检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2013年第2期53卷 197-203页

作者：韩文罗玉子赵碧波孙元李素仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

极其多样的病毒广泛存在于我们周围的环境和动物体内,其中很多病毒是人类所未知的,而发现未知病毒常常受制于病毒常规检测技术的局限性。【目的】构建未知病毒检测技术平台。【方法】应用病毒宏基因组学的理念,结合新型分子诊断技术,首... 详细信息

极其多样的病毒广泛存在于我们周围的环境和动物体内,其中很多病毒是人类所未知的,而发现未知病毒常常受制于病毒常规检测技术的局限性。【目的】构建未知病毒检测技术平台。【方法】应用病毒宏基因组学的理念,结合新型分子诊断技术,首先利用过滤和核酸酶处理去除样品宿主核酸干扰,然后随机PCR扩增潜在的病毒宏基因组,最后通过大规模测序及序列分析获取病毒核酸信息。【结果】利用此技术我们对猪瘟病毒(CSFV)细胞培养物和猪圆环病毒2型(PCV2)感染猪病料进行了分析,分别检测到序列总长度1680 bp,占基因组13.7%的CSFV序列和序列总长度834 bp,占基因组47.2%的PCV2序列;利用此检测技术平台研究一未知病原细胞培养物,通过测序和序列分析,结果显示56条序列中有26条为副流感病毒5型(PIV5)同源序列,覆盖了其基因组全长的16.4%;此外,应用本研究建立的方法结合新一代高通量测序,我们在混合的7份病原未知的病猪组织样品中检测到了1.1%的病毒序列,包括CSFV、PCV2、猪细环病毒(TTSuV)、猪bocavirus(PBoV)和人腺病毒6型(Ad6)等的部分基因序列。【结论】本研究建立的基于病毒宏基因组学的未知病毒的检测方法突破了传统病毒研究方法的缺陷,对于猪群样本中病毒的检测具有较高的敏感性,有望为新发、突发感染性疾病的诊断和监测提供技术支持。

关键词：病毒宏基因组学随机PCR 未知病毒 DNA病毒 RNA病毒

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马传染性贫血发病过程中细胞毒性T细胞的作用及其表位研究进展

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病毒学报 2007年第1期23卷 76-78页

作者：马建孔宪刚沈荣显周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

马传染性贫血(Equine infectious anemia, EIA)是马属动物感染的一种主要经由虫媒传播的传染性疾病。该病的临床表征为反复发热、贫血、出血、水肿以及消瘦等,病理生理变化以血小板减少为主。EIA的致病原为马传染性贫血病毒(Equine infe... 详细信息

马传染性贫血(Equine infectious anemia, EIA)是马属动物感染的一种主要经由虫媒传播的传染性疾病。该病的临床表征为反复发热、贫血、出血、水肿以及消瘦等,病理生理变化以血小板减少为主。EIA的致病原为马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus, EIAV),该病毒与人类免疫缺陷病毒;(Human immunodeficiency virus, HIV),猴免疫缺陷病毒(Simian immunodeficiency virus, SIV)等同属反转录病毒科,慢病毒属。EIA与HIV引起的人艾滋病和SIV引起的猴艾滋病在疾病特征上具有一定的相似性。然而,感染EIAV的多数马往往在经过一年左右的反复发热和与之相关联的病毒血症之后,最终能够控制住病毒在体内的复制(而非清除),转归为无明显临床症状的EIAV隐性携带马。这与人在感染HIV8－10年后几乎100%转归死亡是有明显差别的。也正是由于这一差别,研究马与EIAV之间相互作用的机理,可作为研究HIV等慢病毒致病机理和防治策略的良好动物模型。因此,人们对EIA发病及控制机理有了更多的关注和研究。其中,细胞毒性T细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)在病毒感染控制过程中起主要作用这一观点,随着相关研究的逐步深入,越来越得到人们的认同。[第一段]

