检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：何来王云峰石星明崔红玉韩文雄兰德松王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室河北北方学院动物科技学院动物医学系

根据GenBank中已发表的传染性喉气管炎病毒全基因组序列（NC006233）设计引物,以传染性喉气管炎病毒WG株基因组为模板,PCR扩增糖蛋白gJ基因并对其序列分析。用DNAStar软件分析gJ蛋白的抗原性,选择抗原性强的140aa83aa片段,克隆并连接到... 详细信息

根据GenBank中已发表的传染性喉气管炎病毒全基因组序列（NC006233）设计引物,以传染性喉气管炎病毒WG株基因组为模板,PCR扩增糖蛋白gJ基因并对其序列分析。用DNAStar软件分析gJ蛋白的抗原性,选择抗原性强的140aa83aa片段,克隆并连接到原核表达载体pET-32a（+）中,转化BL2（1DE3）菌株。经IPTG诱导后,获得大小为65.2kD的重组蛋白,命名为r-gJ,表达量占菌体蛋白总量的60.8%;Western blot分析表明r-gJ具有较强的抗原性。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白J(gJ) 序列分析表达抗原性

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表达鸡IFN-γ基因重组鸡痘病毒与鸡传染性法氏囊疫苗联合接种对鸡免疫应答的影响

表达鸡IFN-γ基因重组鸡痘病毒与鸡传染性法氏囊疫苗联合接种对鸡...

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：都兴洋石星明王云峰杨春富王玫童光志尹训南王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室内蒙古农业大学动物科学与医学学院

将表达鸡IFN-γ的重组鸡痘病毒（rFPV-IFN-γ）与鸡传染性法氏囊病MB活疫苗联合接种SPF鸡,研究重组鸡IFN-Y对传染性法氏囊疫苗免疫效果的影响。结果,rFPV-IFN-γ（10～3PFU）和MB活苗联合免疫组(MBr+FPV-IFN-γ)以及重组干扰素（rIFN-γ... 详细信息

将表达鸡IFN-γ的重组鸡痘病毒（rFPV-IFN-γ）与鸡传染性法氏囊病MB活疫苗联合接种SPF鸡,研究重组鸡IFN-Y对传染性法氏囊疫苗免疫效果的影响。结果,rFPV-IFN-γ（10～3PFU）和MB活苗联合免疫组(MBr+FPV-IFN-γ)以及重组干扰素（rIFN-γ,200U）和MB活苗联合免疫组(MB+rIFN-γ)在免疫后2周即可检出ELISA抗体,比MB单独免疫组早1周左右。在受到鸡传染性法氏囊病病毒Gx株攻击之后,MB+rFPV-IFN-γ免疫鸡和MB+rIFN-γ免疫鸡的脾脏只有个别淋巴细胞核浓缩、核崩解,少数滤泡萎缩变性坏死;胸腺结构清晰,仅有个别胸腺小体变性坏死,损伤程度轻于MB单独免疫组和非免疫对照组。疫苗免疫后1周,与非免疫对照相比3个免疫组外周血CD8T淋巴细胞含量均有显著上升,但CD4+T淋巴细胞含量变化却不明显;IBDV Gx株强毒攻击之后2周,3个疫苗免疫组CD4、CD8T淋巴细胞百分含量均显著升高,各组之间CD4、CD8T淋巴细胞百分含量无明显差异。结果表明,rFPV-IFN-γ和rIFN-γ可较全面地加强疫苗引起的免疫应答,加快疫苗诱导的体液免疫应答。

关键词：传染性法氏囊病病毒活疫苗 IFN-γ 免疫应答

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以BAC为基础的疱疹病毒反向遗传技术研究进展

以BAC为基础的疱疹病毒反向遗传技术研究进展

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：崔红玉王云峰石星明童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室河北北方学院动物科技学院动物医学系

近年来,BAC分子克隆化病毒在现代疫苗的研究和应用仍处于活跃的探索阶段,其表现出来的优势令人鼓舞。BAC系统以其容量大(可至数Mb),能够稳定遗传且易于操作的载体系统巨大优势,成为众多分子生物学工作者实现对大基因组病毒进行

关键词：反向遗传技术疱疹病毒 BAC

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新疆地区一株马流感病毒的分离及鉴定

新疆地区一株马流感病毒的分离及鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：郭巍闫妍王英原刘霓虹戴伶俐李雪峰赵立平张春生贺磊周建华相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室慢病毒及马病课题组新疆动物卫生监督所

2007年10月,我国新疆维吾尔自治区阿勒泰地区富蕴县发现马匹出现呼吸道疾病,发病马表现出典型的流行性感冒症状。经过临床诊断、病原分离、电镜观察以及病毒基因序列分析,确定病原为马流行性感冒病毒,属于H3N8亚型,该株病毒与近年来马... 详细信息

2007年10月,我国新疆维吾尔自治区阿勒泰地区富蕴县发现马匹出现呼吸道疾病,发病马表现出典型的流行性感冒症状。经过临床诊断、病原分离、电镜观察以及病毒基因序列分析,确定病原为马流行性感冒病毒,属于H3N8亚型,该株病毒与近年来马流行性感冒病毒北美洲流行株的同源性较高,命名为:A/equine/XinjiangFuyun/3/2007(H3N8)。

关键词：马流行性感冒流感病毒 H3N8

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鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究

鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究

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低碳经济与高效养殖——第六次全国饲料营养学术研讨会暨动物营养学分会成立三十周年大会

