检索结果-内蒙古大学图书馆

2012年-2013年我国养猪重点省份猪流感的血清学调查

中国预防兽医学报 2014年第6期36卷 431-434页

作者：刘丽萍乔传玲杨焕良隋金钰王昌建陈艳邱立新唐小明何世成陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410002

为进一步了解我国猪流感病毒（SIV）的流行现状，本研究于2012年10月至2013年12月从全国养猪重点省份的养殖场、屠宰场采集猪血清样品共计5 856份，以类禽型H1N1（EA H1N1）、2009甲型H1N1（pdm/09 H1N1）和H3N2亚型SIV 抗原作为标准抗... 详细信息

为进一步了解我国猪流感病毒（SIV）的流行现状，本研究于2012年10月至2013年12月从全国养猪重点省份的养殖场、屠宰场采集猪血清样品共计5 856份，以类禽型H1N1（EA H1N1）、2009甲型H1N1（pdm/09 H1N1）和H3N2亚型SIV 抗原作为标准抗原，采用血凝抑制（HI）试验方法进行抗体检测。结果显示，我国猪群中SIV抗体阳性率分别为55.52 %、13.92 %和2.00 %，其中EA H1N1 SIV抗体平均阳性率高于其它亚型。2013年1月和3月份，又集中在广东和湖南两个省份的部分养殖场和屠宰场采集猪血清样品共计9 910份，采用ELISA进行抗体检测。结果共检出阳性血清3 518份，平均阳性率分别为36.14 %和34.89 %。本实验结果表明2012年～2013年我国猪群中SIV感染比较普遍。

关键词：猪流感血清学抗体血凝抑制 ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究

引用

中国预防兽医学报 2014年第1期36卷 71-72,80页

作者：刘宁时洪艳陈建飞冯力张鑫胡桂学吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了解猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白在ST细胞中的定位情况,本研究将CSFV C蛋白基因克隆于真核表达载体pEGFP-C2中,构建重组质粒pEGFP-CSFV-C。将该重组质粒转染ST细胞,转染2 h、4 h和6 h后利用激光共聚焦显微镜分析C表达蛋白在细胞中的定... 详细信息

为了解猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白在ST细胞中的定位情况,本研究将CSFV C蛋白基因克隆于真核表达载体pEGFP-C2中,构建重组质粒pEGFP-CSFV-C。将该重组质粒转染ST细胞,转染2 h、4 h和6 h后利用激光共聚焦显微镜分析C表达蛋白在细胞中的定位情况。结果表明,CSFV表达蛋白在ST细胞中主要定位于细胞质和核仁。本研究为进一步分析CSFV的复制机理提供依据。

关键词：猪瘟病毒衣壳蛋白 ST细胞核仁定位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因新型原核温控表达载体的构建

引用

中国预防兽医学报 2014年第9期36卷 688-691页

作者：田秋丰于申业衣菲倪宏波吕雪莲刘思国黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

单核细胞增生李斯特菌的prfA基因编码一个温度控制启动蛋白,具有在37℃条件下启动下游基因表达的功能。为构建新型原核温控诱导表达载体,本研究利用PCR方法扩增prfA基因,并将其与绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(DsRed)基因分别插入到p... 详细信息

单核细胞增生李斯特菌的prfA基因编码一个温度控制启动蛋白,具有在37℃条件下启动下游基因表达的功能。为构建新型原核温控诱导表达载体,本研究利用PCR方法扩增prfA基因,并将其与绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(DsRed)基因分别插入到pET-28a和pUC19载体中,构建重组质粒pET-prfA-EGFP和pUC-prfA-DsRed。将重组质粒转化大肠杆菌DH5α,在37℃条件下培养,利用激光共聚焦显微镜观测细菌中荧光蛋白的表达情况。结果表明,构建的两种重组质粒的荧光蛋白基因于37℃条件下,在受体菌中均获得有效表达,而30℃时则仅有微弱的本底荧光蛋白表达。本研究构建了以最适生理温度为单一诱导条件的温控表达的新型原核细胞表达载体,为蛋白的表达与功能研究提供了新的平台。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 prfA基因温控表达荧光蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

通过改进Red重组方法快速构建肠炎沙门菌毒力岛SPI-1缺失株

引用

中国预防兽医学报 2014年第11期36卷 852-855页

作者：吕雪莲于申业倪宏波衣菲田秋丰刘思国黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

沙门菌依赖毒力岛SPI-1编码的Ⅲ型分泌系统在侵染宿主肠道上皮细胞中起重要作用。为制备沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,本研究利用PCR扩增毒力岛SPI-1上下游同源臂和含有氯霉素抗性基因片段,连接p ET-28a构建打靶质粒,采用电击法将其转入含有... 详细信息

