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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：张志慧危艳武吴洪丽黄立平唐青海李胜斌刘建波张辉刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

背景单纯的猪圆环病毒2型(PCV2)感染通常不会引起猪群严重的临床症状,与其它病原体共感染后就会引发断奶仔猪多系统衰竭综合征等疾病.控制该病的有效手段是疫苗免疫,这一策略己被广泛采用,取得了一定效果.随着疫苗的推广,如何评价PCV2...

背景单纯的猪圆环病毒2型(PCV2)感染通常不会引起猪群严重的临床症状,与其它病原体共感染后就会引发断奶仔猪多系统衰竭综合征等疾病.控制该病的有效手段是疫苗免疫,这一策略己被广泛采用,取得了一定效果.随着疫苗的推广,如何评价PCV2疫苗的免疫效果显得格外重要.几种商品化的PCV2抗体检测试剂盒已问世,这些试剂盒品牌质量各异,还缺乏客观的评价标准.方法以经典的免疫过氧化物酶单层细胞染色试验方法 (IPMA)为基准,对现有的5种商品化的PCV2抗体检测ELISA试剂盒做平行比对试验.先用IPMA法标定的已知不同抗体效价的PCV2阳性血清35份、阴性血清15份,以5种ELISA试剂盒对这些样品进行平行检测,按公式计算试剂盒的敏感性,特异性及符合率.然后,选用其中一种ELISA试剂盒对PCV2疫苗免疫猪血清10份、感染猪血清10份、临床送检猪血清样品159份进行PCV2抗体检测,分析评价PCV2疫苗免疫与自然感染猪血清抗体消长情况.

关键词：

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猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：危艳武夏伟刘长明张志慧黄立平刘建波吴洪丽刘丹李胜斌王一平张辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究从辽宁大连地区一猪场中患有呼吸道综合征的病猪肺脏中分离到一株猪支原体，通过对该菌株的16sRNA基因序列分析证实为猪鼻支原体(Mhr)，命名为Mhr-DL株。将该菌株第5代培养物人工接种SPF巴马小型实验猪，对其致病性进行深入研究... 详细信息

本研究从辽宁大连地区一猪场中患有呼吸道综合征的病猪肺脏中分离到一株猪支原体，通过对该菌株的16sRNA基因序列分析证实为猪鼻支原体(Mhr)，命名为Mhr-DL株。将该菌株第5代培养物人工接种SPF巴马小型实验猪，对其致病性进行深入研究，指出该菌株的保守基因16sRNA序列测定分析结果与已报道的菌株十分相近，为阐明Mhr的致病性及致病机理奠定基础。

关键词：巴马猪猪鼻支原体分离鉴定致病机制

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猪γ-干扰素对猪圆环病毒2型Cap蛋白的免疫增强作用

猪γ-干扰素对猪圆环病毒2型Cap蛋白的免疫增强作用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究采用杆状病毒表达系统表达PCV2-Cap蛋白、猪IFN-γ(PoIFN-γ)以及二者的融合蛋白(Cap-PoIFN-γ)，制备3种PCV2亚单位疫苗:Cap-PoIFN-γ疫苗、PCV2-Cap+PoIFN-γ疫苗及PCV2-Cap疫苗，并经鼠体免疫攻毒试验鉴定3种亚单位疫苗的免疫... 详细信息

本研究采用杆状病毒表达系统表达PCV2-Cap蛋白、猪IFN-γ(PoIFN-γ)以及二者的融合蛋白(Cap-PoIFN-γ)，制备3种PCV2亚单位疫苗:Cap-PoIFN-γ疫苗、PCV2-Cap+PoIFN-γ疫苗及PCV2-Cap疫苗，并经鼠体免疫攻毒试验鉴定3种亚单位疫苗的免疫保护效力，以验证PoIFN-γ作为细胞因子佐剂对PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗是否具有免疫增强作用。结果表明，PCV2-Cap+PoIFN-γ疫苗诱导脾淋巴细胞增殖的能力明显高于Cap-PoIFN-γ疫苗和PCV2-Cap疫苗。

关键词：猪圆环病毒2型蛋白表达 γ-干扰素免疫增强

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猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原中和构象表位的研究

猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原中和构象表位的研究

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：刘建波黄立平危艳武唐青海刘丹王一平李胜斌郭龙军吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

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β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：贺番凌理军廖亚金李素韩文赵碧波孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道.为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿主... 详细信息

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道.为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿主细胞蛋白-β-actin.通过免疫共沉淀、GST pulldown、激光共聚焦以及双分子荧光互补试验验证了E2蛋白与β-actin的相互作用.利用RNA干扰技术沉默β-actin的表达以及用细胞松弛素D在猪瘟感染后4h破坏感染细胞β-actin蛋白的丝状结构,均能显著降低培养上清中的病毒滴度与RNA拷贝数.综上所述,本研究表明β-actin在病毒复制周期的早期参与猪瘟病毒的生长调节.

