检索结果-内蒙古大学图书馆

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：杨焕良乔传玲陈艳辛晓光李海燕陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

根据猪流感病毒M基因的序列分析结果,设计了一对扩增M基因特异性引物.采用该技术对H1、H3、H5和H9 4个亚型猪流感病毒标准参考株,RT-PCR检测的结果都呈阳性,对猪副粘病毒、圆环病毒2型、猪呼吸与繁殖综合症病毒、猪伪狂犬病毒RT-PCR扩... 详细信息

根据猪流感病毒M基因的序列分析结果,设计了一对扩增M基因特异性引物.采用该技术对H1、H3、H5和H9 4个亚型猪流感病毒标准参考株,RT-PCR检测的结果都呈阳性,对猪副粘病毒、圆环病毒2型、猪呼吸与繁殖综合症病毒、猪伪狂犬病毒RT-PCR扩增结果都呈阴性.RT-PCR最少可检测到1000EID50的病毒核酸.采用该对引物,直接从猪流感病毒感染小鼠的组织样品中提取核酸,RT-PCR阳性结果和鸡胚分离病毒结果一致.应用本方法只用6个小时就可得出准确的诊断结果,试验结果证明建立的RT-PCR检测方法敏感特异,可用于猪流感的快速诊断.

关键词：猪流感病毒 M基因序列分析 RT-PCR检测方法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

引用

中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：周艳君童光志安同庆刘金霞田志军彭金美华荣虹仇华吉王云峰王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是以妊娠母猪繁殖失败和仔猪出现呼吸困难为特征的传染病,PRRSV是该病的病原体.将PRRSV CH-1a株ORF6基因疏水性较强的区域删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是以妊娠母猪繁殖失败和仔猪出现呼吸困难为特征的传染病,PRRSV是该病的病原体.将PRRSV CH-1a株ORF6基因疏水性较强的区域删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDSPAGA分析发现,表达了Mr约为37 000的融合蛋白rtM,Western blot分析证实,重组蛋白能被PRRSV抗血清所识别.收获融合表达的rtM,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用rtM作为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,结果获得了1株能稳定分泌抗rtM蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为M2B3.间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光.亚型鉴定结果显示,单克隆抗体M2B3为IgG1型,其轻链均为κ链.研究获得的融合蛋白rtM及单克隆抗体将为今后深入研究PRRSV病毒结构和功能,分析M蛋白的抗原表位等提供有益帮助.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白蛋白表达单克隆抗体制备工艺

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展

引用

动物医学进展 2006年第10期27卷 11-14页

作者：孙东波冯力时洪艳陈建飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得... 详细信息

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得到了广泛的研究。但是,与其他冠状病毒相比,猪流行腹泻病毒的研究还比较滞后,许多研究还没有开展或不够深入,为了能加快对猪流行性腹泻病毒研究进程,对其最近的分子生物学研究进展做了综述,为猪流行性腹泻病毒的深入研究提供参考。

关键词：猪流行性腹泻病毒分子生物学分子结构特征病原学血清学诊断技术体液免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪链球菌对红霉素耐药性的研究

引用

中国预防兽医学报 2006年第3期28卷 359-362页

作者：李艳华姜成刚蔡雪辉童光志刘娣佟恒敏中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江省农业科学院博士后工作站东北农业大学博士后流动站黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院药理教研室哈尔滨黑龙江150030

从发病猪体内分离、鉴定猪链球菌,采用肉汤稀释法和纸片琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌,用双纸片法确定耐药株的耐药表型,通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb/mefA。猪链球菌对红霉素的耐药表型为cMLS表型,即同时对克... 详细信息

从发病猪体内分离、鉴定猪链球菌,采用肉汤稀释法和纸片琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌,用双纸片法确定耐药株的耐药表型,通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb/mefA。猪链球菌对红霉素的耐药表型为cMLS表型,即同时对克林霉素耐药。在3株红霉素耐药株中扩增到ermb基因,其余未能检测到ermb或mefA基因。

关键词：猪链球菌红霉素耐药表型耐药基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

检测与诊断猪圆环病毒PCR技术的建立及病毒的分离鉴定

引用

畜禽业（南方养猪） 2006年第1期 14-17页

作者：崔尚金李媛全艳平李建伟胡守萍尹训南谷守林童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病诊断与流行病学中心兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

