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低碳经济与高效养殖——第六次全国饲料营养学术研讨会暨动物营养学分会成立三十周年大会

作者：周财源蔺丽娟韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹东北农业大学动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

抗菌肽是一类广泛存在于动物体内的小分子活性肽,具有广谱抗菌活性。至今为止,未见有关于抗菌肽的毒副作用、残留、致细菌耐药性等方面的报道。因此,抗菌肽在养殖业方面具有广阔的应用前景。禽抗菌肽属于β-防御素类,在禽的防御系统中... 详细信息

抗菌肽是一类广泛存在于动物体内的小分子活性肽,具有广谱抗菌活性。至今为止,未见有关于抗菌肽的毒副作用、残留、致细菌耐药性等方面的报道。因此,抗菌肽在养殖业方面具有广阔的应用前景。禽抗菌肽属于β-防御素类,在禽的防御系统中发挥着重要的作用。目前,已在鸡、火鸡、鸭、企鹅等体内发<正>抗菌肽是一类广泛存在于动物体内的小分子活性肽,具有广谱抗菌活性。至今为止,未见有关于抗菌肽的毒副作用、残留、致细菌耐药性等方面的报道。因此,抗菌肽在养殖业方面具有广阔的应用前景。禽抗菌肽属于β-防御素类,在禽的防御系统中发挥着重要的作用。目前,已在鸡、火鸡、鸭、企鹅等体内发

关键词：鹅β-防御素5 重组蛋白抗菌活性

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卵巢存放温度及时间对雪龙黑牛卵母细胞成熟及囊胚发育的影响

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黑龙江畜牧兽医 2010年第4期 69-71页

作者：许红喜邢雪森吴蒙王秀利仇雪梅崔玉东李曦大连雪龙产业集团股份有限公司辽宁大连116001 大连水产学院辽宁大连116001 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了保存优良品种,加快优良品种的繁育进程,试验将雪龙黑牛卵巢分别于38.5,32,4℃3个不同温度放置4,8,12,24,48h观察卵母细胞成熟率、卵裂率及囊胚发育率。结果表明:雪龙黑牛卵巢在≤8h的运输途中可以于4～38.5℃下存放,≥12h的运输时间... 详细信息

为了保存优良品种,加快优良品种的繁育进程,试验将雪龙黑牛卵巢分别于38.5,32,4℃3个不同温度放置4,8,12,24,48h观察卵母细胞成熟率、卵裂率及囊胚发育率。结果表明:雪龙黑牛卵巢在≤8h的运输途中可以于4～38.5℃下存放,≥12h的运输时间,则仅能于4℃下存储,若≥48h,雪龙黑牛卵巢卵裂率及囊胚发育率极低,即停止发育。

关键词：卵母细胞卵裂率囊胚发育率雪龙黑牛

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多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立

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养猪 2010年第3期 41-44页

作者：岳丰雄崔尚金冉多良戚亭周盛华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-... 详细信息

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。

关键词：多重PCR方法猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒

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鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究

鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究

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低碳经济与高效养殖——第六次全国饲料营养学术研讨会暨动物营养学分会成立三十周年大会

作者：王瑞琴蔺丽娟周财源韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹东北农业大学动科院动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的氨基酸残基,4个带负电... 详细信息

本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的氨基酸残基,4个带负电荷的氨基酸残基。其分子量为7273.55,等电点pI为8.29。根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素9的氨基酸序列构建系统进化树,经分析<正>本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的氨基酸残基,4个带负电荷的氨基酸残基。其分子量为7273.55,等电点pI为8.29。根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素9的氨基酸序列构建系统进化树,经分析

关键词：鹌鹑 β-防御素组织分布重组蛋白抗菌活性

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鹌鹑β-防御素10基因的克隆及其生物学作用的初步研究

鹌鹑β-防御素10基因的克隆及其生物学作用的初步研究

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低碳经济与高效养殖——第六次全国饲料营养学术研讨会暨动物营养学分会成立三十周年大会