关键词：马传染性贫血病毒细胞毒性发病过程 T细胞猴免疫缺陷病毒人类免疫缺陷病毒 virus EIAV

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国际病毒分类委员会第十次病毒分类报告简介及分析

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中国预防兽医学报 2021年

作者：张莹王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

目前,国际病毒分类委员会公布的第十次病毒分类报告已经在线可用(http://***/report/),这是一个完全开放的,并完全取代了以往纸质印刷版、不断更新的网络版。为了及时了解国际病毒分类研究的新变化,本文对新版病毒分类系统进行了概括和... 详细信息

目前,国际病毒分类委员会公布的第十次病毒分类报告已经在线可用(http://***/report/),这是一个完全开放的,并完全取代了以往纸质印刷版、不断更新的网络版。为了及时了解国际病毒分类研究的新变化,本文对新版病毒分类系统进行了概括和介绍,并重点介绍了与兽医工作关系密切的动物病毒代表种毒株和部分常见毒株,有助于大家及时了解国际病毒分类动态。

关键词：病毒分类分类阶元代表种毒株

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天然免疫限制因子Tetherin的抗病毒机理研究进展

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生物化学与生物物理进展 2014年第1期41卷 32-40页

作者：尹鑫魏萍王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

天然免疫限制因子Tetherin(骨髓基质细胞抗原2)是Ⅰ型干扰素诱导产生的Ⅱ型跨膜蛋白.Tetherin通过其特殊的拓扑结构,在病毒出芽过程中将病毒粒子连接在细胞膜表面,限制病毒的有效释放,从而发挥广谱性的抗病毒活性,而病毒也可以通过多种... 详细信息

天然免疫限制因子Tetherin(骨髓基质细胞抗原2)是Ⅰ型干扰素诱导产生的Ⅱ型跨膜蛋白.Tetherin通过其特殊的拓扑结构,在病毒出芽过程中将病毒粒子连接在细胞膜表面,限制病毒的有效释放,从而发挥广谱性的抗病毒活性,而病毒也可以通过多种策略拮抗Tetherin的抗病毒活性.病毒与宿主长期抗争进化的结果表现为病毒特定拮抗蛋白对抗不同种属细胞Tetherin的限制存在种属特异性.本文通过对Tetherin的分子结构、抗病毒活性及其拮抗蛋白的对抗机制等最新进展进行综述,为研究病毒与宿主相互作用的分子机制以及新型抗病毒药物的筛选提供借鉴.

关键词： Tetherin 抗病毒活性拮抗蛋白进化

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猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾

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中国农业科学 2005年第8期38卷 1675-1685页

作者：仇华吉童光志沈荣显中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的... 详细信息

猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的猪都没有副作用,并且有良好的免疫效力,它能同时诱导体液免疫和细胞免疫应答,对不同基因型的猪瘟病毒株均能提供有效的免疫保护。免疫母猪通过母乳可对仔猪提供被动免疫保护,但过高水平的母源抗体会影响仔猪对C株疫苗的主动免疫应答。目前已经完成了包括C株及其亲本株在内的几十株猪瘟病毒的全基因组序列测定和注释,建立了猪瘟病毒的反向遗传操作系统,初步解析了猪瘟病毒主要基因的结构与功能,并构建了不同的反向遗传操作标记疫苗,赋予了C株疫苗新的生命和内涵。C株疫苗可以用于猪瘟的控制和根除,借助于C株疫苗密集接种和综合控制措施,有关国家有效地控制了猪瘟,甚至消灭了猪瘟。尽管如此,要在全球范围内根除猪瘟,今后依然有漫长的路要走,这可能有赖于对C株进行进一步改造和利用。

关键词：猪瘟猪瘟病毒猪瘟兔化弱毒疫苗

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重组马γ-干扰素抗病毒活性测定及单克隆抗体抑制活性鉴定

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生物工程学报 2008年第7期24卷 1258-1262页

