检索结果-内蒙古大学图书馆

中关村全球农业生物技术创新论坛

作者：张志榜陈建飞时洪艳杨斌石达陈小金冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001 内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特 010018

为了制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白单克隆抗体(MAb)，本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BABL/c小鼠：以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原，采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，通过间接ELISA进行筛选，得到一株稳... 详细信息

为了制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白单克隆抗体(MAb)，本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BABL/c小鼠：以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原，采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，通过间接ELISA进行筛选，得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb。MAb亚类鉴定为IgG2b型，轻链为k链，杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1：3000和1：(2×105)。Western blot验证明该MAb能够识别重组及天然的PEDVM蛋白。IFA试验表明该MAb能够与PEDV感染的Veto E6细胞产生特异性免疫荧光。

关键词：猪流行性腹泻病毒跨膜蛋白原核表达单克隆抗体

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野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定

野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定

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辽宁省畜牧兽医学会2014年学会年会

作者：姜莉莉祁小乐高玉龙邓小芸柴洪亮张礼洲贠炳岭秦立廷王永强高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨 150040 辽宁医学院畜牧兽医学院辽宁锦州 12 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨 150040

本研究利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒(REV)长末端重复序列(LTR)的特异性引物作为检测引物,对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测.阳性样品经DF1培养增殖,进行病毒的分离,经PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,确定分离到2... 详细信息

本研究利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒(REV)长末端重复序列(LTR)的特异性引物作为检测引物,对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测.阳性样品经DF1培养增殖,进行病毒的分离,经PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,确定分离到2株REV,分别来自于针尾鸭和绿头鸭将分离病毒分别命名为DBYR1101和DBYR1102.克隆两个病毒株的主要保护性抗原基因gp90,并进行序列分析.结果显示,两个分离株gp90基因氨基酸同源性为99.5％;DBYR1101gp90基因与REV3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸同源性分别为95.7％、94.2％和98.2％;DBYR1102gp90基因与REV3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸同源性分别为95.2％、93.7％和97.7％;与我国早期南方分离株HA9901的氨基酸序列同源性分别为94.7％和94.2％;与我国北方分离株氨基酸序列同源性为99.2％～100％.核苷酸遗传进化分析表明,2个野鸟源REV分离株与现有的东北分离株亲缘关系较近,趋于形成一个北方分离群;与SNV株亲缘关系最远;与170A株亲缘关系较远;与美国和中国台湾地区的某些分离株同源性较高.该研究首次自野鸭体内分离到REV,丰富了REV流行病学资料,同时提醒我们重视野生鸟类迁徙在疾病传播中所扮演的角色,为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定了基础.

关键词：野鸭禽网状内皮组织增生病病毒分离菌株鉴定

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Genetic Analysis of the VP2 Hypervariable Region of Thirty-six Infectious Bursal Disease Virus Isolates in China during 2009-2012

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Agricultural Science & Technology 2015年第8期16卷 1565-1569,1602页

作者：祁小乐秦立廷高玉龙高宏雷李颖颖高立卢珍王念陈玉明张礼洲李凯王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东新希望六合有限公司山东青岛266000 江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

[Objective] Infectious bursal disease （IBD） is a highly contagious immuno- suppressive disease caused by infectious bursal disease virus （IBDV）. IBDV is ge- netically prone to mutation, which results in challenges to the disease prevention and control. Thus, it is necessary to continuously monitor the prevalence of IBDV. [Method] 36 IBDVs were identified from ten provinces in China from 2009 to 2012. Partial fragments of VP2, including the hypervariable region （HVR）, from new iso- lates were sequenced and analyzed through comparisons with published sequences of IBDV, including 18 strains isolated previously by our lab and 24 reference strains from China and around the world. [Result] Phylogenetic analysis showed a co-exis- tence of IBDV strains belonging to classic, variant, attenuated, and very virulent IB- DV （wlBDV） in China. wlBDVs remain the predominant strains in China and the new subgroup was emerging. Alignment analysis revealed several distinct amino acid mutations that might be involved in virulence or antigenicity variation. [Conclu- sion] The results offered evolutionary clues showing the emerging trend of obvious variations and diversity of IBDV in major poultry-producing regions of China particu- larly in recent years. These findings will contribute to a better understanding of the genetic evolution of IBDV.

