检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2010年第9期32卷 659-663页

作者：邓小芸祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷高立王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江畜牧兽医职业学院黑龙江双城150111

为建立网状内皮组织增生病病毒(REV)的反向遗传操作系统,本研究分别以6个含有连续并且部分重叠的REV HLJR0901株基因组片段的重组质粒为模板,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)和酶切拼接将HLJR0901的全基因组克隆于pBluescriptⅡ载体中,并在基... 详细信息

为建立网状内皮组织增生病病毒(REV)的反向遗传操作系统,本研究分别以6个含有连续并且部分重叠的REV HLJR0901株基因组片段的重组质粒为模板,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)和酶切拼接将HLJR0901的全基因组克隆于pBluescriptⅡ载体中,并在基因组中通过改变核苷酸(C2250G)消除了其中的MscⅠ酶切位点作为分子标签,构建了REV感染性分子克隆pBlu-mHLJR0901。测序结果表明,REV HLJR0901株前病毒DNA全长为8284bp。将pBlu-mHLJR0901转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒拯救,间接免疫荧光、PCR、测序及电镜观察表明拯救出REV。其拯救的REV在CEF细胞上具有与亲本毒相似的复制特性。该反向遗传操作系统的建立为REV的深入研究提供了有效的技术操作平台。

关键词：网状内皮组织增生病感染性分子克隆病毒拯救

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牛呼吸道合胞体病毒研究进展

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中国奶牛 2010年第9期 1-4页

作者：冯军科薛飞朱远茂任宪刚史鸿飞高欲燃中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室哈尔滨150001

牛呼吸道合胞体病毒（bovine respiratory syncytial virus,BRSV）是引起犊牛呼吸道疾病的主要病原之一。本病早在1968年就有记载,1970年BRSV首次从患有呼吸道疾病的牛体中分离到[1]。其危害性在于BRSV感染发病率很高,达到60%～80%,死... 详细信息

牛呼吸道合胞体病毒（bovine respiratory syncytial virus,BRSV）是引起犊牛呼吸道疾病的主要病原之一。本病早在1968年就有记载,1970年BRSV首次从患有呼吸道疾病的牛体中分离到[1]。其危害性在于BRSV感染发病率很高,达到60%～80%,死亡率在一些爆发中也能达到20%以上[2,3]。本病多发于秋冬季节,

关键词：牛呼吸道合胞体病毒呼吸道疾病 virus 秋冬季节发病率死亡率病原犊牛

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猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

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畜牧兽医科技信息 2010年第9期26卷 29-30页

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平吴洪丽张朝霞温士刚姜凤娟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室哈尔滨150001

猪圆环病毒2型（PCV2）感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎... 详细信息

猪圆环病毒2型（PCV2）感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等症状,统称为猪圆环病毒病。

关键词：猪圆环病毒2型断奶仔猪多系统衰竭综合征灭活疫苗猪呼吸道疾病综合征淋巴结肿大应用母猪繁殖障碍猪圆环病毒病

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禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展

引用

动物医学进展 2010年第9期31卷 93-96页

作者：邓小芸祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江畜牧兽医职业学院黑龙江双城150111

禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,AL... 详细信息

禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,ALV-J)几种免疫抑制性病毒的混合感染在我国部分养鸡场中均普遍存在,使得鸡群处于免疫力低下的状态,导致禽流感、新城疫等重要疫苗免疫失败,并容易造成继发感染,使疫病的诊断和防控难度加大。另外,REV可以整合到MDV和鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)基因组中,从而导致商品化疫苗受到污染,并可用做将外源基因插入到鸡和哺乳动物细胞内的表达载体;基于REV传统检测方法的基础上,新型的分子生物学检测技术如PCR、实时荧光PCR、LAMP提高了诊断REV的敏感性和特异性。

关键词：禽网状内皮组织增生症流行感染基因重组检测技术

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牛病毒性腹泻病毒重组E2蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

牛病毒性腹泻病毒重组E2蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：高欲燃朱远茂史鸿飞任宪刚冯军科于作薛飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白兔源多克隆抗体,利用已有的表达E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化表达菌BL21(DE3),经培养诱导表达出重组E2蛋白,western blot显示纯化的重组E2蛋白能够与BVDV阳性血清反应。用纯化的重组E2蛋白免... 详细信息

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白兔源多克隆抗体,利用已有的表达E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化表达菌BL21(DE3),经培养诱导表达出重组E2蛋白,western blot显示纯化的重组E2蛋白能够与BVDV阳性血清反应。用纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔制备了多克隆抗体,病毒中和试验测定其中和抗体效价为1:2 048,间接免疫荧光和免疫印迹试验证实其具有良好的反应性和特异性。本研究所制备的BVDV重组E2蛋白兔源多克隆抗体可应用于国内BVDV的检测,同时为进一步建立检测BVDV E2蛋白的ELISA诊断方法奠定了基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白表达多克隆抗体

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牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白单抗的制备及鉴定

牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白单抗的制备及鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：于作朱远茂高欲燃董秀梅吕闯薛飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室

为了制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究根据GenBank登录的IBRV gE基因序列设计一对特异性引物,扩增出长350 bp的gE基因片段,定向克隆到pET-32a(+)表达载体中,然后转化BL21表达菌,经过IPTG诱导表达,获得了... 详细信息

