检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2016年第7期38卷 576-579页

作者：刘双红李大鹏徐胜奎谢芳李刚李婷孙斌王春来黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学方法,本实验采用重组表达的HPS细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(r Cdt B)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测HPS血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测HPS阳性血清和其他猪病病原... 详细信息

为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学方法,本实验采用重组表达的HPS细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(r Cdt B)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测HPS血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测HPS阳性血清和其他猪病病原阳性血清,除了HPS阳性血清呈阳性外,其余均为阴性,表明该方法特异性良好。批内重复和批间重复的最大变异系数分别小于7%和8%。此外,将Cdt B-ELISA方法与商品化试剂盒Bio Chek HPS-Opp A间接ELISA抗体检测方法对背景明确的116份HPS阳性血清和112份HPS阴性血清进行检测,商品化试剂盒阳性符合率为25%,阴性血清符合率为100%,总符合率为62%,其中Cdt B-ELISA方法对阳性血清的检出率高于商品化试剂盒。应用Cdt B-ELISA方法检测330份临床猪血清样品,结果显示,HPS抗体阳性检出率为11.8%。该方法可以用于HPS的临床检测,为HPS流行病学调查和防控提供了一种快速有效的检测方法。

关键词：副猪嗜血杆菌 rCdtB 间接ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同灭菌方式对羊草营养品质影响的比较研究

不同灭菌方式对羊草营养品质影响的比较研究

引用

第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：张圆圆陆涛峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队

目的以干羊草为实验对象,比较辐照灭菌和高压灭菌前后及不同灭菌方法对其营养成分的影响情况。方法采用Co60γ射线进行辐照,高压灭菌,按照国标法测定并计算干羊草灭菌前后干常规养分及纤维素的含量。结果羊草经高压灭菌后干物质、粗纤... 详细信息

目的以干羊草为实验对象,比较辐照灭菌和高压灭菌前后及不同灭菌方法对其营养成分的影响情况。方法采用Co60γ射线进行辐照,高压灭菌,按照国标法测定并计算干羊草灭菌前后干常规养分及纤维素的含量。结果羊草经高压灭菌后干物质、粗纤维显著低于灭菌前(P<0.05),辐照后干物质显著低于灭菌前、显著高于灭菌后高压组(P<0.05);辐照后粗纤维显著低于灭菌前及灭菌后高压组(P<0.05);高压灭菌后粗灰分、粗蛋白、磷含量显著低于灭菌前及辐照组(P<0.05);高压及辐照后无氮浸出物含量较灭菌前显著增加(P<0.05)。结论灭菌过程降低了干羊草营养成分的含量,辐照灭菌总体上对其营养成分造成的损失低于高压灭菌,辐照可作为羊草在反刍实验动物粗饲料中应用的灭菌的方法。

关键词：干羊草辐照灭菌高压灭菌营养成分纤维素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠模型的鉴定分析

表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠模型的鉴定分析

引用

第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：王伟尹海畅臧凤霞周长良陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队

目的本研究鉴定分析制备的表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠,为利用转基因小鼠模型探讨抗菌肽的生物学功能及其抗菌机制奠定基础。方法在成功获得转基因小鼠的基础上,运用PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot方法对转基因小鼠进... 详细信息

目的本研究鉴定分析制备的表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠,为利用转基因小鼠模型探讨抗菌肽的生物学功能及其抗菌机制奠定基础。方法在成功获得转基因小鼠的基础上,运用PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot方法对转基因小鼠进行鉴定评价,选取阳性转基因小鼠与野生型(WT)小鼠杂交繁育F1代转基因小鼠。结果经PCR检测证实在转基因小鼠尾、肺、肝、心脏和脾脏均有外源基因的整合;RT-PCR证实抗菌肽基因在小鼠各组织细胞中转录;尾组织中Western blot同样证实了外源基因在转基因小鼠体内表达;共获得21只F0代小鼠,其中有5只小鼠在DNA、RNA以及蛋白水平的检测为阳性。结论本研究建立了转基因动物的检测方法,为进一步在体内评价抗菌肽抑菌活性奠定了基础。

关键词： cecropin-XJ 转基因小鼠模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型

应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型

引用

中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：王伟姜雪婷李永青庞忠兵孙海阳陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队

TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然免疫反应中发挥重要作用。为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型。根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9 mRNA显微注射到IC... 详细信息

TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然免疫反应中发挥重要作用。为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型。根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9 mRNA显微注射到ICR小鼠受精卵;F0代鼠尾基因组PCR、测序证明敲除了13bp,表

关键词： CRISPR/Cas9 基因敲除小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H9N2亚型AIV对海兰白鸡感染和传播特性的研究

