检索结果-内蒙古大学图书馆

鸡gga-miR-7b靶基因VDAC1-3’UTR双荧光素酶报告基因质粒的构建

基因组学与应用生物学 2020年第2期39卷 533-538页

作者：肖春婷廉传江易诚陈洪岩东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069 东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

本研究以鸡gga-miR-7b作为研究对象,为了明确与肿瘤形成相关的关键基因VDAC1(Voltage-dependent anion channel 1)是否为gga-miR-7b的靶基因,深入研究gga-miR-7b对VDAC1基因的调控作用,本研究运用TargetScan和miRBD生物学软件预测了gga-miR-7b与VDAC1 m RNA的3’端非编码区(3’UTR)存在种子结合位点(GTCTTCC),并使用PCR克隆以及同源重组突变的方法构建VDAC1-3’UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因重组质粒,经SacⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定及测序结果显示,片段大小符合且序列正确;成功构建了VDAC1-3’UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因重组质粒并命名为pmirGLOVDAC1-wt3’UTR和pmirGLO-VDAC1-mut3’UTR。本研究结果进一步为gga-miR-7b候选靶基因VDAC1的鉴定以及功能研究提供理论依据。

关键词：马立克氏病 gga-miR-7b VDAC1基因 pmirGLO-VDAC1-wt-3’UTR pmirGLO-VDAC1-mut-3’UTR

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CAV-1感染MDCK中各IFN及受体分子表达谱的差异

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实验动物科学 2020年第3期37卷 1-5页

作者：孟兴佟相慧陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069

目的分析犬肾细胞系(MDCK)感染犬腺病毒1型(CAV-1)后各种干扰素(IFN)亚型及其受体分子转录水平的表达情况。方法建立犬IFN-β、IFN-β受体(IFNAR1)、IFN-λ1、IFN-λ1受体(IFN-λ1R)、IFN-λ3和IFN-λ3受体(IFN-λ3R)的染料法定量PCR方... 详细信息

目的分析犬肾细胞系(MDCK)感染犬腺病毒1型(CAV-1)后各种干扰素(IFN)亚型及其受体分子转录水平的表达情况。方法建立犬IFN-β、IFN-β受体(IFNAR1)、IFN-λ1、IFN-λ1受体(IFN-λ1R)、IFN-λ3和IFN-λ3受体(IFN-λ3R)的染料法定量PCR方法,分析了MDCK在PolyⅠ∶C处理和接种CAV-1后细胞内各IFN及受体分子转录水平的相对含量。结果正常MDCK细胞内存在较高含量的IFN-λ3R且含量显著高于其他IFN及受体分子的转录水平;用PolyⅠ∶C处理MDCK细胞24 h后,IFN-λ1R、IFN-λ3和IFN-λ3R的表达量均显著性上调,而IFN-β、IFN-λ1和IFNAR1几乎没变化;接种CAV-1后,IFN-α的含量急剧上升至6倍。结论MDCK细胞存在不同水平浓度的IFN分子及其受体转录产物,且在PolyⅠ∶C刺激和腺病毒感染时受体分子的表达谱不同。

关键词：犬肾细胞系干扰素受体转录表达水平

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兽用疫苗中替代方法的研究进展

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实验动物科学 2018年第1期35卷 67-71页

作者：王兴童韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069

本文介绍了兽用疫苗效力检验和安全检验中替代方法的应用及研究进展,并提出适合建立替代方法的兽用疫苗,以期为我国兽用疫苗替代方法研究提供思路。

关键词：兽用疫苗安全性检验效力检验替代

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抗原处理相关转运体基因多态性与疾病相关性的研究进展

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实验动物与比较医学 2017年第3期37卷 252-256页

作者：王兴童陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室实验动物与比较医学创新团队哈尔滨150069

抗原处理相关转运体(TAP)是一种异二聚体跨膜转运蛋白,具有高度多态性,主要功能是将胞质中加工产生的抗原肽转运到内质网腔,与主要组织相容复合体(MHC)Ⅰ类分子组装形成抗原肽-MHCI复合物后转运至细胞表面,被CD8^+T淋巴细胞识别,诱导机... 详细信息

