检索结果-内蒙古大学图书馆

黑龙江畜牧兽医 2016年第1期 145-147,261页

作者：曲娟娟胡晓亮顾海东张春苗冉多良相文华东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 新疆农业大学动物科技学院乌鲁木齐830000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为了研究1型和4型马疱疹病毒(EHV)VHS蛋白在真核细胞中的表达与亚细胞定位,试验将1型和4型马疱疹病毒VHS基因片段与p3×Flag载体连接,构建p3×Flag-VHS-1和p3×Flag-VHS-4重组表达质粒,经脂质体转染HeLa细胞后,用Western-b... 详细信息

为了研究1型和4型马疱疹病毒(EHV)VHS蛋白在真核细胞中的表达与亚细胞定位,试验将1型和4型马疱疹病毒VHS基因片段与p3×Flag载体连接,构建p3×Flag-VHS-1和p3×Flag-VHS-4重组表达质粒,经脂质体转染HeLa细胞后,用Western-blot验证该蛋白在HeLa细胞中的表达情况,并以激光共聚焦显微成像技术确定VHS蛋白在真核细胞中的分布及亚细胞定位。结果表明:重组质粒p3×Flag-VHS-1和p3×Flag-VHS-4在HeLa细胞中获得了表达,且主要聚集于细胞浆。说明VHS蛋白能够在外源真核细胞HeLa中表达,蛋白主要位于HeLa的细胞浆中。

关键词：马疱疹病毒 HeLa细胞 VHS蛋白表达定位免疫印迹

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猪戊型肝炎病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

引用

中国预防兽医学报 2016年第4期38卷 322-325页

作者：闫蕾涂亚斌李海张交儿王刚刘永刚陈志宝蔡雪辉黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001

为建立猪戊型肝炎病毒(SHEV)的TaqMan荧光定量PCR检测方法,本研究根据SHEV基因ORF2保守区设计引物及探针,并对PCR反应条件进行优化。结果表明,该方法扩增的相关系数可达0.999,在102拷贝/μL^109拷贝/μL内具有良好的线性关系。对猪圆环... 详细信息

为建立猪戊型肝炎病毒(SHEV)的TaqMan荧光定量PCR检测方法,本研究根据SHEV基因ORF2保守区设计引物及探针,并对PCR反应条件进行优化。结果表明,该方法扩增的相关系数可达0.999,在102拷贝/μL^109拷贝/μL内具有良好的线性关系。对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病毒的RNA或DNA进行检测,结果均为阴性。该方法可以检出最低拷贝数为10拷贝/μL。重复性试验结果表明该方法的批内和批间变异系数均小于3.0%。本研究使用该荧光定量PCR检测方法对黑龙江省临床收集的131份样品(肝脏45份、粪便86份)进行检测,总阳性率为11.45%,其中肝脏阳性率为22.22%,粪便阳性率为5.81%。该方法的建立为SHEV的快速检出及绝对定量奠定了良好的基础。

关键词：猪戊型肝炎病毒荧光定量PCR TaqMan探针应用

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传染性法氏囊病病毒感染鸡脾脏病理变化的研究

引用

中国预防兽医学报 2016年第4期38卷 279-283页

作者：孙德君丁国杰藏玉婷宋扬何希君周建华李继昌东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001

传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染鸡的临床诊断主要检测法氏囊组织的病理变化,包括分析感染组和对照组的法氏囊重量与体重比值(囊重指数)。本研究采用IBDV强毒株BC6-85感染22日龄SPF鸡3 d后,对其免疫器官法氏囊、脾脏及胸腺的重量和组织病... 详细信息

