检索结果-内蒙古大学图书馆

鸡马立克氏病病毒细菌人工染色体技术展望

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中国家禽 2010年第3期32卷 8-12页

作者：董鹏崔红玉王云峰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 河北北方学院动物科技学院河北张家口075131

鸡马立克氏病病毒反向遗传操纵技术的发展促进了对其生物学特性研究的不断深入,文章回顾了MDV基因操纵技术的发展历程,综述了MDV细菌人工染色体的特点、构建策略、研究进展、应用局限性及未来发展潜力。

关键词：鸡马立克氏病病毒细菌人工染色体

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抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的制备

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黑龙江畜牧兽医 2010年第1期 101-102页

作者：林靖凯赵海玲杜艳芬王春来刘慧芳司微王聃刘思国李广兴广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物科学学院黑龙江哈尔滨150030

为了制备抗牛γ-干扰素(IFN-γ)的单克隆抗体(McAb),并对其部分生物学特性进行初步研究,试验用重组牛IFN-γ蛋白免疫小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术和间接ELISA方法进行试验.结果表明:共获得5株抗IFN-γ的单克隆抗体,Ig亚类鉴定均为IgGI,... 详细信息

为了制备抗牛γ-干扰素(IFN-γ)的单克隆抗体(McAb),并对其部分生物学特性进行初步研究,试验用重组牛IFN-γ蛋白免疫小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术和间接ELISA方法进行试验.结果表明:共获得5株抗IFN-γ的单克隆抗体,Ig亚类鉴定均为IgGI,轻链为k链;经Weatern-blot试验证实5株McAb均能与IFN-γ发生特异性反应,而与其他蛋白不发生反应,特异性好;以5株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备腹水,效价均达到1:50 000以上.

关键词：牛γ-干扰素蛋白免疫单克隆抗体

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猪传染性胸膜肺炎的诊断技术

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兽医导刊 2010年第9期 38-40页

作者：谢芳张艳禾司微刘思国王春来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪传染性胸膜肺炎（PCP）,是一种高度传染性、致死性的呼吸系统传染病。该病的主要特征是急性与亚急性病例呈现纤维素性出血性胸膜肺炎、慢性病例呈现纤维素性坏死性胸膜肺炎。1957年,英国人Pattison等首次发现该病,目前已在世界各国广... 详细信息

猪传染性胸膜肺炎（PCP）,是一种高度传染性、致死性的呼吸系统传染病。该病的主要特征是急性与亚急性病例呈现纤维素性出血性胸膜肺炎、慢性病例呈现纤维素性坏死性胸膜肺炎。1957年,英国人Pattison等首次发现该病,目前已在世界各国广泛流行,造成巨大的经济损失,严重阻碍了世界养猪业的健康发展,

关键词：猪传染性胸膜肺炎诊断技术呼吸系统传染病纤维素性经济损失亚急性致死性出血性

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跨膜蛋白截短突变对马传染性贫血弱毒疫苗株体内复制特性和免疫诱导能力的影响

跨膜蛋白截短突变对马传染性贫血弱毒疫苗株体内复制特性和免疫诱...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：姜成刚高旭马建林跃智赵立平吕晓玲周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

验室前期研究发现马传染性贫血病毒(EIAV)疫苗株EIAVFDDV12的跨膜蛋白gp45在马体内发生高频率W261位点翻译终止突变，使该蛋白C末端出现154个氨基酸的截短。为探讨该突变对病毒特性和机体免疫应答的影响，本研究构建了gp45截短型感染性...

验室前期研究发现马传染性贫血病毒(EIAV)疫苗株EIAVFDDV12的跨膜蛋白gp45在马体内发生高频率W261位点翻译终止突变，使该蛋白C末端出现154个氨基酸的截短。为探讨该突变对病毒特性和机体免疫应答的影响，本研究构建了gp45截短型感染性病毒株EIAVFDDC-TM36，检测该截短突变对ELAV疫苗株体内复制特性的影响，以及对强毒攻击免疫保护率。实验结果表明，在接种马体后167 d内未观察到EIA临床表现，经药物免疫抑制后，EIAVFDDV-TM36接种组免疫抑制前后病毒载量和中和抗体效价差异不显著，而其亲本株EIAVFDDV-3-8接种组4匹马中3匹免疫抑制后病毒载量显著上升，同时组内中和抗体效价明显提高。免疫抑制恢复后进行强毒攻击，EIAVFDDV-TM36接种组的死亡率(75％)高于ELAVFDDV-3-8接种组(33％)。以上结果提示，EIAV疫苗的gp45截短型毒株是适应在体外FDD细胞中传代致弱的变异，导致毒力进一步减弱。跨膜蛋白截短型ELAV作为疫苗更为安全，但降低了免疫诱导能力，提示该疫苗的安全性和有效性在一定程度内呈负相关(相互制约)。