抗原处理相关转运体(TAP)是一种异二聚体跨膜转运蛋白,具有高度多态性,主要功能是将胞质中加工产生的抗原肽转运到内质网腔,与主要组织相容复合体(MHC)Ⅰ类分子组装形成抗原肽-MHCI复合物后转运至细胞表面,被CD8^+T淋巴细胞识别,诱导机体产生细胞免疫应答。某些特定的人类疾病同TAP的多态性相关,包括多种肿瘤疾病、自身免疫疾病和传染性疾病等。本文就实验动物的TAP基因在与疾病相关性方面的比较医学研究进展做一综述。

关键词：抗原处理相关转运体(TAP) 多态性疾病相关性

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实验用猪感染模型研究概况

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实验动物与比较医学 2019年第4期39卷 253-259页

作者：王玉娥张贺陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

传统的生物医学模型动物在实验设施中易于管理,可快速高效地应用于人类疾病相关基因的基础研究,但在某些情况下,它们无法代表人类生理的复杂性。猪在解剖学和生理学上与人类相似度很高,在人类疾病的相关研究中的应用广泛。本综述回顾了... 详细信息

传统的生物医学模型动物在实验设施中易于管理,可快速高效地应用于人类疾病相关基因的基础研究,但在某些情况下,它们无法代表人类生理的复杂性。猪在解剖学和生理学上与人类相似度很高,在人类疾病的相关研究中的应用广泛。本综述回顾了猪作为人类传染性疾病及自身传染病模型的应用概况,并概述了疫病感染模型的表征及特性。

关键词：实验动物猪感染模型

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鹅细小病毒VP3蛋白抗血清的制备及在鸭胚和鸭胚成纤维细胞中的增殖研究

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实验动物与比较医学 2017年第3期37卷 240-243页

作者：牛银杰刘柏含赵丽丽孙畅陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室实验动物与比较医学创新团队哈尔滨150069

目的制备鹅细小病毒(GPV)VP3衣壳蛋白的兔抗血清,在绍兴麻鸭鸭胚及其成纤维细胞中成功增殖GPV。方法根据GPVH分离株的VP3基因序列构建原核表达载体pET3a-VP3,诱导纯化VP3蛋白,皮下注射免疫新西兰白兔,收集和纯化VP3抗血清,经Western blo... 详细信息

目的制备鹅细小病毒(GPV)VP3衣壳蛋白的兔抗血清,在绍兴麻鸭鸭胚及其成纤维细胞中成功增殖GPV。方法根据GPVH分离株的VP3基因序列构建原核表达载体pET3a-VP3,诱导纯化VP3蛋白,皮下注射免疫新西兰白兔,收集和纯化VP3抗血清,经Western blotting检测VP3抗血清与VP3蛋白的反应性。GPVH株鹅胚尿囊液接种SPF绍兴麻鸭胚和其成纤维细胞,通过PCR反应和间接免疫荧光方法,检测GPV在鸭胚及其成纤维细胞中的增殖。结果成功制备了VP3的兔抗血清,同时GPV在鸭胚及其成纤维细胞中进行良好增殖。结论 VP3抗血清的制备及GPV在绍兴麻鸭鸭胚及成纤维细胞中的增殖实验为GPV分子生物学特性及致病机制的研究奠定基础。

关键词：鹅细小病毒(GPV) VP3基因 VP3抗血清增殖

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不同灭菌方式对羊草营养品质影响的比较研究

不同灭菌方式对羊草营养品质影响的比较研究

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：张圆圆陆涛峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队

目的以干羊草为实验对象,比较辐照灭菌和高压灭菌前后及不同灭菌方法对其营养成分的影响情况。方法采用Co60γ射线进行辐照,高压灭菌,按照国标法测定并计算干羊草灭菌前后干常规养分及纤维素的含量。结果羊草经高压灭菌后干物质、粗纤... 详细信息