传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染鸡的临床诊断主要检测法氏囊组织的病理变化,包括分析感染组和对照组的法氏囊重量与体重比值(囊重指数)。本研究采用IBDV强毒株BC6-85感染22日龄SPF鸡3 d后,对其免疫器官法氏囊、脾脏及胸腺的重量和组织病理变化等进行检测。研究显示,与健康对照组相比,感染组的法氏囊虽然呈现明显病理变化,但平均囊重指数无显著减少。此外,鸡感染IBDV后脾脏也发生了明显的外观和组织学病理变化,特别是其重量与体重的比值增加极其显著(p<0.01),并且感染组内各样本的脾脏重量与对应体重显著相关(r=0.695,p=0.026)。IBDV感染鸡的胸腺未发现明显病理改变。以上虽然仅为IBDV特定病毒株的结果,且样本数量有限,但提示作为重要的B淋巴细胞和单核/巨噬细胞器官,脾脏在IBDV感染鸡的重量与体重比,(脾重指数,本研究为1.66)可以考虑成为临床和现地快速诊断法氏囊病的参考指标之一。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒法氏囊脾脏囊重指数

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宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究

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中国预防兽医学报 2016年第6期38卷 429-433页

作者：胡丹王斌冷有龙王玉杰于群郑永辉范春玲黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA(g RNA)敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p ... 详细信息

ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA(g RNA)敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p Cas9-EGFP共转染至人肺腺癌细胞A549中,采用流式分选及限制性稀释的方法筛选单细胞克隆株,通过靶基因组测序及western blot检测,筛选获得了erp57基因敲除的A549细胞系。erp57基因敲除细胞系与野生型细胞生长动力学无显著差异。此外,将H1N1亚型流感病毒分别感染野生型和erp57基因敲除细胞系以测定erp57基因敲除对流感病毒复制水平的影响。结果显示流感病毒在erp57基因敲除细胞中的复制显著地受到了抑制,表明ERp57是流感病毒复制过程中的一个关键蛋白。本研究为开发新的抗流感病毒手段提供了相关的实验依据。

关键词： erp57 CRISPR/Cas9系统基因敲除流感病毒

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常州市金坛区畜禽免疫抗体监测的情况分析

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2016年第12期 130-132页

作者：蔡文博吴少莲徐荣军陆则基周娟杨文卫韩凌霞陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 常州市金坛区动物疫病预防控制中心江苏常州213200

为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清... 详细信息

为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清样品进行O型、亚洲Ⅰ型FMD和小反刍兽疫(PPR)的抗体检测;利用血凝抑制试验(HI)对采集的933份鸡血清样品进行高致病性禽流感(HPAI)、新城疫(ND)的抗体检测。结果表明:HPAI、ND、HP-PRRS免疫效果最好,平均免疫抗体合格率基本达到100%;HP-PRRS平均免疫抗体合格率超过99%;PPR、CSF、猪FMD免疫效果较好,平均免疫抗体合格率分别为93.33%、88.84%、88.84%;羊FMD免疫效果良好,O型和亚洲Ⅰ型FMD平均免疫抗体合格率分别为80.00%和82.22%。说明常州市金坛区2015年度春防畜禽免疫情况总体良好,但在免疫程序、动物饲养管理以及免疫技术等方面仍需改进。

关键词：免疫猪瘟高致病性猪蓝耳病口蹄疫小反刍兽疫高致病性禽流感新城疫抗体检测酶联免疫吸附试验(ELISA)

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非人灵长类动物疫病研究进展

非人灵长类动物疫病研究进展

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：尹海畅赵丽丽陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

非人灵长类繁育业是指以猕猴(Macaca mulatt)和食蟹猴(Macaca fascicularis)为主的,以提供科学试验为目的,依赖于猕猴和食蟹猴生殖能力或利用其自然生长而进行的种群数量的增加和质量的提高的繁殖活动的企业单位的集合。我国已是世界上... 详细信息

非人灵长类繁育业是指以猕猴(Macaca mulatt)和食蟹猴(Macaca fascicularis)为主的,以提供科学试验为目的,依赖于猕猴和食蟹猴生殖能力或利用其自然生长而进行的种群数量的增加和质量的提高的繁殖活动的企业单位的集合。我国已是世界上非人灵长类动物分布十分丰富的国家之一。在全世界现生存的200余种非人灵长类动物中,中

关键词：非人灵长类动物食蟹猴

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香鳞毛蕨素抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌活性研究

香鳞毛蕨素抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌活性研究

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：华欣刘思国张万江杨亲祝瑶王秋东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