关键词：

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亚洲1型口蹄疫病毒样颗粒腺病毒表达疫苗及其免疫效果

亚洲1型口蹄疫病毒样颗粒腺病毒表达疫苗及其免疫效果

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2010中国微生物学会学术年会

作者：周国辉王海伟王芳于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其病原为口蹄疫病毒(FMDV)。鉴于口蹄疫对世界经济造成的严重危害，国际兽疫局(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将其列为A类传染病之首，我国也将其列在一类动物传染病的第一位... 详细信息

@@口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其病原为口蹄疫病毒(FMDV)。鉴于口蹄疫对世界经济造成的严重危害，国际兽疫局(OIE)和联合国粮农组织(FAO)将其列为A类传染病之首，我国也将其列在一类动物传染病的第一位。疫苗接种是特异性预防FMD的有效手段，安全有效的疫苗是成功地预防、控制乃至最终消灭FMD的先决条件。

关键词：亚洲1型口蹄疫病毒颗粒腺病毒表达疫苗免疫效果

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Leachii支原体研究进展

Leachii支原体研究进展

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2010中国微生物学会学术年会

作者：常继涛于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。呈球形、双球形及丝状的不规则形态，球形直径约100nm-800nm，能繁殖的最小单位为300nm，丝状体直径为100-40... 详细信息

@@支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。呈球形、双球形及丝状的不规则形态，球形直径约100nm-800nm，能繁殖的最小单位为300nm，丝状体直径为100-400nm，长度为3-100um，可通过450nm微孔滤膜，压挤下可通过220nm滤膜。支原体于1898年由Nocard等首次分离，1956年正式命名为支原体，在微生物分类中建立了一个新的独立的纲-柔膜体纲(Mollicutes)，并成为一门独立的学科，即支原体学。目前已经测定的支原体全基因组序列中，生殖支原体(Mycoplasma genitalium)基因组最小，为580kb，穿透支原体(Mycoplasmapeaetrarts)基因组最大，为1358kb。目前分离鉴定的支原体中，大多数为寄生菌或共生菌，部分有致病作用，其致病机理主要是抑制机体的免疫反应，从而导致炎性变化。

关键词： Leachii支原体致病机理免疫反应炎性变化

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多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立

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养猪 2010年第3期 41-44页

作者：岳丰雄崔尚金冉多良戚亭周盛华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-... 详细信息

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。

关键词：多重PCR方法猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒

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O型泛亚谱系口蹄疫病毒cDNA感染性克隆的建立

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中国预防兽医学报 2009年第1期31卷 1-5,15页

作者：杨德成涂亚斌王海伟周国辉于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究采用RT-PCR技术将O型口蹄疫病毒(FMDV)O/YS/CHA/05株全长基因组分4个cDNA片段进行克隆、拼接,构建了具有感染性的FMDV cDNA克隆pOKT7-O/YS/CHA/05。将线性化的pOKT7-O/YS/CHA/05在细胞外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞,经培养... 详细信息

本研究采用RT-PCR技术将O型口蹄疫病毒(FMDV)O/YS/CHA/05株全长基因组分4个cDNA片段进行克隆、拼接,构建了具有感染性的FMDV cDNA克隆pOKT7-O/YS/CHA/05。将线性化的pOKT7-O/YS/CHA/05在细胞外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞,经培养可见典型的细胞病变(CPE)。同时,将线性化的pOKT7-O/YS/CHA/05与含有编码T7 RNA聚合酶的真核表达重组质粒共转染BHK-21细胞,同样也观察到典型的CPE。对拯救的病毒进行RT-PCR扩增、酶切和序列分析鉴定表明,拯救病毒含有不同于亲本病毒的分子标记,即在病毒核酸的3510位人工消除了XbaⅠ酶切位点。免疫电镜观察和间接免疫荧光试验进一步表明,拯救出了FMDV。病毒生长比较试验表明,拯救病毒与亲本病毒具有相似的增殖特性。本研究构建了O型口蹄疫病毒的感染性克隆并获得了拯救病毒,为深入研究FMDV的致病机理以及开发新型疫苗提供了有效的反向遗传操作平台。