作者：蔺丽娟王瑞琴周财源韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹东北农业大学动科院动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10(AvBD10)的氨基酸序列同源性... 详细信息

本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10(AvBD10)的氨基酸序列同源性最高,达83.8%。我们将其命名为鹌鹑AvBD10。<正>本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10(AvBD10)的氨基酸序列同源性最高,达83.8%。我们将其命名为鹌鹑AvBD10。

关键词：鹌鹑AvBD10 重组蛋白抗菌活性

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猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白抑制MG132诱导的细胞凋亡作用

猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白抑制MG132诱导的细胞凋亡作用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：唐青海张彦明郭抗抗何雷范丽仝刚代晨西北农林科技大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为研究猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白对宿主细胞凋亡的影响,本研分别将CSFV NS2基因和E2基因与GFP在猪血管内皮细胞中进行融合表达,以MG132为细胞凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并采用流式细胞仪和Hoechst33342染色方法检测细胞凋亡率。结果表明,MG13... 详细信息

为研究猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白对宿主细胞凋亡的影响,本研分别将CSFV NS2基因和E2基因与GFP在猪血管内皮细胞中进行融合表达,以MG132为细胞凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并采用流式细胞仪和Hoechst33342染色方法检测细胞凋亡率。结果表明,MG132能够诱导正常猪血管内皮细胞及稳定表达CSFV E2蛋白和GFP蛋白的细胞株的凋亡,而且,凋亡率呈MG132剂量依赖性增加。而稳定表达CSFV NS2蛋白的细胞株能够对抗MG132诱导的细胞凋亡。深入的研究还显示,表达CSFV NS2蛋白的细胞株能够对抗MG132对宿主细胞NF-κB活性的抑制作用,而且,表达NS2蛋白细胞中的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量比照组细胞增加了48倍～51倍。该研究表明,CSFV NS2蛋白在抑制宿主细胞凋亡中发挥重要作用。

关键词：猪瘟病毒 NS2蛋白 MG132 凋亡 Bcl-2

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猪瘟病毒NS2蛋白的亚细胞定位及其对细胞增殖和周期的调节作用

猪瘟病毒NS2蛋白的亚细胞定位及其对细胞增殖和周期的调节作用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：唐青海张彦明范丽仝刚何雷代晨西北农林科技大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为了探明猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白的亚细胞定位特征及其对宿主细胞增殖与周期的影响,本研究采用RT-PCR方法扩增CSFV NS2基因,采用激光共聚焦技术研究了CSFV NS2蛋白的亚细胞定位特征;采用MTS方法和流式细胞仪分析了细胞的增殖活性和细胞... 详细信息

为了探明猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白的亚细胞定位特征及其对宿主细胞增殖与周期的影响,本研究采用RT-PCR方法扩增CSFV NS2基因,采用激光共聚焦技术研究了CSFV NS2蛋白的亚细胞定位特征;采用MTS方法和流式细胞仪分析了细胞的增殖活性和细胞周期。结果表明:CSFV NS2蛋白质的分子质量约为53 ku,该蛋白定位于细胞内质网上并诱导宿主细胞内质网应激反应,激活核转录因子NF-κB,促进CyclinA蛋白被蛋白酶体所快速降解,进一步引起细胞周期阻滞于S期,最终抑制宿主细胞的增殖活性,但并不诱导细胞凋亡。本研究首次探明了CSFV NS2蛋白的亚细胞定位特点及该蛋白调节细胞周期与增殖的分子机制,为揭示CSFV致病的分子机制提供了科学依据。

关键词：猪瘟病毒 NS2蛋白亚细胞定位增殖周期

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新城疫病毒F48E9株NP蛋白单克隆抗体制备

新城疫病毒F48E9株NP蛋白单克隆抗体制备

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

作者：刘文丽刘怀然刘培欣孔宪刚陈维多中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室东北农业大学生命科学学院

