检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 1999年第4期21卷 250-253页

作者：陈洪岩江国托杨奇伟陈奖励张宝山刘胜旺卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将鸡传染性支气管炎病毒肾型Ｔ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ连接于ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄＩＩＩ与ＢａｍＨＩ位点之间构建含有ＣＭＶ启动子及ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的鸡传染性支气管炎病毒Ｓ１蛋白真核表... 详细信息

将鸡传染性支气管炎病毒肾型Ｔ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ连接于ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄＩＩＩ与ＢａｍＨＩ位点之间构建含有ＣＭＶ启动子及ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的鸡传染性支气管炎病毒Ｓ１蛋白真核表达质粒。实验证明，ＳＰＦ鸡肌注免疫后血清ＩｇＧ抗体逐渐升高，至第３５日龄左右达到高峰，攻毒后血清ＩｇＧ抗体先下降而后升高，血清ＩｇＧ抗体升高幅度不及ＩＢ油苗免疫组。质粒ＤＮＡ免疫鸡攻毒后有４０％的鸡可耐过强毒的攻击，说明Ｓ１基因在体内获得了表达并使鸡产生了一定的免疫力。

关键词： S1基因基因免疫传染性支气管炎 IBV 鸡

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禽流感疫苗

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中国预防兽医学报 1999年第5期21卷 398-400页

作者：马文军于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

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鸡白细胞介素-2 cDNA克隆

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南京农业大学学报 1999年第2期22卷 80-84页

作者：李祥瑞金红卢景良南京农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡ＩＬ－２ｃＤＮＡ。以ＣｏｎＡ（２０μｇ／ｍＬ）诱导ＳＰＦ鸡脾脏淋巴细胞，第２０小时收集细胞，提取ｍＲＮＡ，以ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍｆｏｒｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅ... 详细信息

用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡ＩＬ－２ｃＤＮＡ。以ＣｏｎＡ（２０μｇ／ｍＬ）诱导ＳＰＦ鸡脾脏淋巴细胞，第２０小时收集细胞，提取ｍＲＮＡ，以ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍｆｏｒｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒合成ｃＤＮＡ，定向连结于穿梭质粒ｐＳＶ·ＳｐｏｒｔⅠ，构建ｃＤＮＡ文库。将文库分组提取重组质粒，转染ＣＯＳ－７细胞，表达ｃＤＮＡｓ。以淋巴细胞增殖试验检测表达产物ＩＬ－２活性。经过３轮筛选，获得１４个具有ＩＬ－２活性的克隆。选择其中４个进行酶切分析，结果显示这４个ｃＤＮＡ大小分别为１．５，１．０，０．８和０．８ｋｂ。

关键词：鸡白细胞介素-2 cDNA 克隆

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接种La Sota疫苗雏鸡外周器官中CD4^+T细胞的来源及其作用

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中国兽医学报 1999年第3期19卷 212-214页

作者：刘胜旺陈洪岩李一经陈立君孔宪刚卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学兽医系哈尔滨血液病研究所

切除胸腺的２日龄雏鸡，接种抗鸡Ｔ细胞表面分子ＣＤ４的单克隆抗体，于１２日龄时以ＬａＳｏｔａ疫苗免疫。然后，在不同的日龄分别用ＦＡＣＳ、ＭＴＴ及间接ＥＬＩＳＡ测定脾脏和外周血中ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞亚类数量、脾Ｔ... 详细信息

切除胸腺的２日龄雏鸡，接种抗鸡Ｔ细胞表面分子ＣＤ４的单克隆抗体，于１２日龄时以ＬａＳｏｔａ疫苗免疫。然后，在不同的日龄分别用ＦＡＣＳ、ＭＴＴ及间接ＥＬＩＳＡ测定脾脏和外周血中ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞亚类数量、脾Ｔ淋巴细胞转化功能及病毒特异的血清ＩｇＧ抗体的动态变化。结果，胸腺切除鸡Ｔ淋巴细胞亚类数量、转化功能及病毒特异的血清ＩｇＧ抗体的动态变化均不同于对照组鸡。提示ＬａＳｏｔａ疫苗免疫鸡外周器官中增加的ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞可能来源于胸腺外途径，并对抗体的产生具有辅助功能。

关键词：新城疫疫苗 LaSota疫苗 CD4^+细胞雏鸡

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鸡传染性支气管炎病毒华南分离株核蛋白基因的序列测定及同源性分析

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中国兽医学报 1999年第4期19卷 324-326页

作者：刘思国江国托康丽娟刘忠贵卢景良刘明春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 沈阳农业大学畜牧兽医学院

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）核蛋白基因序列，设计并合成１对引物。应用这对引物，以ＲＴ ＰＣＲ特异性扩增出华南分离株（ＨＮ株）的核蛋白基因，基因产物大小为１５ｋｂ，与设计相符。对 ... 详细信息

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）核蛋白基因序列，设计并合成１对引物。应用这对引物，以ＲＴ ＰＣＲ特异性扩增出华南分离株（ＨＮ株）的核蛋白基因，基因产物大小为１５ｋｂ，与设计相符。对ＨＮ株部分核蛋白基因进行序列测定，并与标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｂｅａｕ和Ｇｒａｙ的核蛋白基因进行同源性比较，结果表明，ＨＮ株与Ｈ５２、Ｍ４１、Ｂｅａｕ和Ｇｒａｙ株的核酸同源性分别为８５％、８４％８４％和８６％。由此可以看出，ＨＮ株与标准毒株在核蛋白基因上存在一定的差异。

