检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2022年第4期44卷 382-387,422页

作者：罗丹刘芮高玉龙李凯刘长军祁小乐崔红玉张艳萍潘青高立王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

为了建立新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)动物感染模型,本研究利用NDRV代表株SD19/6201,分别以10^(5.0)ELD_(50)/0.1 mL(低剂量)和10^(6.0) ELD_(50)/0.1 mL(高剂量)感染14日龄、21日龄SPF麻鸭,分别于感染后第5 d、第7 d迫杀雏鸭,观察脾脏剖检... 详细信息

为了建立新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)动物感染模型,本研究利用NDRV代表株SD19/6201,分别以10^(5.0)ELD_(50)/0.1 mL(低剂量)和10^(6.0) ELD_(50)/0.1 mL(高剂量)感染14日龄、21日龄SPF麻鸭,分别于感染后第5 d、第7 d迫杀雏鸭,观察脾脏剖检变化并统计其病变率。结果显示,14日龄雏鸭低剂量感染组在感染后第5 d脾脏病变以出血点/斑为主,病变率为70%(7/10),感染后第7 d脾脏上述病变更加明显,病变率为80%(8/10);高剂量感染组雏鸭剖检脾脏病变比低剂量感染组明显,出现黄白色坏死灶,感染后第5 d、第7 d脾脏病变比率分别为100%(10/10)和90%(9/10)。21日龄低剂量感染组雏鸭感染后第5 d、第7 d脾脏出血或坏死的比率明显低于相同剂量的14日龄雏鸭感染组,脾脏病变率分别为60%(6/10)和40%(4/10),高剂量感染组雏鸭感染后第5 d、第7 d脾脏出现出血、坏死的比率均为80%(8/10)。14日龄和21日龄雏鸭感染后第5 d不同剂量感染组脾脏指数均明显高于对照组,感染后第7 d各感染组雏鸭脾脏肿大程度有所恢复,脾脏指数与对照组差异不明显,但脾脏坏死症状并未恢复。脾脏病理变化结果显示,与14日龄雏鸭感染组相比,21日龄雏鸭感染组脾脏组织病理变化程度更轻,与剖检病变基本一致。采用TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测各组雏鸭脾脏病毒载量,结果显示,感染后第5 d即可在各感染组雏鸭脾脏中检测到大量的病毒,且14日龄雏鸭感染组脾脏病毒载量高于21日龄雏鸭感染组,各日龄感染雏鸭高剂量感染组脾脏病毒载量均高于低剂量感染组。以上结果表明,NDRV对14日龄雏鸭最佳感染剂量是10^(5.0)ELD_(50)/0.1 mL,NDRV对21日龄雏鸭最佳感染剂量是10^(6.0) ELD_(50)/0.1 mL,最佳剖检时间为感染后第7 d。本研究首次建立了NDRV动物感染模型,为该病毒后期疫苗质量标准的研究提供了重要依据。

关键词：新型鸭呼肠孤病毒动物感染模型感染剂量脾脏出血或坏死

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蓝舌病在全球的分布概况

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畜牧兽医学报 2021年第4期52卷 881-890页

作者：李茂林张七斤徐青元中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069 内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018

蓝舌病为OIE规定的需通报疫病,我国将其列为一类动物疫病。该病已经给全球大部分流行地区造成巨大经济损失。我国于1979年首次证明该病存在,且在我国流行初期即造成大量易感动物死亡,给我国畜牧业带来了重大经济损失。但蓝舌病在我国仍... 详细信息

蓝舌病为OIE规定的需通报疫病,我国将其列为一类动物疫病。该病已经给全球大部分流行地区造成巨大经济损失。我国于1979年首次证明该病存在,且在我国流行初期即造成大量易感动物死亡,给我国畜牧业带来了重大经济损失。但蓝舌病在我国仍属冷门研究方向,我国到底分离鉴定出多少个血清型的蓝舌病病毒,该病在我国的分布范围到底有多广?许多畜牧兽医工作者对这些问题并不是非常清楚。特别是在近年来鲜有蓝舌病引起动物发病死亡报道的前提下,人们对蓝舌病的重视程度进一步降低。本文对蓝舌病在全球的流行概况进行简要阐述,同时,对蓝舌病在我国40年的流行情况进行回顾,希望该病在我国能够得到足够的重视。