关键词：猪瘟病毒囊膜蛋白E2 β-actin蛋白基因复制生长调节

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猪圆环病毒基因组复制机制的研究进展

猪圆环病毒基因组复制机制的研究进展

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：张辉唐青海刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本文对近年来有关猪圆环病毒(PCV)基因组结构，以及病毒复制分子机制方面的研究进展进行了综述，以期为该病毒的分子生物学、致病机制和新型疫苗研究提供科学参考。指出，PCV基因组以RCR机制进行复制，这一复制机制在细菌质粒、噬菌体... 详细信息

本文对近年来有关猪圆环病毒(PCV)基因组结构，以及病毒复制分子机制方面的研究进展进行了综述，以期为该病毒的分子生物学、致病机制和新型疫苗研究提供科学参考。指出，PCV基因组以RCR机制进行复制，这一复制机制在细菌质粒、噬菌体、植物和动物病毒中广泛存在，而且病毒的复制需要宿主细胞周期S期表达的酶类分子参与。在病毒感染期间，病毒脱衣壳后单链基因组运输到细胞核中。

关键词：猪圆环病毒致病机制基因组复制分子生物学

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几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用

几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：张志慧刘长明危艳武吴洪丽黄立平李胜斌刘建波张辉王一平刘丹中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究目的是以IPMA法标定的已知PCV2阳性和阴性血清样品为标准样品，对5种商品化的PCV2抗体检测的ELISA试剂盒进行了比较，评价了试剂盒的敏感性、特异性及符合率。选用其中一种试剂盒对PCV2疫苗免疫猪血清、人工感染猪血清及临床自然... 详细信息

本研究目的是以IPMA法标定的已知PCV2阳性和阴性血清样品为标准样品，对5种商品化的PCV2抗体检测的ELISA试剂盒进行了比较，评价了试剂盒的敏感性、特异性及符合率。选用其中一种试剂盒对PCV2疫苗免疫猪血清、人工感染猪血清及临床自然感染猪血清样品进行了抗体检测，旨在了解各种类型猪只对PCV2抗体应答规律，为临床PCV2疫苗免疫评价及流行病学调查提供科学依据。

关键词：猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒基因工程疫苗免疫效果

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猪细环病毒(TTSuVs)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTSuVs遗传变异分析

猪细环病毒(TTSuVs)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTSuVs遗传变异...

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：刘建波郭龙军张龙危艳武黄立平吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

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鸭肠炎病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国兽医杂志 2013年第1期49卷 9-12页

作者：李慧昕刘胜旺韩宗玺邵昱昊刘晓丽华育平刘娣孔宪刚东北林业大学博士后流动站黑龙江省农业科学院博士后工作站黑龙江哈尔滨150086 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV)VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6。抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链。间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆... 详细信息

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV)VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6。抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链。间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆抗体均能够与DEV感染CEF发生特异性反应,而不与CEF对照发生反应。Western blot检测,4株单克隆抗体均能够识别大小约为150kDa的蛋白,说明4株单抗隆抗体是特异性识别VP5蛋白的抗体。DEV VP5蛋白单克隆抗体的制备为进一步鉴定VP5蛋白B细胞抗原表位及VP5蛋白功能研究提供了有效工具。

关键词：鸭肠炎病毒 VP5蛋白单克隆抗体

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重组猪圆环病毒2型Rep/Rep’和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

重组猪圆环病毒2型Rep/Rep’和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：刘丹王一平吴洪丽危艳武唐青海刘建波李胜斌魏萍刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学动物医学院

1引言猪圆环病毒(Porcine circovirus type,PCV)分为PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1广泛存在于猪群不引起临床疾病,PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PCV2又分为PCV2a、PCV2b和PCV2c亚型,其基因组全长1766～1768核... 详细信息

1引言猪圆环病毒(Porcine circovirus type,PCV)分为PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1广泛存在于猪群不引起临床疾病,PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PCV2又分为PCV2a、PCV2b和PCV2c亚型,其基因组全长1766～1768核苷酸(nt),由2个大的反义开放阅读框架(ORF1和ORF2)构成。PCV2-ORF2由702nt编码233个氨基酸(aa),Cap蛋白构成病毒核衣

关键词：亚单位疫苗 Cap Rep/Rep PCV 猪圆环病毒免疫保护性

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