关键词：鸡病毒 IBV 核蛋白基因核苷酸序列同源性

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伪狂犬病流行现状及我国应采取的防制措施

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中国兽医学报 1999年第1期19卷 1-2页

作者：童光志陈焕春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室华中农业大学畜牧兽医学院

１伪狂犬病的流行现状伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ，Ａｕｊｅｓｚｋｙ′ｓｄｉｓｅａ－ｓｅ）在自然条件下能感染猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠、野猪、貂、熊、狐等动物。除猪以外，其他动物感染伪狂犬病病毒后，具有发热、奇痒... 详细信息

１伪狂犬病的流行现状伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ，Ａｕｊｅｓｚｋｙ′ｓｄｉｓｅａ－ｓｅ）在自然条件下能感染猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠、野猪、貂、熊、狐等动物。除猪以外，其他动物感染伪狂犬病病毒后，具有发热、奇痒和急性脑脊髓炎等典型症状，均为致死...

关键词：伪狂犬病病毒病流行现状防制措施

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猪T细胞表面抗原特异性单克隆抗体的研制及其特性鉴定

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中国兽医学报 1999年第5期19卷 456-458页

作者：李铭孔宪刚卢景良刘宝全东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

用从健康猪胸腺提取的Ｔ淋巴细胞作抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经３次克隆，共获得１０株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。以细胞反应特异性试验、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ... 详细信息

用从健康猪胸腺提取的Ｔ淋巴细胞作抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经３次克隆，共获得１０株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。以细胞反应特异性试验、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析、流式细胞计数（ＦＣＭ）等方法，确定了对猪Ｔ细胞表面抗原特异性反应的单抗（ＭｃＡｂｓ），其中２Ｄ９、３Ｂ１０可以识别相对分子质量５００００的Ｔ细胞膜蛋白，能标记９６％的胸腺细胞、８９％的外周血Ｔ淋巴细胞、８７％的脾Ｔ淋巴细胞，其特性与猪ＣＤ２抗原相符；另一株１Ｇ１２可识别相对分子质量６３０００的Ｔ细胞膜蛋白，能标记９８％的胸腺细胞、９１％的外周血Ｔ淋巴细胞、７８％的脾Ｔ淋巴细胞，其特性与猪ＣＤ５抗原相符。

关键词：猪 T淋巴细胞表面抗原单克隆抗体

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鸡传染性支气管炎病毒的遗传与变异(一)

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养禽与禽病防治 1999年第6期 6-9页

作者：江国托刘思国康丽娟刘明春步志高卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

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猪繁殖 - 呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-1a株基因型鉴定

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中国兽医学报 1998年第2期18卷 118-121页

作者：仇华吉郭宝清童光志刘文兴于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

根据猪繁殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲型毒株和欧洲型毒株的基因组序列设计合成了２对引物，即１００８ＰＳ／１００９ＰＲ和１０１０ＰＬＳ／１０１１ＰＬＲ。我国分离的ＣＨ－１ａ株用这２对引物均能扩增出与预期大小相符... 详细信息

根据猪繁殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲型毒株和欧洲型毒株的基因组序列设计合成了２对引物，即１００８ＰＳ／１００９ＰＲ和１０１０ＰＬＳ／１０１１ＰＬＲ。我国分离的ＣＨ－１ａ株用这２对引物均能扩增出与预期大小相符的ＲＴ－ＰＣＲ产物，分别与美洲型代表株（ＶＲ－２３３２）的ＲＴ－ＰＣＲ产物大小相当。特异性试验表明，这２对引物均不能扩增其他常见的繁殖障碍相关病毒的ＲＮＡ或ＤＮＡ以及未感染的ＭＡＲＣ－１４５细胞ＲＮＡ。间接免疫荧光试验也证明，ＣＨ－１ａ株与ＰＲＲＳＶ核衣壳蛋白特异性单克隆抗体以及美洲型毒株抗血清均呈阳性反应。因此初步证实ＣＨ－１ａ株为美洲型ＰＲＲＳＶ。

关键词：猪 PRRSV RT-PCR 基因型

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传染性支气管炎病毒S_1基因DNA免疫质粒的构建及其免疫原性

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中国兽医学报 1998年第6期18卷 527-530页

作者：步志高江国托王秀荣康丽娟祁贤陈万芳卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

为探讨ＤＮＡ免疫防制传染性支气管炎（ＩＢ）的可能性，以克隆的Ｍａｓｓｃｈｕｓｅｔｅ型类Ｍ４１地方分离ＱＤ株Ｓ１基因为免疫原基因，引入终止密码后插入ＳＶ４０启动子、增强子下游和ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ信号上游，构建了Ｓ１基因... 详细信息

为探讨ＤＮＡ免疫防制传染性支气管炎（ＩＢ）的可能性，以克隆的Ｍａｓｓｃｈｕｓｅｔｅ型类Ｍ４１地方分离ＱＤ株Ｓ１基因为免疫原基因，引入终止密码后插入ＳＶ４０启动子、增强子下游和ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ信号上游，构建了Ｓ１基因ＤＮＡ免疫表达质粒ｐＳＶＱＤＳ１。将大量扩增并经聚乙二醇纯化的ｐＳＶＱＤＳ１溶于ＰＢＳ，以３００μｇ／只的剂量肌肉注射免疫小鼠，于４周后采集分离免疫小鼠血清进行鸡胚病毒中和试验。结果表明，ｐＳＶＱＤＳ１能够诱导产生针对传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株的中和抗体，具有良好的免疫原性。

关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因 DAN免疫家畜

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