检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2015年第12期25卷 71-74,80页

作者：刘海燕赵丽丽牛银杰祝明皓刘胜旺陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学生命科学学院哈尔滨150001

目的建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT-PCR方法。方法根据NCBI下载的20个来自我国不同省份的的I型鸭肝炎病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成一对引物和一条Taq Man探针,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。结果该方... 详细信息

目的建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT-PCR方法。方法根据NCBI下载的20个来自我国不同省份的的I型鸭肝炎病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成一对引物和一条Taq Man探针,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。结果该方法敏感性达20拷贝,比常规PCR敏感性高。其特异性强,对番鸭细小病毒(MDPV),鹅细小病毒(GPV),新城疫病毒(NDV)和禽流感(AIV),鸭减蛋综合征病毒(EDSV),禽网状内皮组织增生症病毒(REV),鸭坦布苏病毒(DTMUV),禽呼肠弧病毒(ARV)8种病毒的检测均为阴性,I型鸭肝炎病毒检测结果为阳性。用建立的方法检测了江苏徐州采集100份样品,阳性率为92%。说明I型鸭肝炎病毒在江苏徐州地区的鸭群中普遍存在。结论建立了I型鸭肝炎病毒荧光定量PCR方法。

关键词： I型鸭肝炎病毒荧光定量RT-PCR 应用

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狂犬病病毒糖蛋白跨膜区和膜内区的替换对其生物学特性的影响

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中国预防兽医学报 2015年第8期37卷 571-575页

作者：于桂梅周微微祖述龙王子龙陈曦葛金英步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室黑龙江哈尔滨150001 河北农业大学动物医学学院河北保定071000

为研究表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G)重组新城疫病毒(r L-RVG)中RV G跨膜区(TM)及膜内区(CT)对RV G蛋白表达、病毒蚀斑的形成以及免疫原性的影响,本研究采用新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的TM和CT替换G蛋白的相应部分,构建出表达RV嵌合G蛋... 详细信息

为研究表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G)重组新城疫病毒(r L-RVG)中RV G跨膜区(TM)及膜内区(CT)对RV G蛋白表达、病毒蚀斑的形成以及免疫原性的影响,本研究采用新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的TM和CT替换G蛋白的相应部分,构建出表达RV嵌合G蛋白(RVGTC)的重组NDV(r L-RVGTC)。激光共聚焦和western blot检测结果显示,r L-RVG和r L-RVGTC在BHK-21细胞中RVG表达量无显著差异;而且r L-RVG与r L-RVGTC在鸡胚中的病毒增殖滴度也无显著差异。但间接免疫荧光结果表明,r L-RVGTC在BHK-21细胞中丧失RV或r L-RVG形成病毒蚀斑的能力。并且以5×107半数鸡胚感染量(EID50)的r L-RVG和r L-RVGTC分别免疫小鼠后,r L-RVGTC诱导产生的RV中和抗体的滴度显著低于r L-RVG诱导的滴度。本实验结果显示TM和CT对RV G的病毒蚀斑形成及其免疫原性是必不可少的。

关键词：狂犬病病毒 G蛋白新城疫病毒 F蛋白跨膜区膜内区

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一例猫胰腺癌的病理学诊断

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2015年第6期 70-70,184页

作者：杜凤林张卓张交儿胡守萍镇赉县畜牧业管理局吉林镇赉137300 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

胰腺癌多发生于中老年人,在发达国家的发病率高于发展中国家。近年来胰腺癌的发病率呈现上升的趋势,并且有年轻化的倾向。随着宠物猫饲养的增加,临床上猫患肿瘤疾病的比例也逐渐增多。哈尔滨兽医研究所病理研究室收到某宠物医院送检的... 详细信息

胰腺癌多发生于中老年人,在发达国家的发病率高于发展中国家。近年来胰腺癌的发病率呈现上升的趋势,并且有年轻化的倾向。随着宠物猫饲养的增加,临床上猫患肿瘤疾病的比例也逐渐增多。哈尔滨兽医研究所病理研究室收到某宠物医院送检的来自于猫体内的不明肿大物,经病理组织学及免疫组织化学检测,最终诊断为胰腺癌。

