检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2000年第1期22卷 43-47页

作者：金红李媛于康震严隽端刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

通过反转录_聚合酶链反应(RT_PCR),从中国北京分离株牛流行热病毒JB76H 基因组RNA中扩增出主要保护性抗原糖蛋白G的cDNA。采用Sanger’s 双脱氧末端终止法测定cDNA 片段的核苷酸序列,并推导出氨基酸序列。G基因全长为1872 个碱基,单一... 详细信息

通过反转录_聚合酶链反应(RT_PCR),从中国北京分离株牛流行热病毒JB76H 基因组RNA中扩增出主要保护性抗原糖蛋白G的cDNA。采用Sanger’s 双脱氧末端终止法测定cDNA 片段的核苷酸序列,并推导出氨基酸序列。G基因全长为1872 个碱基,单一的开放阅读框架编码623 个氨基酸的多肽。将测得的序列与澳大利亚六个分离株进行比较,发现我国分离株与澳大利亚分离株间同源性为91% ,低于澳大利亚各分离株之间的同源性(98% ～99% ) 。同时氨基酸序列比较结果也显示,我国分离株与澳大利亚分离株间同源性(93.9% )低于澳大利亚各分离株之间的同源性(96% ～98 %) 。

关键词：牛流行热病毒核苷酸序列 JB76H株 G蛋白

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间接免疫荧光抗体法对鸡传染性支气管炎病毒进行抗原定位

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 82-85页

作者：刘思国尹训南李广兴康丽娟江国托孔宪刚刘忠贵卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

应用间接免疫荧光抗体（ＩＦＡ）法对ＩＢＶ感染后ＳＰＦ鸡不同脏器进行了跟踪检测。结果发现，在ＩＢＶ感染后的第７天，在气管、肾脏、脾脏、肺脏和肝脏等组织细胞中均不同程度地出现特异性的荧光。表明在感染的初期，ＩＢＶ具有广泛... 详细信息

应用间接免疫荧光抗体（ＩＦＡ）法对ＩＢＶ感染后ＳＰＦ鸡不同脏器进行了跟踪检测。结果发现，在ＩＢＶ感染后的第７天，在气管、肾脏、脾脏、肺脏和肝脏等组织细胞中均不同程度地出现特异性的荧光。表明在感染的初期，ＩＢＶ具有广泛的组织嗜性；在感染的第１０天，只有肾脏、气管或肺脏中呈现荧光，而以肾脏中的荧光最强，特异性荧光持续时间最长的是肾脏，可达１４天，病毒存在于肾小管间质内浸润的淋巴细胞和巨噬细胞胞浆中。实验结果证实，ＩＦＡ方法具有直观、特异等特点，在抗原定位上具有独特的优点。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒间接免疫荧光抗体法抗原定位

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反义技术研究简述

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中国预防兽医学报 2000年第2期22卷 159-160页

作者：崔尚金宋晓华于康震刘尚高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094

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H3亚型禽流感病毒分离株与变异株的生物学特性

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 85-89页

作者：崔尚金于康震唐秀英刘明田国彬李建伟刘尚高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094

本研究对分离到的Ｈ３Ｎ８禽流感病毒株（分离株Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９８，以下简称Ｊ１株）和传代过程中发生变异的变异株（Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９９，以下简称Ｊ２株）进行了生物学和病理学特性的初步研究，发现在... 详细信息

本研究对分离到的Ｈ３Ｎ８禽流感病毒株（分离株Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９８，以下简称Ｊ１株）和传代过程中发生变异的变异株（Ａ／Ｃｈｉｃｋ／Ｊｉｌｉｎ／９９，以下简称Ｊ２株）进行了生物学和病理学特性的初步研究，发现在相同的时间内，Ｊ１株病毒致死鸡胚数量明显高于Ｊ２株病毒，病毒ＨＡ的滴度也明显高于Ｊ２；Ｊ１株的ＩＰＶＩ为１．４４，而Ｊ２为０．６４；毒株的致病性试验与ＳＰＦ感染鸡的器官变化表明Ｊ１组的病理学变化较Ｊ２组明显，且主要的嗜器官为肺、肝、法氏囊、胸腺、脾等主要的免疫器官；本研究还对ＳＰＦ感染鸡的病变器官进行了病原学检测、病理组织检测和电镜观察。结果表明两者存在较明显的差异。

关键词：禽流感病毒 H3N8 生物学特征

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基因工程疫苗的研究进展

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 192-194页

作者：李媛金红于康震程浩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 吉林市畜牧兽医工作总站吉林132000

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鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株糖蛋白gB基因序列比较分析

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中国兽医学报 2000年第6期20卷 544-547页

作者：张绍杰孟松树仇华吉王柳倪键强何召庆王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学内蒙古呼和浩特010018

根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA2 株的 g B基因序列 ,设计了 1对引物 ,通过 PCR扩增了 ILTV王岗株的 g B基因 ,并克隆到 p UC1 1 9质粒的 Eco R 位点中 ,经酶切鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,g B基因长 2 6 1 ... 详细信息

根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA2 株的 g B基因序列 ,设计了 1对引物 ,通过 PCR扩增了 ILTV王岗株的 g B基因 ,并克隆到 p UC1 1 9质粒的 Eco R 位点中 ,经酶切鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,g B基因长 2 6 1 9bp,包含完整的阅读框架。序列比较分析表明 ,ILTV王岗株的 g B基因核苷酸序列与英国的 Throne882和美国的 6 32 2个强毒株的 g B基因序列完全一致 ,而与澳大利亚 SA2 疫苗株g B基因核苷酸同一性为 99.8% ,氨基酸的同一性为 98.4 %。与澳大利亚 SA2 疫苗株 g B基因核苷酸和氨基酸序列比较发现 ,ILTV 3个强毒株 (王岗株 ,Throne 882株和 6 32株 ) g B基因的核苷酸序列在第 89位上均缺失 1个碱基 G,而在第 1 0 2位核苷酸处又插入了 1个碱基 A,从而引起了在氨基酸序列中第 2 9～ 32位 5个氨基酸的移码突变。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因序列分析

