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文献类型

457 篇 期刊文献
289 篇 会议

馆藏范围

746 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

706 篇 农学
- 662 篇 兽医学
- 58 篇 作物学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
61 篇 工学
- 54 篇 生物工程
- 7 篇 化学工程与技术
- 1 篇 林业工程
59 篇 理学
- 59 篇 生物学
16 篇 医学
- 7 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 4 篇 临床医学
- 4 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 法学
- 1 篇 政治学

主题

76 篇 猪圆环病毒2型
54 篇 单克隆抗体
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
37 篇 猪瘟病毒
36 篇 原核表达
33 篇 序列分析
28 篇 猪流行性腹泻病毒
27 篇 抗原表位
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
22 篇 新城疫病毒
22 篇 分离鉴定
20 篇 传染性法氏囊病病...
18 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 鉴定
17 篇 猪圆环病毒
14 篇 生物学特性
14 篇 抗体检测试剂盒
13 篇 酵母双杂交

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
150 篇 东北农业大学
112 篇 中国农业科学院哈...
106 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
28 篇 中国农业科学院哈...
24 篇 黑龙江八一农垦大...
24 篇 中国农业科学院上...
19 篇 东北林业大学
18 篇 新疆农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
11 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
10 篇 内蒙古农业大学
8 篇 华南农业大学
8 篇 河北北方学院
8 篇 中国农业科学院哈...
7 篇 延边大学

作者

163 篇 刘长明
140 篇 危艳武
111 篇 王笑梅
108 篇 高玉龙
106 篇 黄立平
94 篇 高宏雷
86 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
78 篇 童光志
73 篇 吴洪丽
68 篇 郭龙军
64 篇 冯力
61 篇 陈建飞
58 篇 秦立廷
58 篇 韩宗玺
58 篇 王云峰
58 篇 仇华吉
57 篇 时洪艳
53 篇 liu sheng-wang
52 篇 崔尚金

语言

746 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物传染病研究室"

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猪IFN-γ、IL-2及GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的研究

猪IFN-γ、IL-2及GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亚单位疫苗...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病原现已在世界各地广泛流行,给养猪业造成巨大经济损失.PCV2 Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能诱导产生PCV2特异性中和抗体和保护性免疫力,是研制PCV2基因工... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病原现已在世界各地广泛流行,给养猪业造成巨大经济损失.PCV2 Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能诱导产生PCV2特异性中和抗体和保护性免疫力,是研制PCV2基因工程疫苗的理想靶抗原.研究表明,IFN-γ、IL-2和GM-CSF等细胞因子佐剂对疫苗具有免疫增强作用,可显著增强疫苗的免疫保护效力.本研究采用细胞因子佐剂与PCV2-Cap蛋白组合的策略来研制预防PCV2感染的新型基因工程亚单位疫苗,目的是验证猪源WN-γ(PoIFN-γ)、IL-2 (PoIL-2)和GM-CSF(PoGM-CSF)这3种细胞因子能否增强PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的免疫效力. 研究表明，用PoIFN-与PCV2-Cap蛋白混合免疫时，PoIFN-能显著增强PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的免疫保护效力，但以Cap-PoIFN-γ融合蛋白免疫时，PoIFN-对PCV2-Cap蛋白无免疫增强作用;用PoIL-2或PoGM-CSF与PCV2-Cap蛋白混合免疫或以Cap-PoGM-CSF融合蛋白免疫时，PoIL-2和PoGM-CSF对PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的抗体应答均无增强作用，但可促进免疫应答向Th1型免疫应答转变，从而增强疫苗的免疫保护效力，然而以Cap-PoIL-2融合蛋白免疫时，PoIL-2对PCV2-Cap蛋白无免疫增强作用。

关键词：对猪圆环病毒2型 Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用

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猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原中和构象表位的研究

猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原中和构象表位的研究

引用

2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：刘建波黄立平危艳武唐青海刘丹王一平李胜斌郭龙军吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

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猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03全长cDNA克隆的构建

猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03全长cDNA克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：吴波平冯力时洪艳陈建飞孙东波高秀春白兴华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学

为构建猪捷申病毒(PTV)感染性克隆,进行病毒基因组结构、功能及新型疫苗研究,根据NCBI发表的PTV Swine/CH/IMH/03株及Talfan株核苷酸序列,设计并合成了4对特异性引物,PCR扩增并克隆覆盖PTV swine/CH/IMH/03全长基因组的4个片段。经过反... 详细信息