沙门菌依赖毒力岛SPI-1编码的Ⅲ型分泌系统在侵染宿主肠道上皮细胞中起重要作用。为制备沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,本研究利用PCR扩增毒力岛SPI-1上下游同源臂和含有氯霉素抗性基因片段,连接p ET-28a构建打靶质粒,采用电击法将其转入含有p KD46a质粒的肠炎沙门菌中。经L-阿拉伯糖诱导同源重组后,鉴定阳性重组子,转化诱导产生重组酶FLp的p CP20质粒,从而删除氯霉素抗性基因,通过PCR方法鉴定缺失株,命名为SM6ΔSPI-1。连续培养鉴定表明缺失株具有良好的遗传稳定性。生长特性研究显示缺失株生长速率高于野生菌株。本研究利用改进的Red重组系统通过一步法构建了肠炎沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,为沙门菌毒力岛的功能研究与基因工程减毒疫苗研制奠定了基础。

关键词：毒力岛SPI-1 Red同源重组缺失株

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达兔出血症病毒VP60蛋白重组牛疱疹病毒1型的构建及免疫原性分析

引用

中国预防兽医学报 2014年第8期36卷 597-601页

作者：黄艳秋原冬伟刘行波刘家森陈淑慧单丽玲郭东春姜骞崔玉东薛飞曲连东黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163310 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人兽共患病研究团队黑龙江哈尔滨150001

为制备表达兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白的重组病毒疫苗,本研究将RHDV VP60基因插入到CMV启动子下,构建牛疱疹病毒1型(BoHV-1)gE基因缺失转移载体,利用磷酸钙介导转染法将该转移载体与gE基因缺失的亲本病毒基因组DNA共转染牛肺细胞,制备... 详细信息

为制备表达兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白的重组病毒疫苗,本研究将RHDV VP60基因插入到CMV启动子下,构建牛疱疹病毒1型(BoHV-1)gE基因缺失转移载体,利用磷酸钙介导转染法将该转移载体与gE基因缺失的亲本病毒基因组DNA共转染牛肺细胞,制备了表达RHDV VP60基因的重组BoHV-1(rBoHV-1/gE-/VP60)。通过PCR、western blot及间接免疫荧光鉴定表明VP60基因在rBoHV-1/gE-/VP60中获得表达。并且体内试验表明重组病毒能够有效诱导小鼠产生RHDV特异性抗体。本研究构建了表达RHDV VP60基因的rBoHV-1/gE-/VP60,为研制预防兔出血症的BoHV-1活载体疫苗奠定了基础。

关键词：兔出血症病毒 VP60基因牛疱疹病毒1型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

传染性法氏囊病病毒自然重配株全基因组序列分析

引用

中国兽医学报 2014年第2期34卷 219-226页

作者：朱向东王永山欧阳伟潘群兴毕振威李月华范红结王笑梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

从具有新的流行病学特征的传染性法氏囊病（IBD）发病鸡群中分离到2株传染性法氏囊病病毒（IBDV），分别命名为QL和ZZ—ll，对4周龄SPF鸡的致死率分别为94％和86％。为分析该毒株的分子生物学特征，对其全基因组序列进行了测定，2个病... 详细信息

从具有新的流行病学特征的传染性法氏囊病（IBD）发病鸡群中分离到2株传染性法氏囊病病毒（IBDV），分别命名为QL和ZZ—ll，对4周龄SPF鸡的致死率分别为94％和86％。为分析该毒株的分子生物学特征，对其全基因组序列进行了测定，2个病毒株基因组A节段长度为3260bp、B节段长度2827bp。病毒演化分析结果显示2个病毒基因组A节段的核苷酸序列与已发表的强毒株序列的同源性分别为96．8％～98．1％和96．9％～98．4％，处在IB—DV超强毒株分支上；而B节段与已发表的弱毒株序列的同源性分别为89．7％～90．4％和90．0％～90．7％，位于弱毒株分支上。IBDV超强毒株和弱毒株序列特征氨基酸残基与基序分析表明，QL和ZZ—11两个病毒株的A节段VP2基因的氨基酸残基为222A、249Q、253Q、254G、256I、294I和299S，七肽基序为SWSASGS，均符合超强毒株的分子特征；而B节段777～782位核苷酸序列为GGTGCC，没有KpnI酶切位点，具有弱毒株的序列特点。以上分析结果表明，QL和ZZ—11为IBDV自然重配株，A节段源于超强毒株，而B节段源于弱毒株。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 病毒演化重配病毒序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪圆环病毒2型重组病毒分离株的鉴定

引用

动物医学进展 2014年第6期35卷 26-31页

作者：李海超韩凌霞东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了解某猪场猪圆环病毒2型（PCV-2）的流行及毒株基因组变异情况，应用 PCR 方法从6个疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）病死猪的心脏、淋巴结、脾脏和肺脏等病料中进行猪圆环2型病毒的检测，并对阳性病料进行 PCV-2全基因组的扩... 详细信息