由于甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现,一些β-内酰胺类药物已经在兽医临床上停止使用,如甲氧西林和苯唑西林。兽医临床上缺乏有效的治疗MRSA引起的动物细菌病的药物,目前市场上的兽药仅恩诺沙星等少数抗生素具有一定程度的抗菌... 详细信息

由于甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现,一些β-内酰胺类药物已经在兽医临床上停止使用,如甲氧西林和苯唑西林。兽医临床上缺乏有效的治疗MRSA引起的动物细菌病的药物,目前市场上的兽药仅恩诺沙星等少数抗生素具有一定程度的抗菌效果。全球科学家都在积极地寻找能够治疗MRSA的抗生素,但是通过美国

关键词：香鳞毛蕨万古霉素抗生素甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌活性研究

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犬冠状病毒HLJ-071和HLJ-073的分离鉴定及遗传演化分析

犬冠状病毒HLJ-071和HLJ-073的分离鉴定及遗传演化分析

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：胡晓亮中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

犬冠状病毒(CCoV)是引起犬急性胃肠炎的重要病原,临床方而表现为呕吐,血便和严重脱水等临床症状,对幼犬危害严重,导致幼犬高的死亡率和发病率。近年来研究表明CCoV在犬中的感染非常普遍,且宿主范围很广。本研究从一只6个月病死犬中通过... 详细信息

犬冠状病毒(CCoV)是引起犬急性胃肠炎的重要病原,临床方而表现为呕吐,血便和严重脱水等临床症状,对幼犬危害严重,导致幼犬高的死亡率和发病率。近年来研究表明CCoV在犬中的感染非常普遍,且宿主范围很广。本研究从一只6个月病死犬中通过细胞分离,噬斑纯化和间接免疫荧光等方法鉴定出2抹犬冠状病毒,HLJ-

关键词：犬冠状病毒 HLJ-071 HLJ-073 演化分析分离鉴定

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禽流感病毒M2蛋白对细胞自噬过程的影响

禽流感病毒M2蛋白对细胞自噬过程的影响

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：谷琳琳马勇包红梅徐海峰孙佳善王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

禽流感病毒(AIV)是在多种宿主体内存在,其中高致病性的禽流感病毒在家禽中传播迅速,具有较高的发病率和致死率,给养殖业造成了巨大威胁。自噬是真核细胞内普遍存在的一种物质分解代谢过程,在清除细胞内的细菌,寄生虫,病毒等病原微生物... 详细信息

禽流感病毒(AIV)是在多种宿主体内存在,其中高致病性的禽流感病毒在家禽中传播迅速,具有较高的发病率和致死率,给养殖业造成了巨大威胁。自噬是真核细胞内普遍存在的一种物质分解代谢过程,在清除细胞内的细菌,寄生虫,病毒等病原微生物过程中有重要作用。病毒作为一种专性的细胞内寄生物,近年来研究表明许多病毒可通过影响细胞的自噬过程,它们通过抑制、增强或利用自噬途径达到在胞内复制和增殖的目的。本实验

关键词：禽流感病毒细胞自噬

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多杀性巴氏杆菌△purF构建及致病性和免疫原性的研究

多杀性巴氏杆菌△purF构建及致病性和免疫原性的研究

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：郭东春王林柏张爱芹刘家森姜骞曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

多杀性巴氏杆菌(Pasteurellarnultocida,***)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染,主要引起的动物疾病包括禽霍乱、猪肺疫、猪萎缩性鼻炎等。利用转录序列选择性捕获技术对多杀性巴氏杆菌C51-17株感染的兔肝脏组织... 详细信息

多杀性巴氏杆菌(Pasteurellarnultocida,***)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染,主要引起的动物疾病包括禽霍乱、猪肺疫、猪萎缩性鼻炎等。利用转录序列选择性捕获技术对多杀性巴氏杆菌C51-17株感染的兔肝脏组织建立了文库,筛选到包括purF基因的31个差异表达基因。PurF是与巴氏

关键词：多杀性巴氏杆菌免疫原性

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