检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘建波郭龙军危艳武黄立平吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室哈尔滨 150001

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况，采用PCR法对来自14个省份280份送检病料进行了检测，TTV1与TTV2阳性检出率分别为51.8％和28.2％，TTV1和TTV2混合感染阳性检出率为18.2％;PCV1与PCV2阳性检出率分别... 详细信息

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况，采用PCR法对来自14个省份280份送检病料进行了检测，TTV1与TTV2阳性检出率分别为51.8％和28.2％，TTV1和TTV2混合感染阳性检出率为18.2％;PCV1与PCV2阳性检出率分别为41.1％和37.5％，PCV1和PCV2混合感染阳性检出率为19.6％：PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达到75.0％。此外，对2株TTV1基因组克隆测序，与GenBank下载的6个TTV1序列比对，其相似性为67.3％～95.1％;对4株TTV2基因组克隆测序，与GenBank下载的4条TTV2序列比对，其相似性为84.7％～90.4％：TTV1与TTV2之间序列比对，其相似性仅为44.0％。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520nt～2594nt和720nt～2170nt之间;TTV1基因保守区位于1～520m和2595nt～2800m;TTV2基因保守区位于1～719nt和217Int～2800nt。表明我国猪群中有TTV与PCV混合感染存在，这两种病毒混合感染引起相关疾病可能存在一定依存度;TTV1和TTV2基因型变异幅度较大，具有遗传变异多样性特点。

关键词： TTV PCV 混合感染遗传变异分析

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猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定

猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郭龙军陆月华黄立平危艳武刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原，其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白，起保护性抗原作用，对其进行抗原表位鉴定十分必要。本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原，其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白，起保护性抗原作用，对其进行抗原表位鉴定十分必要。本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单克隆抗体，通过原核表达系统对ORF2基因进行了截短表达，先行对Cap蛋白抗原表位进行宽幅定位，然后利用合成多肽对Cap抗原表位做精确扫描定位。5株单抗中有4株针对同一抗原表位，坐落在Cap蛋白N末端核定位信号区，经多肽扫描证实，核心序列为26RPWLVHPRHRY36：另1株单抗(1D2)仅与重组Cap蛋白产生免疫活性反应，对4个分段截短表达的Cap蛋白无免疫活性反应，鉴于该单抗具有中和病毒活性，针对的可能是构象表位。本研究首次鉴定出位于Cap蛋白核定位信号区的一个抗原表位，为以后Cap蛋白功能及核定位机理的研究奠定基础。

关键词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白抗原表位多肽扫描核定位信号

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猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救病毒的体外生物学特性研究

猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救病毒的体外...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究黑龙江哈尔滨 150001

环病毒2型(PCV2)感染引起的相关疾病日益严重，流行毒株基因不断发生变异，根据病毒基因组差异分为PCV2a、PCV2b和PCV2c 3个基因型，还有PCV2d基因型新报道，这些不同基因型PCV2毒株的致病性差异有待阐明。采用感染性克隆技术构建了不...

环病毒2型(PCV2)感染引起的相关疾病日益严重，流行毒株基因不断发生变异，根据病毒基因组差异分为PCV2a、PCV2b和PCV2c 3个基因型，还有PCV2d基因型新报道，这些不同基因型PCV2毒株的致病性差异有待阐明。采用感染性克隆技术构建了不同基因型代表性毒株，对拯救的毒株进行体外生物学特性试验。本研究构建了4个不同基因型的PCV2感染性分子克隆，经转化细胞后拯救4个克隆毒株，经核酸序列分析、病毒形态学观察、免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)等证实属于不同基因型的PCV2毒株;拯救的毒株均通过细胞连续传10代，病毒增殖能力稳定，毒价均可达到105.0 TCID50/mL;用具有中和病毒活性的单克隆抗体(1D2株)进行抗原捕获ELISA检测，拯救的PCV2a/rCL毒株与该单抗产生特异性反应，另3个克隆毒株(PCV2b/rYJ、rYJ和PCV2d/rBDH)与该单抗均无反应，表明它们属于不同基因型代表毒株。这表明我国猪群中PCV2流行毒株存在不同基因型，其病毒抗原特性各异，构建和拯救了4个代表不同基因型PCV2克隆毒株，为进一步研究其致病性差异奠定了基础。