作者：白宇陈伟业童铁钢张维军徐树兰王群孙庆歌刘光亮步志高吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为了测定大肠杆菌和杆状病毒表达的重组马γ-干扰素是否具有抗病毒活性,利用这两种干扰素处理马胎肾细胞(EFK-78),然后接种表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水泡性口炎病毒(VSV*GFP),观察干扰素对病毒表达GFP的抑制,测出其抗病毒活性单位分... 详细信息

为了测定大肠杆菌和杆状病毒表达的重组马γ-干扰素是否具有抗病毒活性,利用这两种干扰素处理马胎肾细胞(EFK-78),然后接种表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水泡性口炎病毒(VSV*GFP),观察干扰素对病毒表达GFP的抑制,测出其抗病毒活性单位分别为1×103AU/mL、1×105AU/mL。评价了制备的九株抗重组马γ-干扰素单克隆抗体是否可抑制重组马γ-干扰素抗病毒活性,证实其中一株可中和重组马γ-干扰素的抗病毒活性。结果表明:杆状病毒表达的马γ-干扰素具有较高的抗病毒活性,其活性可被一株制备的抗重组马γ-干扰素单克隆抗体抑制;首次获得原核表达的具有抗病毒活性的马γ-干扰素。

关键词：马γ-干扰素抗病毒活性测定单克隆抗体

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SARS-CoV单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定

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生物工程学报 2005年第2期21卷 211-215页

作者：周艳君华荣虹王云峰安同庆刘金霞杨金雨华玉卓童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

参照已发表的SARS冠状病毒BJ0 1株基因序列 ,利用计算机软件预测并选取该病毒S、M、N三种主要结构蛋白部分抗原性优势区域 ,以编码Gly- Pro- Gly序列相连接合成两段嵌合基因A和B。并分别克隆于pGEX -6p- 1载体上用IPTG进行诱导表达 ,以... 详细信息

参照已发表的SARS冠状病毒BJ0 1株基因序列 ,利用计算机软件预测并选取该病毒S、M、N三种主要结构蛋白部分抗原性优势区域 ,以编码Gly- Pro- Gly序列相连接合成两段嵌合基因A和B。并分别克隆于pGEX -6p- 1载体上用IPTG进行诱导表达 ,以纯化的嵌合蛋白A和B为抗原 ,分别免疫BALB c小鼠制备单克隆抗体。利用单克隆抗体亚型检测试剂盒和SARS CoV商品化ELISA检测试剂盒对其进行亚型和特异性鉴定。结果表明融合表达两段嵌合基因产物 ,其大小分别为 34kD和35kD ,Westernblot分析证实两种表达产物都能被SARS病人康复期血清所识别。获得了 6株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞克隆株。亚型鉴定结果除D3C5为IgG2a外其他单抗均为IgG1,而且所有单抗的轻链均为κ链。特异性鉴定发现除D3D1外 ,其余的 5株单抗均能与SARS CoV商品化ELISA检测试剂盒发生特异性反应。将D3D1与灭活后经超声波裂解的SARS CoV进行Westernblot分析 ,发现它能特异性识别 180kD的蛋白带。分别融合表达了 6个S蛋白的寡肽 (S1- S6 ) ,并对筛选出的单克隆抗体相对应的抗原表位进行了初步鉴定。结果发现单克隆抗体D3D1特异性识别S2基因表达产物 (S蛋白的 4 4 7 4 5 8aa) ,D3C5特异性识别S5基因表达产物 (S蛋白的 789 799aa)。

关键词： SARS-CoY 单克隆抗体抗原表位

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抗禽流感病毒多表位DNA疫苗的构建及其免疫效力研究

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生物工程学报 2003年第5期19卷 623-627页

作者：彭金美童光志王云峰仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

多表位DNA疫苗是建立在常规DNA疫苗基础上的一种新型疫苗。它是用表位作免疫原 ,这样就比较容易在一个表达载体上克隆病原体的多个抗原基因中具有免疫活性的部分。本试验以H5N1亚型禽流感病毒的HA和NP基因及其表位为基础构建了 4个重组... 详细信息

