检索结果-内蒙古大学图书馆

第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：刘燕田志军周伦江郑宝亮仇华吉童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

重组病毒载体活疫苗是利用基因工程对特定病毒的基因组进行改造,将外源保护性抗原基因重组到载体病毒中进行表达开发的新型疫苗,为当今病毒病防治研究的热点问题之一。PRV以其宿主范围广,不感染人,基因组可供外源基因插入或替换的非必...

重组病毒载体活疫苗是利用基因工程对特定病毒的基因组进行改造,将外源保护性抗原基因重组到载体病毒中进行表达开发的新型疫苗,为当今病毒病防治研究的热点问题之一。PRV以其宿主范围广,不感染人,基因组可供外源基因插入或替换的非必需基因位点多,插入外源基因容最大和遗传特性稳定等特点,适用于改造成病毒表达载体。用PRV做载体已经表达了多种外源基因。由于PRV基因组长达150kb,不能对其直接进行遗传操作,外源基因的导入通常采用同源重组策略来实现,而有效的基因转移载体是同源重组将外源基因导入到PRV基因组的先决条件。TK基因是PRV

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传染性支气管炎病毒疫苗研究进展

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动物医学进展 2005年第6期26卷 21-24页

作者：田占成王云峰童光志刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

传染性支气管炎给我国规模化养鸡业造成巨大的经济损失,由此尝试研制重组鸡痘病毒传染性支气管炎病毒基因工程疫苗了解其免疫效应,以期获得高效而安全的基因工程疫苗。为更好地了解鸡传染性支气管炎的防治现状,文章从各种表达载体系统... 详细信息

传染性支气管炎给我国规模化养鸡业造成巨大的经济损失,由此尝试研制重组鸡痘病毒传染性支气管炎病毒基因工程疫苗了解其免疫效应,以期获得高效而安全的基因工程疫苗。为更好地了解鸡传染性支气管炎的防治现状,文章从各种表达载体系统表达传染性支气管炎病毒蛋白的优缺点及其产生免疫保护效应的角度,对近年来传染性支气管炎病毒疫苗研究的发展状况做了简要概述,且针对传染性支气管炎病毒基因工程疫苗现存的问题,展望了将来的发展趋势。

关键词：传染性支气管炎病毒传染性支气管炎弱毒疫苗灭活疫苗基因工程疫苗核酸疫苗

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因在重组伪狂犬病毒中表达特性的研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因在重组伪狂犬病毒中表达特性的研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：田志军仇华吉童光志周艳君蔡雪辉王云峰李一经中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院

经生长动力学、表达动力学和间接免疫荧光证实,表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-la株GP5基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)感染细胞15hGP5蛋白即可被Western blotting方法检测到,表达的蛋白主要存在于感染细胞的胞浆中和细胞膜上,... 详细信息

经生长动力学、表达动力学和间接免疫荧光证实,表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-la株GP5基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)感染细胞15hGP5蛋白即可被Western blotting方法检测到,表达的蛋白主要存在于感染细胞的胞浆中和细胞膜上,而不存在病毒粒子表面,表达蛋白的抗原性与亲本病毒相似,rPRV-GP5在Vero、MARC-145、IBRS-2和CEF细胞上毒价和细胞病变与Bartha-K61比较无显著差异。对第30代rPRV-GP5的GP5基因进行序列分析,表明rPRV-GP5在传代过程中遗传性状稳定。rPRV-GP5以105.0 PFU剂量接种Blab/C小鼠试验表明,rPRV-GP5可以在小鼠体内很好的复制和表达外源基因,间接免疫荧光法在接种后14d仍可以在肺中检测到GP5。以上结果表明,PRRSV GP5可以被PRV真实、有效地在体内、外表达。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒伪狂犬病病毒重组伪狂犬病病毒 GP5

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猪生殖与呼吸道综合征疫苗研究进展

猪生殖与呼吸道综合征疫苗研究进展

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中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

作者：童光志田志军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

本文首先对猪繁殖与呼吸综合征的症状进行了概述，然后介绍了猪繁殖与呼吸综合征的常规疫苗以及基因工程疫苗，最后介绍了我国猪繁殖与呼吸综合征现状及防制难点。

关键词：猪生殖与呼吸道综合征常规疫苗基因工程疫苗

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断乳仔猪多系统衰竭综合征的病原学调查

断乳仔猪多系统衰竭综合征的病原学调查

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2005辽宁省畜牧兽医学会养猪研究会学术年会

作者：李曦符芳王靖飞崔尚金童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所诊断与流行病学中心兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所诊断与流行病学中心兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所诊断与流行病学中心兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所诊断与流行病学中心兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所诊断与流行病学中心兽医生物技术国家重点实验室