本研究建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法,并对该方法进行了标准化研究。该方法快速、敏感、特异性强,可扩增10ng的阳性质粒的DNA,可以从30μL病料组织悬液或全血中扩增检测出PCV,并且该方法可以区分PCV1和PCV-2,对其它病原微生物如... 详细信息

本研究建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法,并对该方法进行了标准化研究。该方法快速、敏感、特异性强,可扩增10ng的阳性质粒的DNA,可以从30μL病料组织悬液或全血中扩增检测出PCV,并且该方法可以区分PCV1和PCV-2,对其它病原微生物如PPV、PRRSV、SIV以及许多细菌不能检出。应用此方法对6省市的12个猪场的225份病料进行了检测,对阳性病料进行了病毒分离,对分离的病毒进行了电镜观察与序列测定,结果证实分离的病毒为PCV-2。

关键词：断奶猪多系统衰竭综合征猪圆环病毒2型 PCR 分离鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗免疫鸡对LHLJ04XⅠ株病毒攻击的免疫保护作用

传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗免疫鸡对LHLJ04XⅠ株病...

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志木古丽何来崔红玉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

将表达鸡IFN-γ基因和传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)活载体疫苗接种SPF鸡,用2005年黑龙江分离到的传染性支气管炎病毒LHLJ04XⅠ株进行攻击,该毒株与S1基因的亲本毒株具有相同的致病型,均为肾型,并且二者的遗传... 详细信息

将表达鸡IFN-γ基因和传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)活载体疫苗接种SPF鸡,用2005年黑龙江分离到的传染性支气管炎病毒LHLJ04XⅠ株进行攻击,该毒株与S1基因的亲本毒株具有相同的致病型,均为肾型,并且二者的遗传关系较近,对其进行S1基因系统发育进化树分析时发现,二者可以划分到一个基因群,这提示他们可能有共同的起源,相互之间有可能产生交叉保护,据此评价重组疫苗对异源病毒攻击后的保护率。结果显示,重组疫苗在免疫后1周即可检出ELISA抗体,重组疫苗免疫组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞含量均有显著上升。当用LHLJ04XⅠ株病毒攻击后,免疫鸡的肝脏、肾脏、脾脏及肺脏等脏器的病理损伤程度明显轻于非免疫对照组,排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后的发病率为27.3%(3/11),死亡率为9.1%(1/11),而非免疫对照组的发病率和死亡率分别为100%(11/11)和45.5%(5/11),说明重组疫苗对免疫鸡具有较好的保护效果。体重结果表明攻毒前重组疫苗免疫组和非免疫对照组的体重差异不显著(P>0.05),攻毒以后免疫组体重的增加幅度高于非免疫对照组。以上结果说明,共表达鸡IFN-Y基因和传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒活载体疫苗能对异源毒株的攻击产生较好的免疫保护,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用。

关键词：传染性支气管炎重组禽痘病毒免疫保护

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性法氏囊病病毒全基因组序列分析及感染性分子克隆构建

鸡传染性法氏囊病病毒全基因组序列分析及感染性分子克隆构建

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：祁小乐高玉龙高宏雷邓小芸张宁王晓艳王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的危害世界养禽业的主要传染病之一。本研究采用一步法长距离RT-PCR克隆了IBDV Gt株全基因组,对其核苷酸和氨基酸序列进行了系统分析。A节段同源性95.7%,共有146个核苷酸突变...

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的危害世界养禽业的主要传染病之一。本研究采用一步法长距离RT-PCR克隆了IBDV Gt株全基因组,对其核苷酸和氨基酸序列进行了系统分析。A节段同源性95.7%,共有146个核苷酸突变,其中有约37.67%的核苷酸突变发生在VP2,这些突变又主要集中在高变区,占VP2突变总数的58.18%。非编码区相对保守,5’非编码区的前44个核苷酸以及3,非编码区的后36个核苷酸均没有发生突变。Gt与Gx相比,VP2蛋白氨基酸有11处突变,有90.91%（10/11）集中在高变区,第一亲水区1个,七肽区1个,其中Q253H、D279N、A284T和S330R等突变被认为与IBDV超强毒致弱紧密相关。为了进一步研究IBDV的基因功能,本研究在IBDV Gt株全基因组中引入分子标签（A节段:EcoRV酶切位点;B节段:PstI酶切位点）。在基因组两端分别引入锤头状核酶结构（HamRz）和丁肝病毒核酶结构（HdvRz）。将带有分子标签和核酶结构的IBDV基因组插入载体pCAGGS的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtAHRT和pCAGGmGtBHRT,该感染性克隆共转染可高效感染DFⅠ细胞,RT-PCR、间接免疫荧光、电镜检查均显示拯救出了IBDV,且存在分子标签。拯救毒可在CEF上产生CPE,且TCID与Gt毒差异不显著。该感染性克隆转染Vero/E6和Vero/P12,也能成功拯救IBDV。IBDV感染性分子克隆的成功构建为从分子水平上深入研究该病毒的基因功能奠定了基础。

关键词：

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：何来王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性喉气管炎病毒（Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV）,属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus 1。ILTV能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义。已...

