究该病毒复制理、抗原表位展示及分子标记疫苗和鉴别诊断等开创了新的平台。

关键词：猪圆环病毒2型表位生物学特性鉴别诊断

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高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用，澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头，随机分6组．PCV2／HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV／PCV... 详细信息

为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用，澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头，随机分6组．PCV2／HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV／PCV2顺序共感染组、HP-PRRSV+PCV2同时共感染组、HP-PRRSV感染组、PCV2感染组、未接种对照组。感染后每天测量体温、观察临床症状，每周称量体重、采血。用流式细胞仪检测血液中的CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8+、Y δT、NK细胞及粒细胞和单核细胞变化;免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测这两种病毒抗体变化;用ELISA法检测血清中IFN-Y、TNF-α、IL-10、1L-2.,***细胞因子变化;用荧光定量PCR法检测血清和组织中病毒载量。对各组试验猪进行组织病理学观察。试验结果表明，HP-PRRSV／PCV2顺序共感染组临床症状最严重，死亡率达60％;组织和血清中病毒栽量显著高于其它组，抗体滴度明显低于其它组;淋巴细胞亚群及细胞因子(尤以TNF-α)变化也最为明显。临床猪群中-HP-PRRSV和PCV2普遍存在共感染，猪群感染HP-PRRSV后再感染PCV2，可明显提高猪群发病率和死亡率。本研究对临床HP-PRRSV和PCV2的综合防制提供科学依据。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型共感染协同致病性

来源：评论

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2010-2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施

2010-2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施

引用

第六届南京农业大学畜牧兽医学术年会——猪禽疫病综合防控研讨会

作者：陈建飞刘孝珍时洪艳仇华吉刘长明冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本文介绍了2010-2011年仔猪腹泻的疫情特征，分析了该疫情的病因及危害和对猪肉价格波动的影响，并提出了相应防控措施。

关键词：仔猪腹泻病因分析防控措施

来源：评论

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