关键词： Genetic analysis VP2 Infectious bursal disease virus

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一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗株HuN4-F112N蛋白单克隆抗体不识别其强毒株HuN4-F5与其氨基酸序列无关

一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗株HuN4-F112N蛋白单克隆抗体...

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：王倩安同庆彭金美陈家锃冷超粮孙艳田志军杨汉春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验/室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人畜共患病重点实验室北京100193 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验/室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人畜共患病重点实验室北京100193

2006年,以Nsp2编码区30-aa缺失为特征的高致病性PRRSV (HP-PRRSV)的出现和流行给我国养猪业造成巨大的经济损失.本实验室通过将HP-PRRSV HuN4株在Marc-145细胞上传了112代得到一个致弱毒株HuN4-F112.序列分析显示HuN4-F112与其强毒株HuN...

2006年,以Nsp2编码区30-aa缺失为特征的高致病性PRRSV (HP-PRRSV)的出现和流行给我国养猪业造成巨大的经济损失.本实验室通过将HP-PRRSV HuN4株在Marc-145细胞上传了112代得到一个致弱毒株HuN4-F112.序列分析显示HuN4-F112与其强毒株HuN4-F5之间存在数目不多、散在的氨基酸突变,然而它的生物学特性已经发生了很大的改变.如何找出它们之间的抗原性差异对于研究它致弱的分子机制具有重要意义.

关键词：

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副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的初步鉴定

副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的初步鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：郑楠符芳柴政姜福成王香玲张雪云王卓李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319 哈尔滨师范大学黑龙江哈尔滨150080

为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(***)单克隆抗体(MAb),本研究采用***5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有***标准菌株;免疫... 详细信息

为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(***)单克隆抗体(MAb),本研究采用***5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有***标准菌株;免疫沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别蛋白为ATP结合盒转运蛋白(ABCT)家族的寡肽透过酶(OppA);利用MAb对噬菌体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有“KTPAE-R”保守序列,对应于*** SH29755株和SH0165株的469位～475位的氨基酸残基。对OppA氨基酸序列比对结果表明***与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1％～74.5％,本研究结果为进一步研究***感染的病原学诊断建立了良好的基础。

关键词：副猪嗜血杆菌单克隆抗体抗原表位鉴别诊断

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猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep蛋白共定位抑制病毒复制

猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者： HUANG Li-ping Nicolaas R.C.Van Renne Dipongkor Saha Jan Van Doorsselaere Uladzimir Karniychuk LIU Chang-ming Hans J.Nauwynck Laboratory of Virology Faculty of Veterinary Medicine Ghent University Merelbeke Belgium 中国农业科学院 Laboratory of Virology Faculty of Veterinary Medicine Ghent University Merelbeke Belgium Department of Health Care and Biotechnology KATHO Catholic University College of South-West Flander 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示该序列位于病毒粒子的内部,因此该序列作为受... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示该序列位于病毒粒子的内部,因此该序列作为受体结合位点的功能受到质疑.该序列在PCV2毒株之间高度保守,可能具有重要功能.本研究旨在阐明该保守序列在PCV2复制过程中的功能. 首次阐明了PCV2 Cap蛋白保守序列37RIRKVKV103在PCV2复制过程中的功能。该保守序列对PCV2的复制至关重要，该序列突变之后导致:(1)Cap蛋白mRNA及其蛋白量明显降低;(2)阻碍Cap和Rep蛋白共定位;(3)最终产生非活性的病毒。本研究为Cap和Rep蛋白相互作用提供新的信息，而且推测这2种蛋白之间的相互作用是病毒组装所必需的。

关键词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白保守序列突变表达量病毒复制抑制

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猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep蛋白共定位抑制病毒复制

猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep...