传染性喉气管炎病毒（Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV）,属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus 1。ILTV能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义。已有的研究证明ILTV是非常有潜力的禽呼吸道病毒疫苗载体,且gE基因又是疱疹病毒重要的毒力相关基因,将gE蛋白的主要抗原性片段表达于大肠杆菌中,为进一步研究gE基因缺失标记疫苗和病毒感染的监测奠定基础。

关键词：

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新城疫病毒F_(48)E_9株和La Sota株F基因在Bac-to-Bac昆虫杆状病毒系统中的表达

引用

新疆农业大学学报 2006年第2期29卷 5-8页

作者：袁萍闫丽辉冉多良刘培欣闻晓波曹殿军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学院乌鲁木齐830052

将新城疫病毒(F48E9株和La Sota株)F基因插入至杆状病毒转移载体pFastBacTMHT A中,分别构建重组质粒pFastBacHT-F48F,pFastBacHT-LaF,然后转化***5α,以LB/AMP±平板筛选阳性重组子并测序。测序正确后转化至***10Bac感受态细胞中,... 详细信息

将新城疫病毒(F48E9株和La Sota株)F基因插入至杆状病毒转移载体pFastBacTMHT A中,分别构建重组质粒pFastBacHT-F48F,pFastBacHT-LaF,然后转化***5α,以LB/AMP±平板筛选阳性重组子并测序。测序正确后转化至***10Bac感受态细胞中,经抗性培养和蓝白斑筛选,筛选出白色菌落后,提取重组Bacmids(分别命名为rBacmid-F48F和rBacmid-LaF),经PCR鉴定正确后,将阳性重组Bacmids转染Sf9昆虫细胞。在昆虫细胞内,重组Bacmid经复制,表达,装配,形成重组杆状病毒,经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实NDV F48E9株和La Sota株的F蛋白均获得正确表达,所表达的重组F蛋白分子量约56 kD,证明在昆虫细胞内表达并部分糖基化,具有良好的免疫原性,为表达F基因并建立适合国内应用的ELISA诊断方法奠定了基础。

关键词：新城疫病毒 F基因重组杆状病毒蛋白表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊传染性胸膜肺炎病原体国内分离株的分子特征研究

山羊传染性胸膜肺炎病原体国内分离株的分子特征研究

引用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：李媛张建华胡守萍王亮辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室基础条件及技术服务中心哈尔滨150001

[目的]山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(*** ***,Mccp)引起的高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病.我国目前对于CCPP的病原的分类地位的看法与国际标准不符... 详细信息

[目的]山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(*** ***,Mccp)引起的高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病.我国目前对于CCPP的病原的分类地位的看法与国际标准不符.本实验计划对4株丝状支原体簇中国分离菌种进行分子生物学鉴定,确定其真正分类.[方法]针对三段不同基因使用三对引物,对扩增产物进行酶切鉴定和测序,将结果与丝状支原体簇的6个成员进行遗传衍化分析.[结果]该4株支原体以M5M6为引物扩增后PstI酶切的产物与Mccp相同,为548、420、128等3条DNA条带,丝状支原体山羊亚种(M mycoides ***,MmC)等其他丝状支原体簇成员只有420、128bp 2条带.在rpsG和fusA基因段与f38同源性为99.5％,与Mcc kid为98.9％,与MmC ZZ株仅为95.4％.在H2和H2prim段,与MmC PG3株同源性为67.4％-67.6％,与两株Mcc 8601-50和California Kid同源性为95.1％-98.4％,与三株Mccp 97097ET、Gabes和F38的同源性为99.6-99.8％.[结论]87001、87002、367、1653等4株中国分离的CCPP病原菌与山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)亲缘关系更近,故建议其归属为Mccp.

关键词：传染性胸膜肺炎丝状支原体山羊支原体山羊肺炎亚种分子特征

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：