H9N2亚型AIV对海兰白鸡感染和传播特性的研究

引用

第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：孟庆文周长良王伟邓瑞坡臧凤霞陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队

目的建立H9N2亚型禽流感病毒感染海兰白鸡的感染模型,了解其对海兰白鸡的致病性,为评价抗流感转基因鸡研究奠定基础。方法将80只4周龄的海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只;攻毒剂量为10～00～7 EID/0.4mL,攻毒方式... 详细信息

目的建立H9N2亚型禽流感病毒感染海兰白鸡的感染模型,了解其对海兰白鸡的致病性,为评价抗流感转基因鸡研究奠定基础。方法将80只4周龄的海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只;攻毒剂量为10～00～7 EID/0.4mL,攻毒方式为滴鼻和点眼,感染24h后放入同居组。感染14d内每天进行临床观察,采集咽拭子和泄殖腔拭子用于病毒分离,感染后7、10、14d测定HI抗体滴度。结果 4周龄海兰白鸡感染H9N2流感病毒后未出现明显的临床症状;攻毒剂量为10～00～1EID/0.4nL的感染组和同居组均未分离到病毒;攻毒剂量为10～20～3EID/0.4mL的感染组排毒期为2～6d,同居组排毒期为4～6d;攻毒剂量为10～40～7 EID/0.4mL感染组排毒期为1～6d,同居组排毒期为2～8d;攻毒剂量为10～20～7 EID/0.4mL感染组和同居组鸡分别于感染后7和10 d开始产生抗体,第14d感染组和同居组鸡的平均抗体滴度（1og 2）分别为7.8±1.4和6.7±1.1。结论该毒株使4周龄海兰白鸡全部感染的最低攻毒剂量为10～3EID/0.4mL,以10～6EID/0.4mL舳攻毒剂量感染鸡,能刺激感染组与同居组鸡产生较高的HI抗体,建立了海兰白鸡的H9N2亚型禽流感病毒感染模型,为H9N2亚型流感病毒的致病机理及表达抗流感基因的转基因鸡研究奠定了基础。

关键词： H9N2 禽流感病毒海兰白鸡感染传播

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

引用

中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 87-91页

作者：王琪汪洋李媛刘素丽邵家日陈莹高丽萍周长平李春艳辛九庆东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径。为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL)IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测... 详细信息

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径。为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL)IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测IL-1β的m RNA表达水平,结果显示LAMPs可以诱导EBL细胞分泌IL-1β,并确定Mmm的LAMPs刺激EBL细胞的最佳时间为6 h,最佳剂量为1μg/m L;将JNK、P38及ERK抑制剂分别加入培养的EBL细胞后,IL-1β的m RNA表达水平均受到显著抑制(p<0.05);将p CMV-HA-TLR2转染EBL细胞使其过表达和抗体封闭TLR2两种方式处理,并采用JNK、P38及ERK抑制剂分别处理EBL细胞,经检测过表达TLR2实验组的IL-1βm RNA表达水平上调,然而抗体封闭TLR2实验组的IL-1βm RNA表达水平下调,表明TLR2通过MAPK信号通路对IL-1β的分泌进行调控;采用牛IL-1β的ELISA试剂盒对细胞上清液中IL-1β浓度的检测结果显示,其与IL-1β的m RNA表达水平变化趋势一致。上述结果表明Mmm的LAMPs可以诱导EBL细胞,激活TLR2依赖的MAPK信号通路,从而引起IL-1β的分泌。

关键词：丝状支原体丝状亚种脂质相关蛋白 MAPK信号通路 IL-1β

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

去除信号肽有利鸡白细胞介素-10 在真核细胞胞浆的积聚

去除信号肽有利鸡白细胞介素-10 在真核细胞胞浆的积聚

引用

第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：韩凌霞杨柳彭蔚宇王丽廷王兴童陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室

目的分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,获得稳定表达chIL-10的细胞系。方法采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信号肽(euchIL-10F)和去信号肽(euchIL-1... 详细信息

目的分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,获得稳定表达chIL-10的细胞系。方法采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信号肽(euchIL-10F)和去信号肽(euchIL-10M)的chIL-10编码基因,克隆入含有报告基因eGFP和新霉素抗性基因(neo)的真核表达载体pEGFP-N1中,获得重组质粒N1-euchIL-10F和N1-euchIL-10M。分别转染中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1),经G418加压筛选、纯化,获得稳定表达chIL-10蛋白的CHO-K1细胞系,利用激光共聚焦试验观察外源蛋白的细胞定位。结果通过RT-PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验,表明euchIL-10F和euchIL-10M均整合人细胞基因组中,且N1-euchI/-10M在胞浆大量表达较强的绿色荧光,而N1-euchIL-10F表达的荧光较弱,且胞浆内含量很低。结论去除信号肽利于chIL-10基因在体外真核细胞胞浆的表达。

