检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 1999年第3期15卷 249-251页

作者：江国托刘思国步志高康丽娟卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）中国流行株（ＨＤ）的主要免疫原纤突蛋白Ｓ１基因（Ｓｐｉｋｅｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅ），将其插入载体ｐＵＣ１８的ＢａｍＨⅠ／ ... 详细信息

反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）中国流行株（ＨＤ）的主要免疫原纤突蛋白Ｓ１基因（Ｓｐｉｋｅｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅ），将其插入载体ｐＵＣ１８的ＢａｍＨⅠ／Ｈｉｎｄ Ⅲ位点，在大肠杆菌中实现目的基因的分子克隆。经克隆化Ｓ１基因的限制性酶切片段多态性（ＲＦＬＰ）分析和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交之后，双脱氧链终止法测定其５′端高变区核苷酸序列，并以此与ＧｅｎｅＢａｎｋ中的参考毒株Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｔｓ４１相应序列作比较，分析其同源性。在此基础上，分别以此两毒株抗原研制灭活疫苗，交叉免疫攻毒。结果表明，从Ｓ１基因５′端高变区的起始密码子ＡＴＧ至第３５０位，两毒株仅在起始密码子后第１３１位存在一个碱基的点突变，由Ｍ４１的Ｃ突变为ＨＤ株的Ｇ，即Ｓ１蛋白上的第４１个氨基酸由Ｍ４１的Ａｌａ突变为ＨＤ株的Ｇｌｙ，二者核苷酸同源率为９９７％，氨基酸同源率为９９１％。两毒株灭活抗原疫苗免疫后的交叉攻毒试验表明，Ｍ４１毒株疫苗对ＨＤ株的保护率为７５％，而ＨＤ株疫苗对Ｍ４１株的保护率只有６５％。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒免疫原基因点突变

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新型伪狂犬病疫苗及其评价

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中国兽医杂志 1999年第7期25卷 34-37页

作者：仇华吉童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）为α疱疹病毒，能引起多种动物的伪狂犬病。该传染病遍布世界主要养猪国家。我国１９４７年首次发现本病，现已蔓延到十几个省市，给畜牧业造成巨大的经济损失。免疫接种是防制伪狂犬病的主要策略。尽管疫苗不能... 详细信息

伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）为α疱疹病毒，能引起多种动物的伪狂犬病。该传染病遍布世界主要养猪国家。我国１９４７年首次发现本病，现已蔓延到十几个省市，给畜牧业造成巨大的经济损失。免疫接种是防制伪狂犬病的主要策略。尽管疫苗不能完全阻止ＰＲＶ强毒感染和排毒，但它...

关键词：伪狂犬病疫苗评价

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马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒和驴强毒全基因核苷酸序列测定

引用

中国预防兽医学报 1999年第1期21卷 74-75页

作者：卢景良张宝山刘永刚孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总ＤＮＡ和驴强毒感染驴外周血病毒ＲＮＡ为起始材料，应用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ的方法，分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因，并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马... 详细信息

本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总ＤＮＡ和驴强毒感染驴外周血病毒ＲＮＡ为起始材料，应用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ的方法，分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因，并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马传贫病毒核苷酸序列比较，推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。

关键词：马传贫白细胞弱毒马传贫驴强毒核苷酸序列

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抗体依赖性增强作用的免疫生物学特点及其意义

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中国兽医科技 1999年第7期29卷 19-20页

作者：仇华吉童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

抗体依赖性增强作用（ａｎｔｉｂｏｄｙｄｅｐｅｎｄｅｎｔｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ，ＡＤＥ）就是某些病毒用相应抗体处理后，其复制或感染能力显著增强。这种现象是Ｈａｗｋｅｓ于１９６４年在研究虫媒病毒中首先发现的〔１〕。他将澳... 详细信息

抗体依赖性增强作用（ａｎｔｉｂｏｄｙｄｅｐｅｎｄｅｎｔｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ，ＡＤＥ）就是某些病毒用相应抗体处理后，其复制或感染能力显著增强。这种现象是Ｈａｗｋｅｓ于１９６４年在研究虫媒病毒中首先发现的〔１〕。他将澳洲墨莱溪谷脑炎病毒（ＭＶＥ）、西尼...