多表位DNA疫苗是建立在常规DNA疫苗基础上的一种新型疫苗。它是用表位作免疫原 ,这样就比较容易在一个表达载体上克隆病原体的多个抗原基因中具有免疫活性的部分。本试验以H5N1亚型禽流感病毒的HA和NP基因及其表位为基础构建了 4个重组质粒 :1 pIRES HA(表达全长的HA基因 ) ;2 pIRES tHA(只表达HA基因的主要抗原表位区 ) ;3 pIRES tHA NPep(融合表达HA基因的抗原表位区和NP基因的 3个CTL表位 ) ;4 pIRES tHA NPep IFN γ(用鸡的IFN γ基因取代质粒pIRES tHA NPep中的neo基因 )。分别用这 4个重组质粒和空载体质粒pIRES1neo肌注免疫 30日龄SPF鸡。免疫 3次 ,间隔为 2周 ,每次每只鸡的剂量为 2 0 0 μg。第 3次免疫后两周以高致病性禽流感病毒H5N1强毒攻击 ,免疫及攻毒前后均采血检测HI抗体效价和外周血CD4 + 、CD8+ T细胞的变化。结果发现 ,攻毒前各质粒免疫组均检测不到HI抗体 ,攻毒后 1周存活鸡HI抗体效价迅速升高到 6 4～ 2 5 6。流式细胞仪检测显示外周血CD4 + 、CD8+ T细胞在疫苗免疫后都有不同程度的升高。空载体质粒对照组鸡 (10只 )在攻毒后 3～ 8d内全部死亡 ,其他各重组质粒免疫组鸡都获得了部分保护 ,保护率分别是 :pIRES HA组为 5 4 5 % (6 11) ,pIRES tHA组为 30 % (3 10 ) ,pIRES

关键词：禽流感病毒多表位 DNA疫苗免疫效力

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限制逆转录病毒感染的细胞内蛋白TRIM5α研究进展

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病毒学报 2009年第1期25卷 78-81页

作者：于长清沈楠沈荣显周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

20世纪80年代中后期,科研人员在建立能够被HIV-1感染的动物模型时,注意到旧世纪猴(Oldworld monkeys)中存在着对HIV-1感染的遗传限制。虽然许多实验室做了大量工作,试图找出这种限制性因子,但均未获成功,直到2004年在非人类灵长动物中... 详细信息

20世纪80年代中后期,科研人员在建立能够被HIV-1感染的动物模型时,注意到旧世纪猴(Oldworld monkeys)中存在着对HIV-1感染的遗传限制。虽然许多实验室做了大量工作,试图找出这种限制性因子,但均未获成功,直到2004年在非人类灵长动物中发现了TRIM5α。在其后的几年时间里,有大量的文献报道了TRIM5α的研究情况。本文将对近几年该领域研究进展做一综述。[第一段]

关键词：病毒感染胞内蛋白逆转录 HIV-1 动物模型限制性因子科研人员中后期

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PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定

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生物化学与生物物理进展 2007年第9期34卷 971-977页

作者：孙东波朗洪武时洪艳陈建飞崔晓辰王承宝佟有恩冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001 中国兽医药品监察所北京100081

以猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1～2367bp)为靶基因,利用基于gⅢ表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化病毒制备的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白,对S1基... 详细信息

以猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1～2367bp)为靶基因,利用基于gⅢ表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化病毒制备的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白,对S1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选,结果获得3个高亲和力的序列,分别命名为S1P1(248～280位氨基酸)、S1P2(442～499位氨基酸)和S1P3(697～742位氨基酸).ELISA和蛋白质印迹结果显示,S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多克隆血清识别,其中S1P3反应性最强.为了进一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性,制备了3个短肽GST融合蛋白和它们串连后GST融合蛋白的单因子血清,间接免疫荧光试验(IFA)结果证实,抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融合蛋白的单因子血清能够识别Vero细胞培养物中天然的PEDV.

关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白抗原表位噬菌体展示

来源：评论

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