关键词：口蹄疫病毒全长cDNA 转录和转染病毒拯救

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猪肺炎霉形体p52基因重组腺病毒的构建及其免疫特性

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 712-717页

作者：曹培丽李媛陈超郭丹王亮乔祖建辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

为构建携带猪肺炎霉形体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)p52基因的重组腺病毒,从Mhp J株扩增p52基因,克隆到穿梭载体pShuttle-CMV中,经PmeⅠ线性化后,电转化入BJ5183菌内,与其含有的骨架载体pAdEasy-1同源重组,再与脂质体混合转染AD-29... 详细信息

为构建携带猪肺炎霉形体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)p52基因的重组腺病毒,从Mhp J株扩增p52基因,克隆到穿梭载体pShuttle-CMV中,经PmeⅠ线性化后,电转化入BJ5183菌内,与其含有的骨架载体pAdEasy-1同源重组,再与脂质体混合转染AD-293细胞,包装成完整的腺病毒,经RT-PCR、间接免疫荧光鉴定后扩增,收集病毒液,免疫BALB/c小鼠,并分析了体液免疫、黏膜免疫和细胞免疫效果。结果表明,重组质粒pShuttle-CMV-P52插入片段为1 202 bp;同源重组成功;重组腺病毒可以正确表达目的蛋白,效价达1×106TCID50/mL。重组病毒经肌肉注射和滴鼻均可诱导小鼠产生血清和肺匀浆液特异性IgG、SIgA,但不能诱导特异的淋巴细胞增殖。证实,成功构建了表达p52基因的重组腺病毒,该病毒可诱发小鼠产生特异的体液免疫和黏膜免疫,但不产生细胞免疫应答。

关键词：猪肺炎霉形体 p52基因重组腺病毒免疫应答

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EIAV弱毒疫苗株和强毒株诱导的特异性体液免疫应答差别

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第12期25卷 1079-1083页

作者：朱振营林跃智王宇宏赵立平朱远茂周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物研究室哈尔滨医科大学第一医院黑龙江哈尔滨150001

目的:通过研究EIAV弱毒疫苗株和强毒株在诱导多种特异性抗体方面的差异,初步探讨特异性体液免疫应答在EIAV弱毒疫苗株保护性免疫中的作用。方法:试验马匹根据接种毒株分为疫苗组和强毒隐性感染组,应用ELISA方法对血清中病毒囊膜蛋白Env... 详细信息

目的:通过研究EIAV弱毒疫苗株和强毒株在诱导多种特异性抗体方面的差异,初步探讨特异性体液免疫应答在EIAV弱毒疫苗株保护性免疫中的作用。方法:试验马匹根据接种毒株分为疫苗组和强毒隐性感染组,应用ELISA方法对血清中病毒囊膜蛋白Env和衣壳蛋白P26结合抗体的滴度、亲和力及Env结合抗体的构象依赖性进行动态实相检测,同时采用细胞蚀斑染色和逆转录酶活性检测方法对中和抗体水平进行同期检测。结果:Env和P26结合抗体的滴度、亲和力、构象依赖性及中和抗体的中和活性均存在一个缓慢上升的过程。对于P26抗体滴度及Env抗体亲和力,疫苗组和强毒隐性感染组仅在病毒接种2个月内,表现为统计学差异(P<0.05)。疫苗组从接种后14d开始,Env抗体的构象依赖性高于强毒隐性感染组(P<0.05),并持续至最后一个监测点。最明显的是,疫苗组诱导产生具有中和强毒特性毒株(EIAVDLV34)和弱毒特性毒株(EIAVFDDV)活性的中和抗体均高于强毒隐性感染组(P<0.05)。结论:弱毒疫苗株和强毒株诱导机体产生结合抗体和中和抗体的时间、水平和性质均存在明显差异,其中中和抗体和构象依赖性抗体的差异,可能是EIAV弱毒疫苗诱导保护性免疫的主要因素之一。

关键词：马传染性贫血病毒弱毒疫苗株抗体亲和力构象依赖性中和抗体

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