本试验针对临床具有断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪只进行了病原的调查。 2002年3月至2005年3月,在黑龙江省大庆、靠河寨和吉林省公主岭3个地区的1-25周龄猪群当中,选择临床出现生长迟缓、停滞、呼吸困难、皮肤苍白和曾经具有此类... 详细信息

本试验针对临床具有断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪只进行了病原的调查。 2002年3月至2005年3月,在黑龙江省大庆、靠河寨和吉林省公主岭3个地区的1-25周龄猪群当中,选择临床出现生长迟缓、停滞、呼吸困难、皮肤苍白和曾经具有此类症状并已死亡的猪只,采集病料共计194份,通过聚合酶链反应(PCR)扩增Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)基因组的特异序列片断,扩增产物长度为900bp／470bp,检测病毒。结果发现,PCV2检测的总阳性率为21．3％(41／194),而在不同的地区检测的结果不同。2002年,大庆某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为5．1％(4／78),靠河寨某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为11．5％(9／78), 2004年,公主岭某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为73．7％(28／38)。结果表明,临床上发生PMWS症状的猪只,应用PCR法检测PCV2时,阳性率差别较大。病原学调查显示,在我国 PMWS与多种因素相关,而不仅仅是PCV2的感染,PCV2感染与PMWS是密切相关的,但并不是出现PMWS症状的猪都发生PCV2感染,在PCV2未检测到的情况下,仍有PMWS发生。

关键词：断乳仔猪多系统衰竭综合征聚合酶链反应 Ⅱ型猪圆环病毒

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检测H1-15禽流感病毒亚型的DNA芯片初步研究

检测H1-15禽流感病毒亚型的DNA芯片初步研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

本文对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究。通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒。从重组质粒扩增大约500 bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片。待检病毒样品用Trozol LS提取RNA... 详细信息

本文对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究。通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒。从重组质粒扩增大约500 bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片。待检病毒样品用Trozol LS提取RNA,反转录过程中用Cy5标记样品cDNAs。将标记样品与芯片杂交,扫描芯片上待检样品与芯片上捕捉探针的结合位点,杂交信号与预期设想一致。结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV血凝素亚型鉴别诊断方法。

关键词：禽流感病毒基因芯片血凝素亚型鉴定

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鸡传染性法氏囊病病毒的反向遗传研究

鸡传染性法氏囊病病毒的反向遗传研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛

作者：祁小乐王笑梅高宏雷高玉龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院研究生院北京100081 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

鸡传染性法氏囊病(InfectiousBursalDisease,IBD)变异毒株、超强毒株的出现给世界养禽业造成了很大的经济损失.反向遗传操作系统给IBDV的深入研究提供了强有力的工具.本文从病毒拯救技术、基因功能研究、标记疫苗研发等多个方面对国内外... 详细信息

鸡传染性法氏囊病(InfectiousBursalDisease,IBD)变异毒株、超强毒株的出现给世界养禽业造成了很大的经济损失.反向遗传操作系统给IBDV的深入研究提供了强有力的工具.本文从病毒拯救技术、基因功能研究、标记疫苗研发等多个方面对国内外IBDV反向遗传研究现状作一综述,并对该领域存在的问题和重点研究方向做了分析.

关键词：鸡传染性法氏囊病毒反向遗传病毒拯救变异毒株

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禽源高产流感疫苗株rH5N3的拯救及其免疫原性研究

禽源高产流感疫苗株rH5N3的拯救及其免疫原性研究

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会第十次学术研讨会

作者：刘明张云潘蔚绮刘春国刘超南杨涛中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学生命技术学院哈尔滨150030

H5N1亚型高致病性禽流感给我国以及东南亚地区的养禽业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫接种是控制本病流行的最有效手段.本研究采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片断,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因... 详细信息