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牛传染性支气管炎病毒PCR诊断方法的研究

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黑龙江畜牧兽医 2000年第4期 1-2页

作者：张桂红童光志王柳仇华吉赵晓岩张绍杰刘宝全东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特... 详细信息

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特异性片段。用此引物对其同属的伪狂犬病毒 (PRV)、马立克氏病毒 (MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒 (ILTV)进行扩增 ,均未见特异性条带 ,证明该引物是特异的 ;检测PCR的敏感性表明 ,该法可检测出 3 pg的病毒DNA。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gB基因 PCR诊断方法

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西北地区新城疫病毒分离株F基因的克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第5期22卷 351-355页

作者：梁荣曹殿军陈杰李健强中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 西北农林科技大学动物科学与动物医学学院杨凌712100

从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RN... 详细信息

从西北地区 (陕西、甘肃、青海和新疆 ) 1979～ 1999年发生新城疫鸡群中共分离和收集了 15个毒株 ,经蚀斑纯化、SPF鸡胚增殖得到 9株NDV分离株。致病力测定结果表明 ,除 2株为中强毒外 ,其余均为强毒株。以异硫氰酸胍法提取病毒基因组RNA ,RT_PCR扩增其融合蛋白 (F)基因N端 90 8bp的片段 ,经回收、鉴定后 ,克隆到pGEM_T载体上进行核苷酸序列测定。对各毒株核苷酸及推导的氨基酸进行序列和同源性的比较 ,结果表明所有毒株在该区段没有缺失和插入 ,但有多处碱基置换。各分离毒株之间同源性很高 (平均 96 .8% ) ,与疫苗毒株同源性较低 (82 .5 %～ 85 .8% ) ,而分离自青海省的 3个毒株与其他毒株的同源性均较低 (平均 88.0 % )。以 389bp核苷酸绘制系统发育树 ,证实西北地区的新城疫是由基因型Ⅶc和一个新发现的基因型Ⅸ引起的。

关键词： NDV F基因克隆测序系统发育树西北地区新城疫病毒

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百日咳毒素S1亚单位缺失分子的构建及其在重组杆状病毒中的表达

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中国免疫学杂志 2000年第1期16卷 12-14页

作者：李庆雷于康震马丽英王孝铭哈尔滨医科大学病生教研室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 哈尔滨医科大学病理生理教研室哈尔滨150086

目的：为探明校基端疏水区对百日咳毒素Ｓ１亚单位分泌性的影响，试图构建缺失羧基端疏水区的Ｓ１亚单位。方法：应用ＰＣＲ技术构建了６种不同信号序列修饰的缺失羧基端疏水区的Ｓ１亚单位编码基因，并使用重组杆状病毒（ｒＢＶ）技术... 详细信息

目的：为探明校基端疏水区对百日咳毒素Ｓ１亚单位分泌性的影响，试图构建缺失羧基端疏水区的Ｓ１亚单位。方法：应用ＰＣＲ技术构建了６种不同信号序列修饰的缺失羧基端疏水区的Ｓ１亚单位编码基因，并使用重组杆状病毒（ｒＢＶ）技术实现了这些缺失Ｓ１亚单位（ｔＳ１）在昆虫细胞中的高水平表达。结果：这些缺失Ｓ１亚单位的表达量为每万个昆虫细胞１．０１～２．２５ｕｇ。细菌信号肽和流感病毒ＨＡ信号肽均能完整表达和正确剪切，但ＨＡ信号肽在昆虫细胞中的处理效率更高。结论：ｔＳ１亚单位缺失羧基端疏水区后在昆虫细胞中的表达量明显提高，这些ｔＳ１亚单位的异源性表达是由于信号肽剪切不全所导致，ｔＳ１分子表观分子量的漂移并不意味着信号肽剪切不正确。

关键词：百日咳毒素 S1亚单位重组杆状病毒信号肽

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鸡传染性喉气管炎病毒王岗株糖蛋白gB基因在重组杆状病毒中的表达

鸡传染性喉气管炎病毒王岗株糖蛋白gB基因在重组杆状病毒中的表达

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中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会

作者：张绍杰倪健强孟松树王柳仇华吉王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

将克隆到pUC119中的鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因,通过EcoRI位点再亚克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,构建成重组杆状病毒转移载体rpVLgB。将rpVLgB转移载体质粒与杆状病毒DNA(Bac-N-Blue DNA)共转Sf9昆虫细胞,经三轮蚀斑纯化,获... 详细信息

将克隆到pUC119中的鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因,通过EcoRI位点再亚克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,构建成重组杆状病毒转移载体rpVLgB。将rpVLgB转移载体质粒与杆状病毒DNA(Bac-N-Blue DNA)共转Sf9昆虫细胞,经三轮蚀斑纯化,获得的重组病毒命名为rpVL-ILTVgB。PCR方法鉴定证明,gB基因正确插入到杆状病毒基因组中,直接免疫荧光试验和Dot-ELISA结果均表明gB基因在重组杆状病毒感染的S19昆虫细胞中获得表达,表达的gB蛋白将作为鸡传染性喉气管炎的亚单位疫苗和诊断抗原。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB 重组杆状病毒

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