作者：王瑞琴蔺丽娟周财源韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹东北农业大学动科院动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的氨基酸残基,4个带负电... 详细信息

本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的氨基酸残基,4个带负电荷的氨基酸残基。其分子量为7273.55,等电点pI为8.29。根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素9的氨基酸序列构建系统进化树,经分析<正>本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的氨基酸残基,4个带负电荷的氨基酸残基。其分子量为7273.55,等电点pI为8.29。根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素9的氨基酸序列构建系统进化树,经分析

关键词：鹌鹑 β-防御素组织分布重组蛋白抗菌活性

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鹌鹑β-防御素10基因的克隆及其生物学作用的初步研究

鹌鹑β-防御素10基因的克隆及其生物学作用的初步研究

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低碳经济与高效养殖——第六次全国饲料营养学术研讨会暨动物营养学分会成立三十周年大会

作者：蔺丽娟王瑞琴周财源韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹东北农业大学动科院动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10(AvBD10)的氨基酸序列同源性... 详细信息

本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10(AvBD10)的氨基酸序列同源性最高,达83.8%。我们将其命名为鹌鹑AvBD10。<正>本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10(AvBD10)的氨基酸序列同源性最高,达83.8%。我们将其命名为鹌鹑AvBD10。

关键词：鹌鹑AvBD10 重组蛋白抗菌活性

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禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测方法的建立

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黑龙江农业科学 2015年第4期 47-52页

作者：牛秀杰赵妍薛美王云峰东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR)。以pMD-LTR,pMD-gag... 详细信息

为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR)。以pMD-LTR,pMD-gag重组质粒为标准品建立标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。结果表明:该方法线性关系良好;敏感性能检测到10拷贝标准品;能特异性检测REV样品,不与其它禽相关病原发生交叉反应;板内、板间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法对人工感染REV的鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、腺胃和法氏囊进行初步检测,结果显示法式囊中的含量最高。

关键词： SYBR GreenⅠ 实时荧光PCR 禽网状内皮增殖病毒 gag基因 LTR基因

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A群猪轮状病毒JS株VP7基因序列分析

A群猪轮状病毒JS株VP7基因序列分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学生命科学院

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,VP7基因全长1062bp,含有... 详细信息

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,VP7基因全长1062bp,含有1个981bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与已知的15个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为74.5%～78.5%和75.2%～83.1%,核苷酸系统发育进化树结果表明,JS毒株与轮状病毒G9型参考毒株ICB2185、O-1亲缘关系较近,分为1个群,表明JS毒株血清型为G9型。目前,我国尚未见猪及其它动物轮状病毒G9型流行株的报道。

关键词：猪轮状病毒 VP7基因序列分析

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检测猪捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR方法的建立及应用

检测猪捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR...

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中关村全球农业生物技术创新论坛

作者：刘杉杉赵亚荣吕超超王贵华胡峰蔺文成王晓玲崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 大北农动物医学中心北京 100097

猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪捷申病毒(PTV)是严重危害中国养猪业的重要病毒，经常继发或者混合感染。为了建立同时检测PTV、CSFV和PRRSV的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法，本试验根据国内外发表的有关检测PRRSV、C... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪捷申病毒(PTV)是严重危害中国养猪业的重要病毒，经常继发或者混合感染。为了建立同时检测PTV、CSFV和PRRSV的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法，本试验根据国内外发表的有关检测PRRSV、CSFV和PTV的引物．对比GenBank中登录的这3种病毒的序列。选出3对引物．通过优化反应条件，建立了检测这3种病毒的mRT-PCR检测方法，并进行了特异性试验和敏感性试验。特异性试验表明，mRT-PCR可以特异扩增出PRRSV ORF6基因45lbp片段、CSFV Ems基因343bp片段、PTV 5 -UTR基因163bp片段，而对大肠杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪流感病毒不能扩出;敏感性试验表明，mRT-PCR方法中3种病毒的最低核酸检出量分别是7.11×102(PRRSV),7.8l×103，(CSFV)，8.43×102(PTV)拷贝数/μL，比单个RT-PCR敏感性略低。利用该方法对69份送检病料样品进行检测，其中PRRsV和CSFV混合感染检出率为4.35％。PRRSV和PTV的混合感染检出率为11.59％，CSFV和PTV的混合感染检出率为13.04％，3种病毒的混合感染检出率为8.70％，与单个RT-PCR检测结果对比，符合率为98．6％。该方法快速简便，可以作为疾病的初步筛选。对临床早期诊断和流行病学调查具有重要意义。

关键词：猪繁殖障碍 RNA病毒多重RT-PCR检测临床应用

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A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力东北农业大学生命科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区,设计1对特异引物,以PRV JS株反转录cDNA为模板,通过PCR方法获得约113kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:获得了VP6的1320bp全基因序列;将其ORF与国内外9... 详细信息

参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区,设计1对特异引物,以PRV JS株反转录cDNA为模板,通过PCR方法获得约113kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:获得了VP6的1320bp全基因序列;将其ORF与国内外9株PRV VP6基因的ORF进行核苷酸和氨基酸同源性比较,核苷酸同源性在77.11%～91.11%之间,氨基酸的同源性在89.17%～99.15%之间;在氨基酸系统发育进化树中,JS毒株与A131、OSU、CN86毒株亲缘关系较近,为一个进化群。

关键词： PRV VP6基因序列分析

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