检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：孙东波冯力陈建飞时洪艳佟有恩刘胜旺陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

以猪流行性腹泻病毒CH/JL毒株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得的3个相互重叠的cDNA克隆覆盖了S基因,序列比对结果表明:PEDV CH/JL株S基因与CV777、Brl/87、JS、KPEDV和Chinju99毒株S基因核苷酸序列的同源性分别为96～97%、96～87%、96～... 详细信息

以猪流行性腹泻病毒CH/JL毒株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得的3个相互重叠的cDNA克隆覆盖了S基因,序列比对结果表明:PEDV CH/JL株S基因与CV777、Brl/87、JS、KPEDV和Chinju99毒株S基因核苷酸序列的同源性分别为96～97%、96～87%、96～41%、94～02%和93～93%,氨基酸序列的同源性分别为96.17%、95.88%、96.10%、92.36%和92.05%;分子进化树分析结果显示,PEDV CH/JL株S基因与JS毒株S基因亲缘关系最近,处于同一群。利用DNAstar Protean程序预测了PEDV CH/JL株S蛋白一个抗原表位区(83～276aa),将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1后转化*** BL21(DE3)感受态细胞,在终浓度110mmol/L的IPTG诱导下获得了表达,Western blot结果显示,预测的抗原表位区GST融合蛋白能与猪流行性腹泻病毒多克隆抗血清反应,提示该抗原表位区含有线性抗原表位。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因序列分析线性抗原表位区

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪圆环病毒2型分子标记毒株的构建及生物学特性研究

猪圆环病毒2型分子标记毒株的构建及生物学特性研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘长明危艳武张超范谭斌陆月华孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染细胞获得带有遗... 详细信息

以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。采用免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫电镜、核酸序列分析表明,在病毒感染细胞中检出病毒特异抗原,其抗原性、病毒形态学及基因序列与亲本毒株一致。鉴于新病毒基因组内插入一个SalⅠ酶切位点,可用限制性片断长度多态性分析法可与野生型病毒相鉴别。新毒株经细胞连续传80代,体外培养增殖性能稳定,毒价可达107.0TCID50/mL。取第60代病毒培养物经肌肉和滴鼻途径接种35日龄抗体阴性仔猪4头,接种后表现出体温升高、进行性消瘦、被毛粗糙及体表淋巴结肿胀症状,迫杀后多种脏器中均能检测到病毒抗原与核酸。研究表明,利用感染性分子克隆手段构建带有遗传标记的PCV2新毒株,为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、分子诊断等研究奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型遗传标记病毒生物学特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

DNA疫苗免疫增强技术的比较研究

DNA疫苗免疫增强技术的比较研究

引用

第六届全国免疫学学术大会

作者：曾伟伟石星明王云峰王玫黄婷婷高宏博中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

自1990首次发现肌肉注射DNA盐溶液后可自发转染肌细胞以来,DNA免疫已经有了巨大的发展。然而,简单的肌肉注射被认为是一种低效的免疫途径,现已有各种改进方法,其中最常用和最有效的就是电穿孔法和基因枪投递法。然而,这两者都受到条件... 详细信息

自1990首次发现肌肉注射DNA盐溶液后可自发转染肌细胞以来,DNA免疫已经有了巨大的发展。然而,简单的肌肉注射被认为是一种低效的免疫途径,现已有各种改进方法,其中最常用和最有效的就是电穿孔法和基因枪投递法。然而,这两者都受到条件的限制。纹身法是DNA多种免疫方法中一种较为经济实用的方法,改良的纹身机已在医学研究上广泛应

关键词： DNA 抗体水平疫苗免疫比较研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪细小病毒的分子生物学研究

引用

猪业科学 2008年第2期25卷 22-24页

作者：崔尚金戚亭中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病学研究室黑龙江哈尔滨100051

猪细小病毒病是由猪细小病毒（porcine parvovirus，PPV）感染所引起的猪的重要传染病之一。该病的主要特征为受感染的母猪，特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪发生流产、不孕、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等。该病广泛存在于世... 详细信息

猪细小病毒病是由猪细小病毒（porcine parvovirus，PPV）感染所引起的猪的重要传染病之一。该病的主要特征为受感染的母猪，特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪发生流产、不孕、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等。该病广泛存在于世界各地并在大多数猪场呈地方性流行，严重地影响着养猪业的发展，该病的严重危害及该病病原独特的生物学特性受到了国内外许多学者的关注。

关键词：猪细小病毒病分子生物学经产母猪生物学特性初产母猪传染病血清学木乃伊

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

9株鸡马立克氏病毒野毒株在鸭胚成纤维细胞上的培育及鉴定

9株鸡马立克氏病毒野毒株在鸭胚成纤维细胞上的培育及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张艳萍刘长军李晶梅刘爱玲施维松闫福海秦运安中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