关键词：蓝舌病疫病监测病毒分离疫病流行

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两株H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化及其致病性分析

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中国预防兽医学报 2021年第9期43卷 913-919页

作者：房敬真侯玉杰尹馨王冬雪邓国华崔鹏飞施建忠陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子特征及其对家禽和哺乳动物小鼠的致病性,本研究对2020年分离到的两株H9N2亚型AIV:A/chicken/Jiangsu/S1625/2020(H9N2)(简称CK/JS/S1625/2020)株和A/duck/Sichuan/S1537/2020(H9N2)(简称DK/SC/S1537/2020)株,进行了基因组测序、序列分析及其对SPF鸡、鸭和BALB/c小鼠的致病力评价。同源性分析结果显示,两株病毒HA和NA基因的同源性分别为93.3%和95.8%,其编码氨基酸序列的同源性分别为95.4%和95.9%,同源性较低。且两株病毒HA蛋白裂解位点分别为^(333)PSRSSR↓GLF^(341)、^(333)PSRSNR↓GLF^(341),均不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)HA序列特征。两株病毒的HA蛋白均为典型的人源受体结合特征,即^(155)T、^(183)N和^(226)L。遗传演化分析结果显示,两株病毒的HA、NA基因均属于欧亚分支,但二者的亲缘关系较远。鸡感染性试验结果显示,CK/JS/S1625/2020株感染组鸡可通过喉头和泄殖腔向外界环境排毒。虽然在全部鸡的喉头中检测到了DK/SC/S1537/2020株,但仅在部分鸡的泄殖腔检测到了该病毒,且喉头的排毒量明显高于泄殖腔。鸡血清抗体检测结果显示,两株病毒感染鸡血清的HI抗体全部阳转,效价在1:128~1:2048。表明,鸡源H9N2病毒比鸭源H9N2病毒在鸡体内的适应性和复制能力更强;鸭感染性试验结果显示,两株病毒均只能通过鸭的喉头向外界环境排毒,但病毒滴度均较低,且均不能在鸭体内有效复制;小鼠感染性试验结果显示,两株病毒仅能在小鼠的鼻甲中有效复制,而在小鼠的脑、脾脏和肾脏中均未检测到病毒。以上结果表明两株H9N2亚型AIV对家禽和小鼠均呈低致病力。本研究为进一步了解H9N2 AIV提供了一定的参考数据,有必要对自然界中传播的H9N2流感病毒持续监测和进化分析。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型遗传演化分析致病性

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B亚型禽偏肺病毒的分离鉴定及致病性研究

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畜牧兽医学报 2022年第10期53卷 3540-3549页

作者：于蒙蒙包媛玲王素艳辛子琪刘鹏冯笑艳孟令宅郭茹张艳萍刘长军祁小乐李俊平王笑梅高玉龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病创新团队哈尔滨150069 中国兽医药品监察所北京100081 扬州大学江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心扬州225009

旨在确定我国部分养鸡场的鸡出现甩头、精神萎靡和肿头综合征是否由禽偏肺病毒(aMPV)引起,本研究从山东、福建、黑龙江等地的发病蛋鸡和肉鸡场采集鼻甲骨、气管和肺等样品,首先利用aMPV特异性的RT-PCR方法对临床样品进行初步检测,将RT-... 详细信息