为构建猪捷申病毒(PTV)感染性克隆,进行病毒基因组结构、功能及新型疫苗研究,根据NCBI发表的PTV Swine/CH/IMH/03株及Talfan株核苷酸序列,设计并合成了4对特异性引物,PCR扩增并克隆覆盖PTV swine/CH/IMH/03全长基因组的4个片段。经过反复拼接和测序,最终将PTV全长cDNA定向克隆到pBluescriptSK(+)中。PCR、双酶切及测序鉴定证明PTV全长cDNA克隆构建成功。与Swine/CH/IMH/03亲本株及NCBI登录的其他PTV毒株序列比对发现,该克隆只有3个位点存在核苷酸及氨基酸突变,分别位于2A、2C及3D中。

关键词： PTV 全长cDNA克隆感染性克隆

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：危艳武刘长明范培虎吴洪丽温士刚陆月华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株，经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株，命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化，用PRRSB-HBR株第125代培养物，毒价为107.5 TCID50... 详细信息

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株，经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株，命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化，用PRRSB-HBR株第125代培养物，毒价为107.5 TCID50/mL，经肌肉注射和滴鼻途径接种35日龄健康试验猪18头，同设3头未接种病毒作为空白对照组。病毒接种后试验猪未出现明显体温上高、食欲下降、精神萎靡、消瘦.眼睑水肿、体表淋巴结肿大等症状;接种后第3d检测到病毒血症，7d～14d达到高峰，28d后转为阴性。不同时间迫杀试验猪检测各脏器病毒抗原结果表明，接种后1w～2w感染猪多数组织呈阳性反应，3w～6w病毒集中在脾、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结等。病理切片观察到，接种后1w～2w感染猪存在轻度显微病变。用第125代细胞毒感染猪后，尽管在临床上未显示明显症状，但病毒感染后毒血症、脏器病毒抗原分布、病理学观察等指标仍显示存在一定毒力，用于活疫苗研制仍有待进一步驯化致弱。

关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒变异毒株细胞传代毒致病性

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PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定

PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：孙东波朗洪武时洪艳陈建飞崔晓辰王承宝佟有恩冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室中国兽医药品监察所

以猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1bp～2367bp)为靶基因,利用基于gIII表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白对S1基因噬菌... 详细信息

以猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1bp～2367bp)为靶基因,利用基于gIII表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白对S1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选,结果获得3个高亲和力的序列,分别命名为S1P1(248aa～280aa)、S1P2(442aa～499aa)和S1P3(697aa～742aa)。ELISA和Western blot结果显示,S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多克隆血清识别,其中S1P3反应性最强。为了进一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性,3个短肽GST融合蛋白和它们串连后GST融合蛋白的单因子血清被制备,间接免疫荧光试验(IFA)结果证实,抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融合蛋白的单因子血清能够识别Vero细胞培养物中天然的PEDV。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白抗原表位噬菌体展示

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禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：负炳岭高玉龙王笑梅刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法，以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体，p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心EusA(DAs-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.2... 详细信息

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法，以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体，p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心EusA(DAs-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/ML，且与禽类常见的病毒(IBV，MDV，ILTV等)无交叉反应。动物感染实验结果表明该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的ALV。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品，与PCR方法符合率分别为96.5％和93.8％。结果表明，该方法具有方便、快速、敏感等优点，该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。

关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心酶联免疫吸附测定

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β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：贺番凌理军廖亚金李素韩文赵碧波孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道.为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿主... 详细信息

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道.为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿主细胞蛋白-β-actin.通过免疫共沉淀、GST pulldown、激光共聚焦以及双分子荧光互补试验验证了E2蛋白与β-actin的相互作用.利用RNA干扰技术沉默β-actin的表达以及用细胞松弛素D在猪瘟感染后4h破坏感染细胞β-actin蛋白的丝状结构,均能显著降低培养上清中的病毒滴度与RNA拷贝数.综上所述,本研究表明β-actin在病毒复制周期的早期参与猪瘟病毒的生长调节.