为了解某猪场猪圆环病毒2型（PCV-2）的流行及毒株基因组变异情况，应用 PCR 方法从6个疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）病死猪的心脏、淋巴结、脾脏和肺脏等病料中进行猪圆环2型病毒的检测，并对阳性病料进行 PCV-2全基因组的扩增，将成功扩增到的6株 PCV-2全基因组克隆到 pMD-18T Simple Vector，构建重组质粒。对全基因组进行测序，然后对全基因组进行同源性、遗传进化、重组以及毒力分析。结果表明，6株 PCV-2基因组长度均为1767 bp，与参考序列的同源性在88．1％～99．6％之间，并且 LNF3、HEBF5和 HEN65为 PCV-2b1C 基因型，LN51为 PCV-2b1B 基因型，HEN60株为 PCV-2b1A 基因型，HEBF7属于 PCV-2a，但不属于任何亚型，可能为 PCV-2a 向 PCV-2b 的过渡株。利用重组分析软件RDP4．25和 SIMPLOT3．5．1分析，表明 LN51株可能来自 PCV-2a2A 和 PCV-2b1A 基因型的重组。根据PCV-2 Cap 的76位和131位氨基酸残基，有5株符合强毒特征（76I、131T），而 HEBF7株存在强、弱毒的特征。本研究为我国 PCV-2流行株的分子特征研究提供了参考。

关键词：猪圆环病毒2型毒力重组基因型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型转移载体的构建及真核表达

引用

中国兽医科学 2014年第8期44卷 829-832页

作者：郭焕平张守发高洋贾洪林贾立军延边大学农学院动物医学系吉林延吉133002 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室美国密西根州立大学天然免疫联合实验室黑龙江哈尔滨150001

为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒pBS-TK-NcAMA1,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,扩增犬新孢子虫AMA1基因,并将其亚克隆至重组质粒pBS-TK。通过转染试剂PEI将pBS-TK-NcAMA1转移载体转染至293... 详细信息

为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒pBS-TK-NcAMA1,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,扩增犬新孢子虫AMA1基因,并将其亚克隆至重组质粒pBS-TK。通过转染试剂PEI将pBS-TK-NcAMA1转移载体转染至293T细胞,以制备的小鼠抗犬新孢子虫AMA1蛋白的特异性抗体为一抗,应用间接免疫荧光试验和Western-blot对基因的表达情况进行鉴定。结果显示,构建的病毒转移载体pBS-TK-NcAMA1可以在293T细胞内获得表达,表达蛋白的分子质量为68ku。这一研究成果为犬新孢子虫AMA1基因的重组猫疱疹病毒1型载体疫苗的研制奠定了基础。

关键词：犬新孢子虫 NcAMA1基因猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

两种阿卡斑病毒抗体ELISA检测方法的建立与初步应用

引用

中国预防兽医学报 2014年第4期36卷 289-292页

作者：刘晓婧王芳赵权于力吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊传染病研究创新团队黑龙江哈尔滨150001

为建立阿卡斑病ELISA血清学诊断方法,本研究利用原核表达的阿卡斑病毒(AKAV)核衣壳(N)蛋白和全病毒作为包被抗原,分别建立两种AKAV抗体的间接ELISA检测方法,并对其反应条件进行优化。应用两种间接ELISA检测方法分别对不同省份来源的247... 详细信息

为建立阿卡斑病ELISA血清学诊断方法,本研究利用原核表达的阿卡斑病毒(AKAV)核衣壳(N)蛋白和全病毒作为包被抗原,分别建立两种AKAV抗体的间接ELISA检测方法,并对其反应条件进行优化。应用两种间接ELISA检测方法分别对不同省份来源的247份牛血清样本进行检测,与中和试验结果进行比较。结果表明,中和试验抗体检出阳性率为29.55%,N蛋白间接ELISA(N-ELISA)和AKAV全病毒间接ELISA(AKAV-ELISA)与中和试验的符合率分别为72.5%和76.5%。本研究建立的N-ELISA及AKAV-ELISA方法均可以用于AKAV感染的流行病学调查。其中,N-ELISA方法安全性好,更适合推广应用。

关键词：阿卡斑病毒核衣壳N蛋白间接ELISA 中和试验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

巴马小型猪主要固有免疫分子的克隆及序列分析

引用

黑龙江畜牧兽医 2014年第11期 13-16,21页

作者：胡晓亮姜骞郭东春刘家森仇铮林欢刘培欣田进李志杰曲娟娟曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学资源与环境学院哈尔滨150030 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

为了开展巴马猪的固有免疫相关研究,试验采用巴马小型猪的外周血分离淋巴细胞,提取总RNA,利用特异性引物进行RT-PCR,将克隆片段与pc DNA3.1载体相连接,转化到大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆并进行测序,并将测序结果提交NCBI,比较克隆序... 详细信息

为了开展巴马猪的固有免疫相关研究,试验采用巴马小型猪的外周血分离淋巴细胞,提取总RNA,利用特异性引物进行RT-PCR,将克隆片段与pc DNA3.1载体相连接,转化到大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆并进行测序,并将测序结果提交NCBI,比较克隆序列与已知序列的同源性。结果表明:克隆的巴马猪TLR7、TLR8、TLR9、VISA、STING和IRF3序列长度分别为3 075,3 087,3 097,1 575,1 260,1 137 bp,测序结果与预期相符,各序列与猪的同源性较高。

关键词：巴马小型猪固有免疫克隆序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：