检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 105-110页

作者：高利萍李媛周长平刘素丽邵家日王琪陈莹王显兵辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用。为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码... 详细信息

鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用。为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码225个氨基酸,分子量约25 ku,将其命名为P25)。通过MG膜蛋白组分的提取及western blot鉴定,结果显示P25分布在MG膜的表面。利用PCR扩增MG p25基因并通过定点突变将其序列中TGA终止密码子突变为TGG(编码色氨酸),通过原核表达其编码的重组P25蛋白(r P25),并以r P25作为免疫原免疫兔子制备高免血清。激光共聚焦显微镜观察显示r P25和MG均对鸡胚成纤维细胞系(DF-1)具有明显的粘附作用,而ELISA和流式细胞仪检测结果则表明r P25和MG对DF-1细胞的粘附为特异性粘附,其中r P25抗血清可以明显抑制r P25和MG对DF-1细胞的粘附作用,从而证明P25为MG的一个粘附相关蛋白。

关键词：鸡毒支原体 DF-1细胞激光共聚焦 ELISA 流式细胞仪

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RIG-Ⅰ转基因鸡整合位点分析及种系传递

RIG-Ⅰ转基因鸡整合位点分析及种系传递

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：李永青王伟李亚芳邵玉乐赵生国陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830000 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070

目的本研究通过整合位点序列的克隆及其相关序列特征的研究,阐述外源基因整合机制,探讨多整合位点遗传问题,为繁育纯合子提供指导作用,并为分析外源基因的遗传稳定性奠定基础.本试验以RIG-Ⅰ转基因鸡为试验材料,运用Western blot分析6... 详细信息

目的本研究通过整合位点序列的克隆及其相关序列特征的研究,阐述外源基因整合机制,探讨多整合位点遗传问题,为繁育纯合子提供指导作用,并为分析外源基因的遗传稳定性奠定基础.本试验以RIG-Ⅰ转基因鸡为试验材料,运用Western blot分析6只转基因鸡RIG-Ⅰ基因表达;通过对F0代0468号进行热不对成交错PCR,对其进行外源基因整合位点的检测与测序分析.结果表明：外源基因RIG-Ⅰ在转基因鸡体内正常表达.通过NCBI网站BLAST程序的比对分析,Founder代0468号发现5个分离的整合位点(3、5、8、9和13号染色体),分别命名为TgInS1、TgInS2、TgInS3、TgInS4和TgInS5.通过在各整合位点设计验证引物,发现其后代存在整合位点分离现象.结论上述实验结果表明：表达RIG-Ⅰ的F0代转基因鸡携带的外源基因能够遗传至F1代及F2代,能够通过生殖系遗传给后代,表现出种系传递.

关键词： RIG-Ⅰ 转基因整合位点 Tail-PCR

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西尼罗病毒重组新城疫病毒活载体疫苗的研究

西尼罗病毒重组新城疫病毒活载体疫苗的研究

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：王元智马芹陆涛峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学创新团队

西尼罗热(West Nile fever,WNF)是由是西尼罗病毒(West Nile fever virus,WNV)引起的人兽共患病,在世界范围内广泛分布,对我国造成严重威胁。WNV通过蚊子传播,感染宿主极广,包括鸟类、两栖动物、爬行动物和哺乳动物。对人类接触密切的... 详细信息

西尼罗热(West Nile fever,WNF)是由是西尼罗病毒(West Nile fever virus,WNV)引起的人兽共患病,在世界范围内广泛分布,对我国造成严重威胁。WNV通过蚊子传播,感染宿主极广,包括鸟类、两栖动物、爬行动物和哺乳动物。对人类接触密切的易感动物,如马、禽类和部分鸟类进行免疫,具有重要的兽医卫生和公共卫

关键词：重组新城疫病毒活载体疫苗

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抗水貂阿留申病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

抗水貂阿留申病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的...