关键词：抗体依赖性免疫生物学特性增强作用产生机制

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禽流感病毒核蛋白基因在重组杆状病毒中的表达

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中国预防兽医学报 1999年第2期21卷 81-83页

作者：邓国华马文军于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

利用ＲＴ－ＰＣＲ方法成功地扩增了我国禽流感病毒分离株Ａ／Ｘｉｎｇｊｉａｎｇ／１／９６（Ｈ１４Ｎ５）的核蛋白（ＮＰ）基因，其限制性内切酶图谱和核苷酸序列与鸭源的标准Ｈ１４Ｎ５毒株几乎完全一致，与其它毒株则有较大差异，说... 详细信息

利用ＲＴ－ＰＣＲ方法成功地扩增了我国禽流感病毒分离株Ａ／Ｘｉｎｇｊｉａｎｇ／１／９６（Ｈ１４Ｎ５）的核蛋白（ＮＰ）基因，其限制性内切酶图谱和核苷酸序列与鸭源的标准Ｈ１４Ｎ５毒株几乎完全一致，与其它毒株则有较大差异，说明该鸡源分离株与鸭源毒株有非常近的亲缘关系。将ＮＰ基因定向克隆到杆状病毒转移载体ｐＶＬ１３９３中，再与杆状病毒线性ＤＮＡ（ＢＡＣ－Ｎ－ＢｌｕｅＤＮＡ）共转染于Ｓｆ９昆虫细胞中，经过三次蚀斑筛选，获得重组病毒ｒＢ２。用其细胞表达产物裂解后作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白电泳、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ和ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，结果表明ＮＰ基因在杆状病毒系统中获得了表达。同时用表达产物作琼脂扩散试验，结果表明表达产物与现行标准禽流感琼扩抗原具有相同的生物学活性。

关键词：禽流感病毒重组杆状病毒核蛋白基因

来源：评论

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牛传染性鼻气管炎病毒TK基因缺失株与野毒株PCR鉴别诊断方法的研究

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中国兽医科技 1999年第5期29卷 3-5页

作者：张桂红童光志王柳仇华吉赵晓岩张绍杰于力刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒（ＩＢＲＶ）ＴＫ基因和ｇＢ基因序列，应用Ｏｌｉｇｏ４．１程序设计两对引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２及ＰＢ１和ＰＢ２，分别对已构建的ＴＫ基因缺失（ＴＫ－）ＩＢＲＶ以及ＩＢＲＶＬＡ株、洛精、美精、... 详细信息

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒（ＩＢＲＶ）ＴＫ基因和ｇＢ基因序列，应用Ｏｌｉｇｏ４．１程序设计两对引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２及ＰＢ１和ＰＢ２，分别对已构建的ＴＫ基因缺失（ＴＫ－）ＩＢＲＶ以及ＩＢＲＶＬＡ株、洛精、美精、ＢａｒｔｈａＮｕ／６７株、Ｂ７株、云南１和云南２分离株进行了ＰＣＲ扩增。结果显示７株ＩＢＲＶＤＮＡ用引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２扩增均产生４５７ｂｐ的特异性片段，而ＴＫ－ＩＢＲＶ只出现１１０ｂｐ片段；用引物ＰＢ１和ＰＢ２对７株ＩＢＲＶＤＮＡ及ＴＫ－ＩＢＲＶＤＮＡ进行扩增均产生３３９ｂｐ的特异性片段；用此引物对其同属的伪狂犬病毒（ＰＲＶ）、马立克氏病毒（ＭＤＶ）、鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）进行扩增，均未见特异性条带，从而证明该引物是特异的；ＰＣＲ的敏感性检测表明，该法可检测出３ｐｇ的病毒ＤＮＡ。所建立的方法可以鉴别野毒与ＴＫ－ＩＢＲＶ疫苗毒的感染。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 PCR 鉴别诊断 TK基因

来源：评论

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禽肺病毒的分离鉴定

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中国预防兽医学报 1999年第1期21卷 76-77页

作者：沈瑞忠曲立新于康震李建伟张建林谷守林徐宜为唐桂运中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

禽肺病毒（ＡＰＶ）于１９７８年首次发现于南非，可引起火鸡鼻气管炎和鸡肿头综合症，至今未见其在中国存在的报道。我们从黑龙江省某肉种鸡场患肿头综合症的鸡中分离到了１株病毒。经鉴定，该病毒分离株缺乏血凝活性，具有典型的副粘... 详细信息