目的以干羊草为实验对象,比较辐照灭菌和高压灭菌前后及不同灭菌方法对其营养成分的影响情况。方法采用Co60γ射线进行辐照,高压灭菌,按照国标法测定并计算干羊草灭菌前后干常规养分及纤维素的含量。结果羊草经高压灭菌后干物质、粗纤维显著低于灭菌前(P<0.05),辐照后干物质显著低于灭菌前、显著高于灭菌后高压组(P<0.05);辐照后粗纤维显著低于灭菌前及灭菌后高压组(P<0.05);高压灭菌后粗灰分、粗蛋白、磷含量显著低于灭菌前及辐照组(P<0.05);高压及辐照后无氮浸出物含量较灭菌前显著增加(P<0.05)。结论灭菌过程降低了干羊草营养成分的含量,辐照灭菌总体上对其营养成分造成的损失低于高压灭菌,辐照可作为羊草在反刍实验动物粗饲料中应用的灭菌的方法。

关键词：干羊草辐照灭菌高压灭菌营养成分纤维素

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应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型

应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：王伟姜雪婷李永青庞忠兵孙海阳陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队

TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然免疫反应中发挥重要作用。为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型。根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9 mRNA显微注射到IC... 详细信息

TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然免疫反应中发挥重要作用。为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型。根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9 mRNA显微注射到ICR小鼠受精卵;F0代鼠尾基因组PCR、测序证明敲除了13bp,表

关键词： CRISPR/Cas9 基因敲除小鼠

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MHC单倍型SPF鸭的培育及其TAP基因组序列分析

MHC单倍型SPF鸭的培育及其TAP基因组序列分析

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中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：张晓娜武永淑吴少莲廉传江文辉强陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队兽医生物技术国家重点实验室

引言鸭主要组织相容性复合体（MHC）是一组紧密连锁高度多态的基因簇,其单倍型与宿主的抗病性和免疫应答水平密切相关,其中抗原提呈相关转运蛋白（TAP）基因毗邻MHCⅠ基因。HBK鸭排除了10种特定病原体,现已培育至第8代。本研究对获得的... 详细信息

引言鸭主要组织相容性复合体（MHC）是一组紧密连锁高度多态的基因簇,其单倍型与宿主的抗病性和免疫应答水平密切相关,其中抗原提呈相关转运蛋白（TAP）基因毗邻MHCⅠ基因。HBK鸭排除了10种特定病原体,现已培育至第8代。本研究对获得的HBK鸭MHCⅠ区域基因组序列分析,旨在为鸭MHC基因和TAP基因的结构及功能提供了依据。

关键词：基因组序列分析单倍型 TAP MHC SPF

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Gln对鸭瘟感染鸭十二指肠免疫调节相关基因表达量的影响

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实验动物科学 2015年第3期32卷 10-12,43页

作者：张圆圆赵丽丽王蕾牛银杰韩凌霞刘胜旺陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病创新团队哈尔滨150001

目的为谷氨酰胺(Glutamine,Gln)在正常鸭及鸭瘟(Duck plague,DP)模型中对肠道功能及作用途径的研究提供依据。方法 280只无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)7日龄雏鸭随机分为8组,四组梯度剂量每天灌喂Gln(0、0.5、1、2 g/kg饲料... 详细信息

目的为谷氨酰胺(Glutamine,Gln)在正常鸭及鸭瘟(Duck plague,DP)模型中对肠道功能及作用途径的研究提供依据。方法 280只无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)7日龄雏鸭随机分为8组,四组梯度剂量每天灌喂Gln(0、0.5、1、2 g/kg饲料)6d,及另四组灌喂同等梯度剂量Gln 6 d,于第一天灌喂30 min后攻0.2 m L2000TCID50鸭瘟病毒,观察Gln对正常雏鸭的免疫促进作用及攻毒鸭免疫应激的缓解作用。测定Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)通路基因表达量。结果 Gln显著提高正常组TLR4通路mRNA表达量(P<0.05),显著降低攻毒组表达量(P<0.05)。结论 Gln通过TLR4通路提高正常雏鸭肠道的免疫力,降低鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)造成的肠道免疫损伤。

关键词：谷氨酰胺鸭鸭瘟十二指肠 TLR4通路

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