旨在确定我国部分养鸡场的鸡出现甩头、精神萎靡和肿头综合征是否由禽偏肺病毒(aMPV)引起,本研究从山东、福建、黑龙江等地的发病蛋鸡和肉鸡场采集鼻甲骨、气管和肺等样品,首先利用aMPV特异性的RT-PCR方法对临床样品进行初步检测,将RT-PCR检测阳性样品接种Vero细胞进行病毒分离,然后利用G/F基因序列分析及间接免疫荧光试验(IFA)等鉴定病毒的亚型,最后将分离株感染SPF鸡进行致病性分析。结果显示:在采集的220份样品中,RT-PCR检测结果显示,有3份鼻甲骨样品在228bp左右出现特异性条带,将阳性病料接种Vero细胞盲传5代后,细胞出现变圆、聚集和融合等aMPV特征性细胞病变(CPE),表明成功分离到3株aMPV,将其分别命名为SD2001、SD2002和HLJ2101。G和F基因同源性分析显示,来自蛋鸡的SD2001、SD2002和来自肉鸡的HLJ2101分离株的G和F基因与其他B亚型aMPV毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性均较高,核苷酸的相似性分别为93.4%~98.6%和95.6%~100.0%,氨基酸的相似性分别为88.7%~97.8%和97.6%~100.0%;而与A、C和D亚型的G和F基因同源性较低,核苷酸的相似性分别为27.1%~61.8%和66.8%~74.8%,氨基酸的相似性分别为16.1%~36.7%和72.5%~86.5%,这些结果表明,SD2001、SD2002和HLJ2101分离株属于B亚型aMPV。进一步利用B亚型aMPV特异性的阳性血清进行IFA检测,接种SD2001、SD2002和HLJ2101的Vero细胞均可以观察到特异性的绿色荧光信号,进一步证实3个分离株属于B亚型aMPV。选择SD2001感染3周龄SPF鸡进行了致病性研究,结果发现SPF鸡感染后3~6d出现精神萎靡、甩头和流鼻涕等症状,鼻甲骨、气管和肺也出现病理性损伤,其发病率为90%(18/20)。3株B亚型aMPV的分离不仅有助于明确我国部分养鸡场出现肿头综合征的发病原因,同时也证实B亚型aMPV流行毒株对鸡有明显的致病性,这些结果为我国家禽疫病的诊断和有效防控提供了重要理论依据。

关键词： B亚型禽偏肺病毒分离鉴定致病性

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单细胞RNA测序技术在病毒研究中的应用

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遗传 2020年第3期42卷 269-277页

作者：屈亮李素仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069

单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing, scRNA-seq)技术已经成为不同领域中研究细胞异质性的有效工具。在病毒研究领域中,利用该技术分析病毒和细胞的转录组,可以在单细胞水平上检测病毒感染的动态变化,了解病毒与细胞间复杂的相... 详细信息

单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing, scRNA-seq)技术已经成为不同领域中研究细胞异质性的有效工具。在病毒研究领域中,利用该技术分析病毒和细胞的转录组,可以在单细胞水平上检测病毒感染的动态变化,了解病毒与细胞间复杂的相互作用。本文简述了scRNA-seq技术,着重介绍病毒感染宿主细胞后scRNA-seq研究的最新进展,同时也描述了细胞周期、基因表达、细胞状态等细胞异质性对病毒感染过程的影响,以及病毒变异对其本身感染过程的影响。此外,本文还分析了scRNA-seq在研究病毒–宿主互作动态变化方面具有的独特优势,及其在病毒研究领域中广阔的应用前景,为揭示病毒的感染与致病机制、抗病毒靶标的开发等提供参考。

关键词：单细胞RNA测序技术细胞异质性病毒感染

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抗犬细小病毒VP2蛋白单链抗体的制备与中和活性研究

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中国生物工程杂志 2020年第4期40卷 10-16页

作者：李彤彤宋彩玲杨凯越王文静陈慧宇刘明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069

为了减轻鼠源单克隆抗体(McAb)异源性引起的宿主免疫排斥反应,同时克服生产McAb成本高及费时费力等缺点,利用原核表达制备具有抗犬细小病毒(CPV)鼠源抗体可变区基因的单链抗体(single chain antibody fragment,ScFv)。提取实验室前期制... 详细信息