H5N1亚型高致病性禽流感给我国以及东南亚地区的养禽业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫接种是控制本病流行的最有效手段.本研究采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片断,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因,且都来自于禽源的重组流感病毒疫苗株rH5N3.通过对血凝素基因连接肽处的4个碱性氨基酸(R-R-K-K)基因缺失,消除了HA基因的毒力相关序列,拯救出的rH5N3病毒对鸡和鸡胚均无致病性,鸡胚尿囊液的HA效价1∶2048,比亲本病毒产量提高8倍.疫苗免疫鸡后2周即可检出HI抗体,免疫后4周左右HI抗体水平最高,鸡免疫后18周应然保持高水平的HI抗体.以rH5N3制备的油乳剂灭活苗免疫不论是对于国内早期分离的禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96还是近期分离的A/Goose/HLJ/QFY/04都能够产生良好的免疫保护作用,免疫鸡攻毒后不排毒、不发病、不死亡.

关键词：禽流感病毒反向遗传学 H5N1亚型重组疫苗株免疫原性灭活苗免

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抗禽流感H9N2亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备与分析

抗禽流感H9N2亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备与分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：刘振勇邓国华李呈军张立春田国彬何后军于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室江西农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

本研究采用低致病力禽流感病毒(LPAIV)H9N2亚型A/Chicken/Shanghai/10/99(SH/10/99)和A/CK/Guangx-i/10/99(GX/10/99)毒株作为免疫原,免疫8周龄BALB/C小鼠,用血凝抑制试验(HI)方法筛选和有限稀释法克隆纯化,最后获得十株H9亚型HA特异性单抗细胞株:其中SH/10/99作为免疫原的有四株:A3、B/D12、A11/C6、A/B3;GX/10/99作为免疫原的有六株:C/D4、D/G7、C/C10、B/E9、C/E2、E/B11。10株具有HI活性的H9亚型特异性McAbs与其他H9亚型AIV分离株的交叉反应实验表明,A/B3、B/D12、C/D4、D/G7这四株单抗对所选择的毒株具有较好的Hl活性,A/CK/Heilongjiang/35/00病毒不与任何一株单抗发生血凝抑制反应。A/B3、B/D12、C/D4进行病毒的中和实验结果表明,抗体的中和活性与其血凝抑制活性之间存在很大的相关性,且基本上是一致的,且能对鸡胚提供很好的保护。所以这些单克隆抗体将在禽流感的预警预报工作以及H9亚型流感病毒HA基因的结构和功能的研究中发挥重要的作用。

关键词：单克隆抗体禽流感 H9亚型 HI

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以小鼠为模型评价重组伪狂犬病病毒rPRV-HA的免疫效力

以小鼠为模型评价重组伪狂犬病病毒rPRV-HA的免疫效力

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中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

作者：郑宝亮周国辉田志军仇华吉杨焕良尹训南胡守萍童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

以小鼠为动物模型,对此前构建的表达H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-HA)进行了免疫效力评价.按每只105.0TCID50rPRV-HA的剂量通过滴鼻接种8周龄雌性BALB/c小鼠(n=60),同时,设Bartha-K61免疫对照组(n=60... 详细信息

以小鼠为动物模型,对此前构建的表达H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-HA)进行了免疫效力评价.按每只105.0TCID50rPRV-HA的剂量通过滴鼻接种8周龄雌性BALB/c小鼠(n=60),同时,设Bartha-K61免疫对照组(n=60)、非免疫攻毒对照组(n=20)和非免疫不攻毒对照组(n=10).于免疫后不同时间分别从rPRV-HA免疫组和Bartha-K61免疫对照组随机剖杀一定数量的小鼠,其余小鼠于免疫后28d用105.0TCID50同亚型SIV进行强毒攻击.攻毒后第4、7、14d,分别剖杀小鼠,进行免疫组织化学、病毒分离、血清学和病理组织学检测.结果表明,重组病毒主要分布于肺脏;免疫后14d起,从rPRV-HA免疫组及Bartha-K61免疫对照组均可检测到针对PRV的荧光抗体;从rPRV-HA免疫组可以检测到针对SIV的荧光抗体和血凝抑制抗体,而各对照组均呈阴性.攻毒后从rPRV-HA免疫组小鼠未分离到攻击病毒,血凝抑制抗体显著升高,病理变化比对照组显著轻微,表明rPRV-HA免疫小鼠可以抵抗同亚型SIV的攻击,可以作为rPRV-HA免疫效力评价模型。

关键词：伪狂犬病病毒 H3N2亚型猪流感病毒重组病毒小鼠模型免疫效力病理组织学免疫组织化学

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