2006年～2007年我们从现地暴发鸡马立克氏病(MD)鸡场采集发病鸡羽髓,无菌处理后分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF),蚀斑克隆纯化后,随机选1个单克隆,再接种DEF增殖,获得9株适应DEF生长的鸡马立克氏病毒(MDVs)野毒株,分别命名为ZY、FY、SY、YC... 详细信息

2006年～2007年我们从现地暴发鸡马立克氏病(MD)鸡场采集发病鸡羽髓,无菌处理后分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF),蚀斑克隆纯化后,随机选1个单克隆,再接种DEF增殖,获得9株适应DEF生长的鸡马立克氏病毒(MDVs)野毒株,分别命名为ZY、FY、SY、YC、CZ、MS、CGZ、QQHE和DH株。应用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增这9株的132bp重复序列,发现这9株MDVs基因组的132bp重复序列的拷贝数均为2个拷贝,符合MDVS强毒株的特点。从分离的9株MDVS中选择5株人工感染5日龄白来航SPF鸡,感染鸡60d后剖杀,发病鸡大多可见内脏肿瘤;其中3株MD阳性率达100%。我们培育并鉴定了9株适应DEF生长的MDVs流行野毒株,为监测我国现地MD毒株的变异和评价现有疫苗对MD保护效果提供有价值的研究材料。

关键词：马立克氏病毒培育及鉴定 meq基因 132bp重复序列

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张朝霞刘长明危艳武袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7... 详细信息

利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3%(143/150),特异性为91.2%(31/34),敏感性为96.5%(112/116);与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%～4.8%和8.9%～9.9%;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5周抗体阳转,第8～9周抗体水平达到高峰;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6%。研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型重组蛋白间接ELISA 抗体检测试剂盒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘长明危艳武张超范张朝霞袁婧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了调查免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂,以及赛比克公司提供的MONTANIDETM ISA... 详细信息

以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了调查免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂,以及赛比克公司提供的MONTANIDETM ISA206、ISA15VG、IMS1315VG三种佐剂配制的灭活疫苗进行了猪体免疫试验。通过临床观察、血清抗体效价测定,确认ISA15VG佐剂配制的疫苗在增强免疫效果方面优于其它佐剂。按五种佐剂免疫效果排序为ISA15VG、IMS1315VG、铝胶、ISA206、国产白油。ISA15VG佐剂属于水包油剂型,接种动物可刺激快速免疫应答反应,抗体产生效价高,持续时间长,有可能成为新型PCV2灭活疫苗佐剂的候选。

关键词：猪圆环病毒2型灭活疫苗佐剂比较

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：危艳武刘长明袁婧黄立平张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

根据发表的猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107-101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.9... 详细信息

根据发表的猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107-101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.997,扩增效率E=0.920,对质粒标准品检测下限值为8.2拷贝/μL,检测变异系数低于2.0%;该方法与常规PCR及过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）,其敏感性提高10～3倍以上。用本法对PCV2人工感染猪心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结等组织中病毒核酸载量检测结果表明,多种脏器均可检测到病毒,但以腹股沟淋巴结、扁桃体和脾脏中病毒含量较高,表明病毒主要在免疫器官增殖,导致淋巴细胞耗损。用实时定量PCR对来自国内不同地区的28份临床发病猪病料进行病毒DNA定量检测,有半数以上病例病毒载量持在10拷贝/g数量级.实时定量PCR可用于PCV2核酸定量检测,为该病毒体内外定量检测提供了一种技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型实时定量PCR 病毒体内分布规律

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新城疫流行病学变化及综合防制进展概况

新城疫流行病学变化及综合防制进展概况

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘怀然孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病,被国际动物卫生组织(OIE)列为危害禽类的两种A类传染病之一。尽管世界各国对ND采取了严格的防控措施,如对强

关键词：基因型综合防制新城疫弱毒苗母源抗体疫苗毒紧急免疫接种反向遗传技术流行病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：危艳武刘长明袁婧黄立平张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

根据发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107～101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.997... 详细信息

根据发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107～101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.997,扩增效率E=0.920,对质粒标准品检测下限值为8.2拷贝/μL,检测变异系数低于2.0%;该方法与常规PCR及过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),其敏感性提高103倍以上。用本法对PCV2人工感染猪心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结等组织中病毒核酸载量检测结果表明,多种脏器均可检测到病毒,但以腹股沟淋巴结、扁桃体和脾脏中病毒含量较高,表明病毒主要在免疫器官增殖,导致淋巴细胞耗损。用实时定量PCR对来自国内不同地区的28份临床发病猪病料进行病毒DNA定量检测,有半数以上病例病毒载量持在109～10拷贝/g数量级。实时定量PCR可用于PCV2核酸定量检测,为该病毒体内外定量检测提供了一种技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型实时定量PCR 病毒体内分布规律

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：