关键词：鸡白细胞介素-10 信号肽真核表达 CHO-K1细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

去除信号肽有利鸡白细胞介素-10在真核细胞胞浆的积聚

去除信号肽有利鸡白细胞介素-10在真核细胞胞浆的积聚

引用

第十二届中国实验动物科学年会

作者：韩凌霞杨柳彭蔚宇王丽廷王兴童陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

目的分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,获得稳定表达chIL-10的细胞系.方法采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信号肽(euehIL-10F)和去信号肽(euchIL-1... 详细信息

目的分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,获得稳定表达chIL-10的细胞系.方法采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信号肽(euehIL-10F)和去信号肽(euchIL-10M)的chILL-10编码基因,克隆人含有报告基因eGFP和新霉素抗性基因(neo)的真核表达载体pEGFP-N1中,获得重组质粒N1-euchIL-10F和N1-euchIL-10M.分别转染中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1),经G418加压筛选、纯化,获得稳定表达chIL-10蛋白的CHO-K1细胞系,利用激光共聚焦试验观察外源蛋白的细胞定位.结果通过RT-PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验,表明euchIL-10F和euchIL-10M均整合入细胞基因组中,且N1-euchIL-10M在胞浆大量表达较强的绿色荧光,而N1-euchIL-10F表达的荧光较弱,且胞浆内含量很低.结论去除信号肽利于chIL-10基因在体外真核细胞胞浆的表达.

关键词：鸡白细胞介素-10 信号肽真核表达 CHO-K1细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同灭菌方式对羊草营养品质影响的比较研究

不同灭菌方式对羊草营养品质影响的比较研究

引用

第十二届中国实验动物科学年会

作者：张圆圆陆涛峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队哈尔滨150001

目的以干羊草为实验对象，比较辐照灭菌和高压灭菌前后及不同灭菌方法对其营养成分的影响情况.方法采用Co60γ射线进行辐照，高压灭菌，按照国标法测定并计算干羊草灭菌前后干常规养分及纤维素的含量.结果羊草经高压灭菌后干物质、... 详细信息

目的以干羊草为实验对象，比较辐照灭菌和高压灭菌前后及不同灭菌方法对其营养成分的影响情况.方法采用Co60γ射线进行辐照，高压灭菌，按照国标法测定并计算干羊草灭菌前后干常规养分及纤维素的含量.结果羊草经高压灭菌后干物质、粗纤维显著低于灭菌前(P＜0.05)，辐照后干物质显著低于灭菌前、显著高于灭菌后高压组(P＜0.05);辐照后粗纤维显著低于灭菌前及灭菌后高压组(P＜0.05);高压灭菌后粗灰分、粗蛋白、磷含量显著低于灭菌前及辐照组(P＜0.05);高压及辐照后无氮浸出物含量较灭菌前显著增加(P＜0.05).结论灭菌过程降低了干羊草营养成分的含量，辐照灭菌总体上对其营养成分造成的损失低于高压灭菌，辐照可作为羊草在反刍实验动物粗饲料中应用的灭菌的方法.

关键词：干羊草辐照灭菌高压灭菌营养成分纤维素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡IL-10原核表达抗血清用于体内实验的初步分析

鸡IL-10原核表达抗血清用于体内实验的初步分析

引用

2016第十四届中国北方实验动物科技年会

作者：韩凌霞杨柳彭蔚宇王丽廷王兴童陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

目的：获得鸡白介素-10(chIL-10)的原核表达产物,制备鼠抗血清,分析与真核系统表达的chIL-10的反应原性. 方法：采用RT-PCR从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中扩增编码成熟IL-10的基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),成功... 详细信息

目的：获得鸡白介素-10(chIL-10)的原核表达产物,制备鼠抗血清,分析与真核系统表达的chIL-10的反应原性. 方法：采用RT-PCR从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中扩增编码成熟IL-10的基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),成功构建原核重组质粒pET-chIL-10.转化至大肠杆菌DH5α中IPTG诱导表达,切下含有重组蛋白的SDS-PAGE胶条,免疫制备鼠抗血清.分别与包含信号肽和去除信号肽的chIL-10真核表达细胞系CHO-euchIL-10F和CHO-euchIL-10M进行间接免疫荧光抗体试验(IFA)和蛋白免疫印迹试验(Western blot),验证有无反应性. 结果：构建成功chIL-10的原核表达载体pET-chIL-10,制备了高效价的鼠抗血清,能与表达chIL-10的真核细胞系反应. 结论：原核表达的chIL-10特异性鼠抗血清将能用于体内研究的检测.

关键词：鸡病毒病鸡白介素-10 原核表达鼠抗血清体内实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：