为了制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究根据GenBank登录的IBRV gE基因序列设计一对特异性引物,扩增出长350 bp的gE基因片段,定向克隆到pET-32a(+)表达载体中,然后转化BL21表达菌,经过IPTG诱导表达,获得了可溶性重组gE蛋白。利用Ni柱亲和层析法纯化重组gE蛋白,免疫印迹试验检测证明其具有良好的抗原性和特异性。以纯化的gE蛋白为免疫原,免疫6周龄～8周龄Balb/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,利用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,并对其生物学特性进行研究。结果共获得2株能稳定分泌抗gE MAb的杂交瘤细胞,将其命名为1E4和3F11。间接免疫荧光试验表明,2株单抗均可与IBRV/gE+株发生特异性的反应,与IBRV/gE-株不反应。这些MAb的研制为IBRV gE缺失标记疫苗株和自然感染株的鉴别诊断提供了物质基础。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gE基因单克隆抗体

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表达FMDV Asia 1 VP1基因重组BHV-1的构建

表达FMDV Asia 1 VP1基因重组BHV-1的构建

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：朱远茂高欲燃于作董秀梅吕闯薛飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室

为了构建表达FMDV Asia1（Asia1 IND 49197）VP1重组BHV-1,首先人工合VP1全基因并引入限制性内切酶XabⅠ和KpnⅠ,通过酶切连接等生物学方法用VP1基因替换本实验室前期构建好的转移载体pGEMT-gE-/LacZLacZ基因,从而构建获得含有巨细胞病... 详细信息

为了构建表达FMDV Asia1（Asia1 IND 49197）VP1重组BHV-1,首先人工合VP1全基因并引入限制性内切酶XabⅠ和KpnⅠ,通过酶切连接等生物学方法用VP1基因替换本实验室前期构建好的转移载体pGEMT-gE-/LacZLacZ基因,从而构建获得含有巨细胞病毒（Cytomegalovirus,CMV）早期启动子和BGH PolyA调节信号及VP1的完整表达盒同时含有BHV-1同源重组上下游臂的转移载体。采用磷酸钙介导转染法将该转移载体与前期获得的gE基因缺失并表达LacZ基因的重组病毒rBHV-1/gE-/LacZ基因组DNA共转染牛鼻甲细胞,采通过反向病毒蚀斑筛选,获得表达VP1基因的重组病毒rBHV-1/gE-/AsiaVP1。PCR鉴定结果表明VP1基因成功重组到rBHV-1/gE-/AsiaVP1基因组中,间接免疫荧光试验和Western blot证实VP1基因在rBHV-1/gE-/AsiaVP1感染的细胞中获得了表达。在MDBK细胞中连续传25代,PCR鉴定结果表明VP1基因在rBHV-1/gE-/AsiaVP1中稳定存在。rBHV-1/gE-/AsiaVP1与亲本病毒rBHV-1/gE-/LacZ的TCID测定结果分别是10/mL、10/mL,表明他们之间的增殖能力相似。

关键词：口蹄疫病毒 VP1基因牛疱疹病毒1型

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鸡传染性喉气管炎及其防治

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兽医导刊 2010年第2期 31-32,63页

作者：赵妍石星明王云峰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

鸡传染性喉气管炎（ILT）是由鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。其特征是呼吸困难，咳嗽和咳出血样渗出物或黄色干酪样假膜，剖检可见喉头、气管黏膜肿胀、大面积出血，最终糜烂、坏死。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒防治呼吸道传染病呼吸困难接触性渗出物黏膜血样

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猪圆环病毒2型感染引起相关疾病的诊断技术

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兽医导刊 2010年第7期 24-27页

作者：黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

1991年,加拿大首次报道了一种新的称为断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的病症,该病可发生于健康状况良好的猪场,以5～12周龄的猪发病率较高,临床主要表现为生长迟缓、进行性消瘦、呼吸困难、贫血、黄疸和腹泻等。急性暴发猪群的死亡... 详细信息

1991年,加拿大首次报道了一种新的称为断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的病症,该病可发生于健康状况良好的猪场,以5～12周龄的猪发病率较高,临床主要表现为生长迟缓、进行性消瘦、呼吸困难、贫血、黄疸和腹泻等。急性暴发猪群的死亡率可达10％，个别情况可高达50％，经病原学证明由PCV2感染所致。PCV2不但是PMWS的主要病原，而且还与其他几种病症有关系，

关键词：猪圆环病毒2型诊断技术相关疾病断奶仔猪多系统衰竭综合征感染 PCV2 健康状况生长迟缓

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猪流行性腹泻疫苗的研究

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猪业科学 2010年第12期27卷 50-51页

作者：陈建飞冯力时洪艳崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是由尼多目（Nidovirales）、冠状病毒科（Comnaviridae）、冠状病毒属（Coronavirus）α-冠状病毒中的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的猪的一种急性、高度传染性的肠道疾病，该病以急性肠炎、呕吐、水样腹泻和脱水为主要特征。各种日龄的猪均易感，尤其是哺育仔猪，发病率高达100％，死亡率为30％～80％。

关键词：猪流行性腹泻病毒冠状病毒科疫苗急性肠炎冠状病毒属 virus 肠道疾病水样腹泻

来源：评论

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