为了减轻鼠源单克隆抗体(McAb)异源性引起的宿主免疫排斥反应,同时克服生产McAb成本高及费时费力等缺点,利用原核表达制备具有抗犬细小病毒(CPV)鼠源抗体可变区基因的单链抗体(single chain antibody fragment,ScFv)。提取实验室前期制备筛选的分泌具有良好中和活性抗CPV VP2蛋白McAb的杂交瘤细胞株总RNA,从反转录cDNA中扩增抗体重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因并克隆到表达载体中,构建重组质粒p OPE101-ScFv;将重组质粒转化大肠杆菌进行诱导表达,通过蛋白免疫印迹(Western blot)实验、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)证明,利用大肠杆菌表达系统获得的ScFv具有和CPV特异性结合的能力,且具有中和活性,效价为1:20(0.028μg/ml),为CPV的临床免疫治疗提供基础。

关键词：犬细小病毒单链抗体原核表达

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鸭源新城疫病毒强毒株感染对番鸭致病性和β-防御素基因表达的影响

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中国动物传染病学报 2021年

作者：侯雨彤陈玉秋张莉莉马得莹东北农业大学动物科学技术学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

为了探讨鸭源新城疫病毒（Newcastlediseasevirus，NDV）感染对番鸭β-防御素（Avianβ-Defensin，AvBD）基因表达的影响，本实验选取80只15日龄SPF番鸭，将其随机分为两组，每组40只。其中一组以滴鼻点眼方式接种10;EID;/0.2mL的鸭源... 详细信息

为了探讨鸭源新城疫病毒（Newcastlediseasevirus，NDV）感染对番鸭β-防御素（Avianβ-Defensin，AvBD）基因表达的影响，本实验选取80只15日龄SPF番鸭，将其随机分为两组，每组40只。其中一组以滴鼻点眼方式接种10;EID;/0.2mL的鸭源基因Ⅶ型NDVMd/CH/LGD/1/2005毒株。另一组以相同途径接种等量灭菌的磷酸盐缓冲液，作为对照组。攻毒后持续观察临床症状25d。并在攻毒后36h、72h、7d和25d每组分别剖杀10只番鸭，采集五个免疫器官的样品，包括骨髓、脾脏、盲肠扁桃体、哈德氏腺和法氏囊，运用real-timeRT-PCR方法检测其中11种防御素基因表达量的变化差异。并在攻毒后36h、72h、7d以及16d、20d和25d每组各采集10只番鸭的血清，用血凝抑制试验（Hemagglutinationinhibition，HI）检测新城疫病毒特异性抗体水平。结果表明，番鸭感染该鸭源NDV强毒株后出现新城疫病毒感染的典型临床症状，死亡率为7.5%。感染番鸭体内组织中AvBD1、2、5、10 在广泛表达，且AvBD3、5、7 在法氏囊内均有不同程度表达上调。番鸭感染该鸭源NDV强毒株后72 h开始抗体开始转阳，第7 d即达到高峰，之后16 d、20 d和25 d的抗体水平趋于平稳。以上结果表明，该鸭源NDV强毒株感染可在番鸭体内诱导产生抗病毒免疫应答反应。

关键词：新城疫病毒番鸭防御素基因表达

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抗菌肽LL-37体外抗猪链球菌活性的研究

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中国预防兽医学报 2022年第4期44卷 423-427页

作者：金明洁张会会梁思宇张跃灵谢芳刘思国东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队黑龙江哈尔滨150069

为探究抗菌肽LL-37对猪链球菌(SS)的体外抑菌作用,本研究通过化学合成法制备抗菌肽LL-37,测定其对猪链球菌2型(SS2)的最低抑菌浓度(MIC),结果显示LL-37对4株SS2临床分离株的MIC值为4μmol/L~8μmol/L,抑菌效果良好;绘制SS2在1μmol/L LL... 详细信息