禽肺病毒（ＡＰＶ）于１９７８年首次发现于南非，可引起火鸡鼻气管炎和鸡肿头综合症，至今未见其在中国存在的报道。我们从黑龙江省某肉种鸡场患肿头综合症的鸡中分离到了１株病毒。经鉴定，该病毒分离株缺乏血凝活性，具有典型的副粘病毒形态特征，可诱导特异性抗ＡＰＶ抗体的产生。因此可认定该病毒为１个ＡＰＶ分离株（命名为ＡＰＶ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｃｈｉｎａ／１／９８）。

关键词：禽肺病毒分离鉴定

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鸡IL-2基因的克隆及序列测定

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中国兽医科技 1999年第7期29卷 5-7页

作者：陈洪岩刘胜旺陈奖励张宝山卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

根据已发表的鸡白细胞介素２（ＩＬ２）基因序列设计引物，用ＲＴＰＣＲ方法从新城疫病毒感染的雏鸡脾淋巴细胞培养物中扩增出鸡的ＩＬ２基因ｃＤＮＡ，并进行序列测定，为进一步表达鸡ＩＬ２并深入研究其功能奠定了基础。

关键词：鸡IL-2基因克隆序列测定

来源：评论

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分子修饰的重组百日咳毒素S1亚单位的生物学和免疫学特性

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中国免疫学杂志 1999年第4期15卷 151-154页

作者：于康震 Burnette W N Kaslow H R Yilma T D 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室美国加利福尼亚大学兽医学院

目的：对重组杆状病毒表达的经多种信号序列修饰的天然和变异百日咳毒素（ＰＴ）Ｓ１亚单位（ｒＳ１）的生物学及免疫学特性作出评价。方法：应用生物化学和免疫学技术与方法对这些ｒＳ１的酶活性、分泌性和免疫原性等做了系统鉴定。结... 详细信息

目的：对重组杆状病毒表达的经多种信号序列修饰的天然和变异百日咳毒素（ＰＴ）Ｓ１亚单位（ｒＳ１）的生物学及免疫学特性作出评价。方法：应用生物化学和免疫学技术与方法对这些ｒＳ１的酶活性、分泌性和免疫原性等做了系统鉴定。结果：ｒＳ１变异子无可检出的酶活性；所有ｒＳ１均不能由细胞分泌，可从细胞膜组分中大量检出，但不能从可溶性胞浆蛋白组分或细胞培养上清中检出；ｒＳ１分子内部含有３个疏水性区域；ｒＳ１虽不能与Ｂ寡聚体结合形成ＰＴ全毒素，但均能诱导抗ＰＴ免疫应答。结论：这些ｒＳ１极可能以膜蛋白形式存在，其非分泌性与分子内部的疏水性区域有关；所有ｒＳ１均保持其免疫原性。

关键词：百日咳毒素 S1亚单位生物学特性免疫应答

来源：评论

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重组马传染性贫血病病毒核心蛋白抗原在 A GID 和ELISA中应用的评价

引用

中国预防兽医学报 1999年第4期21卷 281-283页

作者：孔宪刚陶伟英刘永刚张宝山刘胜旺卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

用昆虫杆状病毒表达系统获得的马传染性贫血病病毒（ＥＩＡＶ）核心蛋白（Ｇａｇ）和Ｐ２６蛋白，作为免疫琼脂双扩散（ＡＧＩＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）抗原。对７６份已知马传贫非特异性血清进行检... 详细信息

用昆虫杆状病毒表达系统获得的马传染性贫血病病毒（ＥＩＡＶ）核心蛋白（Ｇａｇ）和Ｐ２６蛋白，作为免疫琼脂双扩散（ＡＧＩＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）抗原。对７６份已知马传贫非特异性血清进行检查，同时与市售ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ试剂盒作比较。证明，用表达蛋白作抗原的ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ检测结果均为阴性反应，而用市售ＡＧＩＤ试剂盒检查有５４份马血清出现非特异性反应，市售ＥＬＩＳＡ试剂盒检查也出现了非特异性反应，ＯＤ值比表达抗原ＥＬＩＳＡ高３５倍。初步证明在ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ法中，表达抗原优于常规马传贫病毒抗原。

关键词： EIAV 马传染性贫血病杆状病毒 ELISA 核心蛋白

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