关键词：猪瘟病毒囊膜蛋白E2 β-actin蛋白基因复制生长调节

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检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：黄立平刘长明危艳武陆月华郭龙军温士刚武嘉男吴洪丽中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

采用杂交瘤细胞融合技术,获得了一株具有分泌抗猪圆环病毒2型(PCV2)中和活性的单克隆抗体,利用该株单抗建立了一种阻断ELISA方法,用于检测该病毒感染猪血清中和抗体。该方法先用病毒多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原,然后与待... 详细信息

采用杂交瘤细胞融合技术,获得了一株具有分泌抗猪圆环病毒2型(PCV2)中和活性的单克隆抗体,利用该株单抗建立了一种阻断ELISA方法,用于检测该病毒感染猪血清中和抗体。该方法先用病毒多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原,然后与待检猪血清抗体及辣根过氧化物酶标记的单抗进行反应,通过测定酶标单抗显示阻断ELISA检测结果。该方法与常规免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)对353份试验猪血清样品进行了平行试验,两种方法检测符合率为96.0％;该方法的敏感性为97.9％,特异性为92.4％,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。用阻断ELISA和血清中和试验检测PCV2血清中和抗体结果表明,两种方法呈显著正相关性(r=0.9970),其敏感性优于血清中和试验。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品检测结果显示,疫苗接种2 w开始能够检测到病毒中和抗体,4w后血清抗体阳转率达100％;此外,对来自东北3省不同地区送检的703份血清样品进行检测,抗体阳性检出率为73.4％,表明我国养猪场中PCV2感染率较高,该病毒危害严重。本研究建立的阻断ELISA具有操作简便、特异和敏感等特点,可为PCV2流行病学调查及血清抗体检测提供了一种有效技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型血清中和抗体检测单克隆抗体阻断ELISA法

来源：评论

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检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：黄立平刘长明危艳武陆月华郭龙军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

利用抗PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种阻断ELISA方法，用于检测猪血清中PCV2中和抗体.该方法将PCV2多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原，以辣根过氧化物酶标记的单抗为指示抗体，通过测定该酶标单抗显示阻断ELISA检测结... 详细信息

利用抗PCV2-Cap蛋白中和性单克隆抗体建立了一种阻断ELISA方法，用于检测猪血清中PCV2中和抗体. 该方法将PCV2多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原，以辣根过氧化物酶标记的单抗为指示抗体，通过测定该酶标单抗显示阻断ELISA检测结果。该方法与免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)对353份试验猪血清样品进行了平行检测，两种方法检测符合率为96.0％，与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。阻断ELISA与血清中和试验检测结果呈显著正相关性(r=0.9970)。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品检测结果显示，疫苗接种2周开始能够检测到PCV2中和抗体，4周后阳转率达100％;此外，对东北3省不同地区送检的703份血清样品进行检测，阳性检出率为73.4％。本研究建立的阻断ELISA具有操作简便、特异和敏感等特点，可为PCV2血清学流行病学调查及疫苗免疫评价提供了一种有效技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型抗体检测单克隆抗体阻断ELISA

来源：评论

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表达V5表位的重组猪圆环病毒2型毒株及其生物学特性鉴定

表达V5表位的重组猪圆环病毒2型毒株及其生物学特性鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：黄立平陆月华危艳武郭龙军吴洪丽张飞雁付玉洁刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为了探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作为表达外源表位的可行性，本研究构建了以PCV2基因组为骨架。在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转染细胞，拯救出一株表... 详细信息

为了探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作为表达外源表位的可行性，本研究构建了以PCV2基因组为骨架。在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转染细胞，拯救出一株表达V5表位标签的重组毒株，命名为recPCV2／CL—V5。采用免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、血清中和试验(SNA)、捕获ELISA及免疫电镜对重组毒株进行了鉴定。结果表明：在recPCV2／CL-V5株感染细胞中检出PCV2和V5表位抗原;PCV2阳性血清和中和性单克隆抗体(1D2)能够完全中和recPCV2／CL-V5株的细胞感染性;recPCV2／CL．V5株在繁殖动力学和形态学上与亲本病毒基本一致。鉴于recPCV2／CL-V5株插入了一个v5表位，采用PCR、IPMA和捕获ELISA与亲本毒株相鉴别。recPCV2／CL-V5株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，毒价可达106.25TCID50、mL。拯救的带有V5表位标签的重组PCV2毒株，为深入研究该病毒复制理、抗原表位展示及分子标记疫苗和鉴别诊断等开创了新的平台。

关键词：猪圆环病毒2型表位生物学特性鉴别诊断

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