为探究抗菌肽LL-37对猪链球菌(SS)的体外抑菌作用,本研究通过化学合成法制备抗菌肽LL-37,测定其对猪链球菌2型(SS2)的最低抑菌浓度(MIC),结果显示LL-37对4株SS2临床分离株的MIC值为4μmol/L~8μmol/L,抑菌效果良好;绘制SS2在1μmol/L LL-37条件下的生长曲线,结果显示1μmol/L LL-37即可对SS2的增殖有抑制作用;通过杀菌试验分析LL-37对SS2的杀菌活性,结果显示4μmol/L LL-37能完全杀灭SS2;借助激光共聚焦显微镜(CLSM)评价LL-37对SS2的杀伤作用,结果显示LL-37能够破坏和杀伤SS2的膜结构;使用透射电镜观察LL-37作用后SS2细胞形态的变化情况,结果显示LL-37能使SS2膜结构破坏、内容物流出;采用96孔板微量法检测LL-37对SS2生物被膜(BF)形成的抑制作用,结果显示LL-37能抑制SS2 BF的生成,抑制效果随剂量增加而增强。本研究明确了抗菌肽LL-37对SS2具有抑菌和杀菌作用,进一步利用激光共聚焦显微镜和透射电镜证实了抗菌肽LL-37通过作用于BF对SS2发挥抑菌和杀菌作用的方式,为抗链球菌感染和促进LL-37的临床应用提供了实验依据。

关键词： LL-37 猪链球菌抗菌

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囊膜蛋白的糖基化修饰对病毒感染和致病性影响的研究进展

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中国预防兽医学报 2022年第4期44卷 449-453页

作者：赵小天袁梦淇张新杨晓柯马吉飞李永锋仇华吉天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 河南科技学院河南新乡453003

糖基化(Glycosylation)是指蛋白质或脂质在酶的作用下连接糖链的一种修饰形式。作为生物体内最重要的蛋白质翻译后修饰形式之一,糖基化调控了蛋白质在组织和细胞中的定位、功能、活性、寿命和多样性[1-2]。细胞内超过50%的蛋白质均有糖... 详细信息

糖基化(Glycosylation)是指蛋白质或脂质在酶的作用下连接糖链的一种修饰形式。作为生物体内最重要的蛋白质翻译后修饰形式之一,糖基化调控了蛋白质在组织和细胞中的定位、功能、活性、寿命和多样性[1-2]。细胞内超过50%的蛋白质均有糖链的修饰,它们参与了包括细胞识别、细胞分化、发育、信号转导、免疫应答等在内的各种重要的生命活动。在多种疾病,如肿瘤。

关键词：囊膜蛋白免疫应答蛋白质翻译后修饰病毒感染细胞识别糖基化修饰细胞分化糖链

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1例猫肾上腺皮质癌脾转移的病理及免疫组化分析

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畜牧兽医学报 2021年第12期52卷 3669-3674页

作者：邓朝阳王峥张佳韧何希君郑家三黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069

猫的肾上腺皮质癌转移至脾在兽医临床非常罕见。在本报告中,描述了1例10岁田园猫,其症状表现为腹部疼痛,频繁呕吐,消瘦,有慢性肾上腺功能损伤病史,影像学检查脾肿大。对患猫进行脾摘除手术,并对摘除的组织进行组织病理学检查和免疫组化... 详细信息

猫的肾上腺皮质癌转移至脾在兽医临床非常罕见。在本报告中,描述了1例10岁田园猫,其症状表现为腹部疼痛,频繁呕吐,消瘦,有慢性肾上腺功能损伤病史,影像学检查脾肿大。对患猫进行脾摘除手术,并对摘除的组织进行组织病理学检查和免疫组化分析。病理组织学结果显示,肿瘤细胞具有丰富的脂质样空泡,细胞体积大,有丝分裂象多见,且肿瘤细胞已发生血管侵袭,细胞核浓染;免疫组织化学结果显示,synaptophysin、S-100和GATA4阳性表达。根据病理组织学和免疫组织化学及病史和实验室检查,最后诊断为肾上腺皮质癌的脾转移。首次报道了猫肾上腺皮质癌脾转移临床病例及病理学诊断,对于临床相关疾病诊疗有一定的参考价值和借鉴意义。

关键词：猫肾上腺皮质癌病理学免疫组织化学

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