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：王元智马芹陆涛峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学创新团队

水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AM D)又称浆细胞增多症(plasmacytasis),是一种由水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)侵害水貂免疫细胞引起的自身免疫系统紊乱、衰竭,同时并发强烈的自身免疫的慢性、传染性疾病。A... 详细信息

水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AM D)又称浆细胞增多症(plasmacytasis),是一种由水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)侵害水貂免疫细胞引起的自身免疫系统紊乱、衰竭,同时并发强烈的自身免疫的慢性、传染性疾病。AMDV抗体不仅不能提供保护能力,相反可造成水貂持续性感染,迄今尚无特异的防治

关键词：双抗体夹心水貂阿留申病毒检测方法单克隆抗体 ELISA

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H9N2亚型AIV对海兰白鸡感染和传播特性的研究

H9N2亚型AIV对海兰白鸡感染和传播特性的研究

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：孟庆文周长良王伟邓瑞坡臧凤霞陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队黑龙江哈尔滨

目的建立H9N2亚型禽流感病毒感染海兰白鸡的感染模型,了解其对海兰白鸡的致病性,为评价抗流感转基因鸡研究奠定基础.方法将80只4周龄的海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只;攻毒剂量为100 ～ 107 EID50/0.4mL,攻毒... 详细信息

目的建立H9N2亚型禽流感病毒感染海兰白鸡的感染模型,了解其对海兰白鸡的致病性,为评价抗流感转基因鸡研究奠定基础.方法将80只4周龄的海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只;攻毒剂量为100 ～ 107 EID50/0.4mL,攻毒方式为滴鼻和点眼,感染24h后放入同居组.感染14d内每天进行临床观察,采集咽拭子和泄殖腔拭子用于病毒分离,感染后7、10、14d测定HI抗体滴度.结果 4周龄海兰白鸡感染H9N2流感病毒后未出现明显的临床症状;攻毒剂量为100～ 101 EID50/0.4mL的感染组和同居组均未分离到病毒;攻毒剂量为102～ 103 EID50/0.4mL的感染组排毒期为2～6d,同居组排毒期为4～ 6d;攻毒剂量为104 ～ 107 EID50/0.4mL感染组排毒期为1～ 6d,同居组排毒期为2～8d;攻毒剂量为102～107 EID50/0.4mL感染组和同居组鸡分别于感染后7和10d开始产生抗体,第14d感染组和同居组鸡的平均抗体滴度(log 2)分别为7.8±1.4和6.7±1.1.结论该毒株使4周龄海兰白鸡全部感染的最低攻毒剂量为103 EID50/0.4mL,以106 EID50/0.4mL的攻毒剂量感染鸡,能刺激感染组与同居组鸡产生较高的HI抗体,建立了海兰白鸡的H9N2亚型禽流感病毒感染模型,为H9N2亚型流感病毒的致病机理及表达抗流感基因的转基因鸡研究奠定了基础.

关键词： H9N2 禽流感病毒海兰白鸡感染传播

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猪戊型肝炎病毒样颗粒的制备及其应用

猪戊型肝炎病毒样颗粒的制备及其应用

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：李海王刚张交儿何希君刘永刚姜成刚王淑杰涂亚斌蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原检测与流行病学团队

由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)导致的疾病日渐引起人们的关注。戊型肝炎在临床上的表现与甲型肝炎类似,主要以感染青壮年为主,病死率小于1%,但是孕妇感染HEV的病死率可高达28%,特别是妊娠末三个月的孕妇。很多报道证明猪是人... 详细信息

由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)导致的疾病日渐引起人们的关注。戊型肝炎在临床上的表现与甲型肝炎类似,主要以感染青壮年为主,病死率小于1%,但是孕妇感染HEV的病死率可高达28%,特别是妊娠末三个月的孕妇。很多报道证明猪是人戊型肝炎病毒感染的主要来源,但是目前国内仍没有上市的动物疫苗及相

关键词：猪戊型肝炎病毒样颗粒戊型肝炎病毒

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猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF1a和ORF1b共同起始病毒负链RNA的形成

猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF1a和ORF1b共同起始病毒负链RNA的形成

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：房琼琼汤艳东刘继婷王同云王钰陶冶刘永刚蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原检测与流行病学团队

猪繁殖与呼吸综合征病毒一直以来对养猪业都是巨大的威胁,其中HP-PRRSV的影响更为严重。之前的研究表明PRRSV的RNA合成与HP-PRRSV的毒力相关。病毒RNA的合成包括基因组RNA的合成以及亚基因组RNA的合成,这些过程需要以负链RNA作为模板。... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒一直以来对养猪业都是巨大的威胁,其中HP-PRRSV的影响更为严重。之前的研究表明PRRSV的RNA合成与HP-PRRSV的毒力相关。病毒RNA的合成包括基因组RNA的合成以及亚基因组RNA的合成,这些过程需要以负链RNA作为模板。可是,负链RNA的合成机制还不太清楚。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV ORF1b 感染性克隆 RNA

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马TRIM5α激活天然免疫信号通路的分子机制研究

马TRIM5α激活天然免疫信号通路的分子机制研究

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：那雷王翠辉林跃智王雪峰杜承王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/马传染病与慢病毒研究创新团队