关键词：

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MDV-1编码miRNA的研究进展

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畜牧兽医科技信息 2010年第11期26卷 9-10页

作者：杨文闯刘芳萍刘长军东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室哈尔滨150001

miRNA是具有19～25nt长度的内源性非编码RNA,它通过与mRNA的3'非转录区域(3'-UTR)结合而影响蛋白质的合成,从而达到调控基因的作用。马立克氏病病毒(MDV)是一种可以导致禽类产生肿瘤性疾病的疱疹病毒,而miRNA作为基因转录后调... 详细信息

miRNA是具有19～25nt长度的内源性非编码RNA,它通过与mRNA的3'非转录区域(3'-UTR)结合而影响蛋白质的合成,从而达到调控基因的作用。马立克氏病病毒(MDV)是一种可以导致禽类产生肿瘤性疾病的疱疹病毒,而miRNA作为基因转录后调控因子可以影响肿瘤形成过程。文章从MDV-1编码miRNA所处的位置,它们所作用的靶基因及监测它们在感染MDV的组织和细胞中的表达水平三方面阐明了miRNA与MDV-1的致瘤性有着重要的关系。

关键词： miRNA 马立克氏病病毒致瘤性

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猪圆环病毒2型感染引起相关疾病诊断技术的研究进展

猪圆环病毒2型感染引起相关疾病诊断技术的研究进展

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@由于PCV2引起的疾病类似于其它病原引起的症状，而且多病原的混合感染，为疾病的诊断带来困难，因此必须要有系统诊断的思路:根据流行病学资料、临床表现和组织病理变化作出初步诊断，再结合实验室技术来确诊，还要进行多病原的检测... 详细信息

@@由于PCV2引起的疾病类似于其它病原引起的症状，而且多病原的混合感染，为疾病的诊断带来困难，因此必须要有系统诊断的思路:根据流行病学资料、临床表现和组织病理变化作出初步诊断，再结合实验室技术来确诊，还要进行多病原的检测，而不仅仅是单一病原的检测。

关键词：猪圆环病毒2型病毒感染疾病诊断

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：危艳武刘长明范培虎吴洪丽温士刚陆月华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株，经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株，命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化，用PRRSB-HBR株第125代培养物，毒价为107.5 TCID50... 详细信息

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株，经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株，命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化，用PRRSB-HBR株第125代培养物，毒价为107.5 TCID50/mL，经肌肉注射和滴鼻途径接种35日龄健康试验猪18头，同设3头未接种病毒作为空白对照组。病毒接种后试验猪未出现明显体温上高、食欲下降、精神萎靡、消瘦.眼睑水肿、体表淋巴结肿大等症状;接种后第3d检测到病毒血症，7d～14d达到高峰，28d后转为阴性。不同时间迫杀试验猪检测各脏器病毒抗原结果表明，接种后1w～2w感染猪多数组织呈阳性反应，3w～6w病毒集中在脾、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结等。病理切片观察到，接种后1w～2w感染猪存在轻度显微病变。用第125代细胞毒感染猪后，尽管在临床上未显示明显症状，但病毒感染后毒血症、脏器病毒抗原分布、病理学观察等指标仍显示存在一定毒力，用于活疫苗研制仍有待进一步驯化致弱。

关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒变异毒株细胞传代毒致病性

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检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：黄立平刘长明危艳武陆月华郭龙军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

利用抗PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种阻断ELISA方法，用于检测猪血清中PCV2中和抗体.该方法将PCV2多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原，以辣根过氧化物酶标记的单抗为指示抗体，通过测定该酶标单抗显示阻断ELISA检测结... 详细信息