【目的】制备针对新城疫病毒F48E9株单克隆抗体,以用于NDV抗原变异研究及检测方法建立。【方法】用新城疫病毒F48E9株全病毒及原核表达的重组F48E9-NP蛋白免疫BALB/e小鼠,全病毒间接ELISA筛选杂交瘤细胞株。用免疫印迹和间接免疫荧光试... 详细信息

【目的】制备针对新城疫病毒F48E9株单克隆抗体,以用于NDV抗原变异研究及检测方法建立。【方法】用新城疫病毒F48E9株全病毒及原核表达的重组F48E9-NP蛋白免疫BALB/e小鼠,全病毒间接ELISA筛选杂交瘤细胞株。用免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定单抗反应原性,间接ELISA试验鉴定单抗与其他NDV毒株的交叉反应,并采用NP蛋白分段融合表达技术对单抗识别区域初步定位。【结果】共筛选到3株单抗杂交瘤细胞株3E7、2D11和4B12,免疫印迹和间接免疫荧光试验分析表明,3株单抗均针对病毒NP蛋白的线性表位;单抗3E7、4B12与基因I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅸ、Ⅶ型共11株NDV均有反应性,单抗2D11仅与基因Ⅶ型中QY97、Mallard/CH/HLJ001/06和基因Ⅲ型中Mutkaswar株反应。单抗2D11识别NP基因开放阅读框C端的1303-1413处(37个aa);单抗3E7、4B12识别NP基因ORF C端的1372-1470处(共33个aa)。【结论】获得了针对NDVF48E9株NP蛋白的3株识别线性表位单抗,将在NDV抗原变异研究及检测方法建立方面进行应用。

关键词：新城疫病毒 F48E9 NP蛋白单克隆抗体

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牛病毒性腹泻病毒1型、猪瘟病毒野毒株和猪瘟病毒疫苗株多重SYBR Green-1实时荧光PCR方法的建立

牛病毒性腹泻病毒1型、猪瘟病毒野毒株和猪瘟病毒疫苗株多重SYBR ...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：王伟符芳陈欣李雪松郎越坤田华彬张兴娟李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨 150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨 150001

立可同时检测牛病毒性腹泻病毒-1型(BVDV-1)、猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与CSFV野毒株的快速检测方法。根据GenBank中登录的上述3种病毒的全基因组序列，设计3对特异性多重引物，建立了同时检测BVDV-1、C株和CSFV野毒株的多重SYBR...

立可同时检测牛病毒性腹泻病毒-1型(BVDV-1)、猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与CSFV野毒株的快速检测方法。根据GenBank中登录的上述3种病毒的全基因组序列，设计3对特异性多重引物，建立了同时检测BVDV-1、C株和CSFV野毒株的多重SYBR Green-I实时荧光PCR方法。敏感性试验结果表明，本方法能检测到3种病毒的最低病毒含量均为100拷贝/μL;特异性实验结果表明，猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PrV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、乙型脑炎病毒(JEV)，均呈阴性;通过批内及批间的重复试验，其变异系数<1％。该方法具有很强的特异性、很高的灵敏度、很好的重复性。

关键词：

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猪细小病毒病国内流行状况以及防治策略

猪细小病毒病国内流行状况以及防治策略

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：蔺文成胡峰任梅崔玉东钱爱东崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江八一农垦大学动物科技学院吉林农业大学

猪细小病毒病是由猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)引起的一种繁殖障碍疾病,与猪渗出性皮炎、断奶仔猪多系统衰弱综合征等疾病有关,对妊娠母猪与仔猪具有极大的威胁,常给养殖业造成巨大经济损失。

关键词：猪细小病毒病 PPV 混合感染新生仔猪生物技术学间接免疫荧光技术防治策略猪瘟病毒弱毒苗流行状况

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