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：黄立平 Nicolaas R.C.Van Renne Dipongkor Saha Jan Van Doorsselaere Uladzimir Karniychuk 刘长明 Hans J.Nauwynck Laboratory of Virology Faculty of Veterinary Medicine Ghent University Merelbeke Belgium 中国农业科学院 Laboratory of Virology Faculty of Veterinary Medicine Ghent University Merelbeke Belgium Department of Health Care and Biotechnology KATHO Catholic University College of South-West Flander 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

背景猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示该序列位于病毒粒子的内部,因此该序列...

背景猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示该序列位于病毒粒子的内部,因此该序列作为受体结合位点的功能受到质疑.该序列在PCV2毒株之间高度保守,可能具有重要功能.本研究旨在阐明该保守序列在PCV2复制过程中的功能.

关键词：

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H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究

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中国医药生物技术 2010年第3期5卷 196-201页

作者：许莹郭巍王世霞黄文强张璐卢山周建华相文华黄祖瑚南京医科大学第一附属医院感染病科江苏省人民医院中美疫苗中心 210029 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室哈尔滨150001 美国麻省大学医学院内科学系渥斯特01605

目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJ... 详细信息

目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM。用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认。采用电转录法免疫新西兰白兔。ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平。结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体。其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性最强。结论新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础。

关键词：流感病毒A型,H3N8亚型血凝素类疫苗,DNA

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一株新奇的抗副猪嗜血杆菌单克隆抗体识别B细胞表位的鉴定及应用

一株新奇的抗副猪嗜血杆菌单克隆抗体识别B细胞表位的鉴定及应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：杨玉菊郑楠符芳柴政姜福成王香玲张雪云王卓李曦哈尔滨学院黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319 哈尔滨师范大学黑龙江哈尔滨150080

为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(***)单克隆抗体(MAb),本研究采用***5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株.Western blot 结果表明该MAb能够特异性识别所有***标准菌株;免疫... 详细信息

为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(***)单克隆抗体(MAb),本研究采用***5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株.Western blot 结果表明该MAb能够特异性识别所有***标准菌株;免疫沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别蛋白为ATP结合盒转运蛋白(ABCT)家族的寡肽透过酶(OppA);利用MAb对噬茵体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有"KTPAE-R"保守序列,对应于*** SH29755株和SH0165株的469位～475位的氨基酸残基.对OppA氨基酸序列比对结果表明***与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1％～74.5％,本研究结果为进一步研究***感染的病原学诊断建立了良好的基础.

关键词：副猪嗜血杆菌单克隆抗体 B细胞表位病原学诊断

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猪源抗体基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

猪源抗体基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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2014年中国畜牧兽医学会养猪学分会学术研讨会

作者：王香玲柴政田华彬符芳姜福成郑楠张雪云郭佃磊李昆鹏李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨 150025 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆 163319

为了制备原核表达猪源单链重组抗体,本实验利用FITC-山羊抗猪IgG标记猪外周血淋巴细胞,通过FACS的方法筛选出IgG+B细胞.以IgG+B细胞为模板,利用RT-PCR技术扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL).测序之后,将扩增的可变区与本实验室保... 详细信息

为了制备原核表达猪源单链重组抗体,本实验利用FITC-山羊抗猪IgG标记猪外周血淋巴细胞,通过FACS的方法筛选出IgG+B细胞.以IgG+B细胞为模板,利用RT-PCR技术扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL).测序之后,将扩增的可变区与本实验室保存的猪源抗体恒定区连接.通过Linker序列[(Gly4Ser)3],最终将重链和轻链连接,构成H-linker-L.将该序列连接到原核表达载体pET-28a进行原核表达,纯化.Western-blot鉴定结果表明,该重组蛋白能够与兔抗猪IgG二抗反应.这说明构建的重组抗体确实为猪源抗体.

关键词：猪源抗体基因克隆大肠杆菌 B淋巴细胞

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