利用抗PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种阻断ELISA方法，用于检测猪血清中PCV2中和抗体. 该方法将PCV2多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原，以辣根过氧化物酶标记的单抗为指示抗体，通过测定该酶标单抗显示阻断ELISA检测结果。该方法与免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)对353份试验猪血清样品进行了平行检测，两种方法检测符合率为96.0％，与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。阻断ELISA与血清中和试验检测结果呈显著正相关性(r=0.9970)。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品检测结果显示，疫苗接种2周开始能够检测到PCV2中和抗体，4周后阳转率达100％;此外，对东北3省不同地区送检的703份血清样品进行检测，阳性检出率为73.4％。本研究建立的阻断ELISA具有操作简便、特异和敏感等特点，可为PCV2血清学流行病学调查及疫苗免疫评价提供了一种有效技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型抗体检测单克隆抗体阻断ELISA

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猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平吴洪丽张朝霞温士刚姜凤娟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病，临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮... 详细信息

@@猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病，临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等症状，统称为猪圆环病毒病。

关键词：猪圆环病毒2型灭活疫苗疫苗研制

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带BAC质粒的重组伪狂犬病毒的构建及其体外生长特性研究

带BAC质粒的重组伪狂犬病毒的构建及其体外生长特性研究

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新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会

作者：彭金美王瑜田志军周艳君陈瑾安同庆童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室华中农业大学中国农业科学院上海兽医研究所

本研究通过基因克隆技术以PRV弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源臂,以及绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,然后将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载体pUCTK-EGFP-BA... 详细信息

本研究通过基因克隆技术以PRV弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源臂,以及绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,然后将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载体pUCTK-EGFP-BACII。将PRV基因组和转移载体共转染Vero细胞,利用同源重组在Bartha K61株的TK基因中插入了BAC质粒和绿色荧光蛋白筛选标记,经过11轮噬斑纯化和鉴定证实获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC。通过噬斑试验和一步生长曲线测定等方法对重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC的生长特性进行研究,结果发现带有BAC质粒及筛选标记的重组病毒rv-PRVBAC在体外细胞培养中的增殖速度与亲本毒BarthaK61株相比没有明显差别,说明大的基因片段的插入没有影响重组病毒在体外的繁殖速度。重组病毒rv-PRVBAC在Vero细胞上盲传18代,绿色荧光蛋白仍能够稳定表达,通过PCR鉴定可以检测到插入的外源片段和插入位点两侧的病毒基因序列,表明所获得的重组病毒rv-PRVBAC得到了稳定遗传。本研究成功获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC,为进一步开展PRV的细菌人工染色体的构建奠定了基础。

关键词：伪狂犬病毒 Bartha K61 strain BAC 重组病毒

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鸭β-防御素9单克隆抗体的制备和鉴定

鸭β-防御素9单克隆抗体的制备和鉴定

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低碳经济与高效养殖——第六次全国饲料营养学术研讨会暨动物营养学分会成立三十周年大会

作者：李子瑞邵昱昊韩宗玺刘晓丽刘胜旺马得莹东北农业大学动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

禽抗菌肽属β-防御素类,为防御素三大亚类(α、β、θ)之一,在禽的先天性免疫和获得性免疫中均发挥重要作用。目前为止,禽β-防御素的研究与检测还仅停留在转录水平上,检测的灵敏度和准确性都不是很高,而且检测手段也相当繁琐。因此,需... 详细信息

禽抗菌肽属β-防御素类,为防御素三大亚类(α、β、θ)之一,在禽的先天性免疫和获得性免疫中均发挥重要作用。目前为止,禽β-防御素的研究与检测还仅停留在转录水平上,检测的灵敏度和准确性都不是很高,而且检测手段也相当繁琐。因此,需要寻找一种灵敏度高,准确性好,特异性强的检测方法。单克隆抗体的制备无疑是最好的选择。而关于鸭AvBD9蛋白的单抗制备国内外尚未见到报道。本研究首先<正>禽抗菌肽属β-防御素类,为防御素三大亚类(α、β、θ)之一,在禽的先天性免疫和获得性免疫中均发挥重要作用。目前为止,禽β-防御素的研究与检测还仅停留在转录水平上,检测的灵敏度和准确性都不是很高,而且检测手段也相当繁琐。因此,需要寻找一种灵敏度高,准确性好,特异性强的检测方法。单克隆抗体的制备无疑是最好的选择。而关于鸭AvBD9蛋白的单抗制备国内外尚未见到报道。本研究首先

关键词：鸭抗菌肽重组鸭β-防御素9蛋白单克隆抗体

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