天然免疫是宿主抵抗外来病原的第一道防线。TRIM5α是存在于多种宿主细胞内抗逆转录病毒天然免疫限制因子,可通过其SPRY结构靶向降解逆转录病毒衣壳蛋白(CA)和激活天然免疫来发挥抗病毒功能。我们发现,相对其它动物而言,马TRIM5α具有... 详细信息

天然免疫是宿主抵抗外来病原的第一道防线。TRIM5α是存在于多种宿主细胞内抗逆转录病毒天然免疫限制因子,可通过其SPRY结构靶向降解逆转录病毒衣壳蛋白(CA)和激活天然免疫来发挥抗病毒功能。我们发现,相对其它动物而言,马TRIM5α具有独特的分子特征,在进化过程中缺失了重要的C末端结构域。灵长类

关键词：天然免疫 TRIM5 信号通路分子机制

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表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠模型的鉴定分析

表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠模型的鉴定分析

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：王伟尹海畅臧凤霞周长良陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队黑龙江哈尔滨150001

目的本研究鉴定分析制备的表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠，为利用转基因小鼠模型探讨抗菌肽的生物学功能及其抗菌机制奠定基础。方法在成功获得转基因小鼠的基础上，运用PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot方法对转基因小... 详细信息

目的本研究鉴定分析制备的表达抗菌肽cecropin-XJ转基因小鼠，为利用转基因小鼠模型探讨抗菌肽的生物学功能及其抗菌机制奠定基础。方法在成功获得转基因小鼠的基础上，运用PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot方法对转基因小鼠进行鉴定评价，选取阳性转基因小鼠与野生型(WT)小鼠杂交繁育F1代转基因小鼠。结果经PCR检测证实在转基因小鼠尾、肺、肝、心脏和脾脏均有外源基因的整合;RT-PCR证实抗菌肽基因在小鼠各组织细胞中转录;尾组织中Western blot同样证实了外源基因在转基因小鼠体内表达;共获得21只F0代小鼠，其中有5只小鼠在DNA、RNA以及蛋白水平的检测为阳性。结论本研究建立了转基因动物的检测方法，为进一步在体内评价抗菌肽抑菌活性奠定了基础。

关键词： cecropin-XJ 转基因小鼠模型

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TLR3基因敲除对小鼠免疫功能影响的初步分析

TLR3基因敲除对小鼠免疫功能影响的初步分析

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2016第十四届中国北方实验动物科技年会

作者：姜雪婷王伟李永青庞中兵孙海阳陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队黑龙江哈尔滨 150001

目的：通过对TLR3基因敲除小鼠免疫相关指标分析,研究TLR3基因敲除对小鼠免疫功能影响,为应用敲除小鼠模型研究TLR3在病毒感染引发的天然免疫反应中的作用及病毒致病的分子机制奠定基础. 方法：PCR、测序分析敲除小鼠基因型;利用聚... 详细信息

目的：通过对TLR3基因敲除小鼠免疫相关指标分析,研究TLR3基因敲除对小鼠免疫功能影响,为应用敲除小鼠模型研究TLR3在病毒感染引发的天然免疫反应中的作用及病毒致病的分子机制奠定基础. 方法：PCR、测序分析敲除小鼠基因型;利用聚肌胞苷酸(Poly I：C)处理24h,通过自动血液计数仪测量分析外周血中淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞百分含量;Real-TimePCR检测TLR3信号通路中TRIF、IFN-β、Mx、IL-6和TNF-α相对表达情况;流式细胞术分析外周血中树突状细胞(CD86)、NK细胞(CD49)、淋巴细胞(CD3、CD8)比例变化. 结果：本实验所用TLR3基因敲除小鼠为纯合子(TLR3-/-),测序表明TLR3基因缺失13个碱基;在Poly I：C刺激下,TLR3-/-小鼠较WT小鼠外周血中淋巴细胞百分比显著降低,单核细胞中性粒细胞显著升高,脾脏中TRIF、IFN-β、Mx、IL-6和TNF-α表达量显著降低,外周血中CD86+细胞比例显著降低,CD49+细胞未见显著差异,细胞毒性T淋巴细胞(CD3+CD8+)显著降低. 结论：在Poly I：C刺激条件下,TLR3基因缺失引起其下游信号转导通路变化,影响IFN-β基因表达及炎性因子的释放,从而影响小鼠免疫功能.

关键词：病毒感染免疫功能 TLR3基因敲除干扰素β 炎性因子

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