关键词：胰腺外分泌病理学诊断肿瘤疾病病理组织学宠物猫肿瘤病胰腺肿瘤免疫组织化学组织病理学变化胰腺腺泡

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蓝舌病病毒15型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定

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中国预防兽医学报 2015年第5期37卷 392-396页

作者：张沁孙恩成徐青元杨涛王海秀冯瑜菲李俊平吕爽吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为制备抗蓝舌病病毒(BTV)15型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,并以Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白... 详细信息

为制备抗蓝舌病病毒(BTV)15型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,并以Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白为包被抗原,通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗BTV15VP2蛋白的MAb(2D6)。通过western blot和间接免疫荧光试验对该MAb进行特异性鉴定。结果显示,其仅能够识别BTV15,而不能识别其他血清型BTV以及同种属的中山病毒和茨城病毒,表明该MAb具有良好的反应特异性。利用肽扫描技术对该MAb针对的B细胞表位进行鉴定,确定该MAb识别的抗原表位为15IAPAIIK RYP24。本研究为BTV15特异性抗原检测方法的建立奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒15型 VP2蛋白单克隆抗体抗原表位

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表达西尼罗病毒囊膜糖蛋白PrM/E重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究

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中国预防兽医学报 2015年第8期37卷 585-589页

作者：杨洁温志远葛金英王金良华荣虹邵钰步志高东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

西尼罗病毒(WNV)是一种可以导致人与动物死亡的人兽共患病的虫媒病毒。为构建表达WNV Pr M/E蛋白的重组新城疫病毒(NDV)La Sota疫苗株并对其免疫原性进行评价,本研究利用反向遗传学操作技术将人工合成的WNV pr M/E基因插入至NDV基因组P... 详细信息

西尼罗病毒(WNV)是一种可以导致人与动物死亡的人兽共患病的虫媒病毒。为构建表达WNV Pr M/E蛋白的重组新城疫病毒(NDV)La Sota疫苗株并对其免疫原性进行评价,本研究利用反向遗传学操作技术将人工合成的WNV pr M/E基因插入至NDV基因组P和M基因之间,构建重组病毒r La-WNV-Pr M/E。以重组病毒分别感染BHK-21细胞和免疫小鼠,利用RT-PCR、间接免疫荧光、ELISA和流式细胞术(FACS)检测Pr M/E蛋白的表达情况及免疫效果。结果显示,WNV-Pr M/E蛋白在BHK-21细胞中获得正确表达,免疫小鼠可以诱导其产生高水平的抗Pr M/E蛋白特异性Ig G,并且诱导产生WNV E蛋白表位特异性CD4+和CD8+T细胞免疫反应。以上结果表明本研究构建的r La-WNV-Pr M/E可以作为一种具有前瞻性和储备性且安全有效的西尼罗热防控候选疫苗,对我国应对该病的潜在威胁具有十分重要的意义。

关键词：西尼罗病毒 PrM/E蛋白重组新城疫病毒

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肠炎沙门菌延伸因子EF-Tu缺失株对环境压力的应答变化

肠炎沙门菌延伸因子EF-Tu缺失株对环境压力的应答变化

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：曹俊刘松艳周薇司微王曼宇张童利刘思国于申业中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院吉林农业大学动物科学技术学院东北农业大学动物医学学院

肠炎沙门菌(Salmonella enterica)是一种无宿主特异性的病原菌,不但引起畜禽疾病,而且是一种重要的人类食源性致病菌,具有重要的公共卫生意义。肠炎沙门菌的热不稳定延伸因子EF-Tu(Elongation factorthermo unstable,EF-Tu)由tufA基因编... 详细信息

肠炎沙门菌(Salmonella enterica)是一种无宿主特异性的病原菌,不但引起畜禽疾病,而且是一种重要的人类食源性致病菌,具有重要的公共卫生意义。肠炎沙门菌的热不稳定延伸因子EF-Tu(Elongation factorthermo unstable,EF-Tu)由tufA基因编码,是细菌细胞中含量很丰富的一种蛋白质,其主要生物功能是在蛋白质合成过程

关键词：缺失株肠炎沙门菌 EF-Tu 延伸因子

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重组鸡β-防御素2蛋白的表达与生物学活性鉴定

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东北农业大学学报 2015年第8期46卷 56-60,108页

作者：马得莹张婷婷徐杨高梦莹王秋玲徐倩倩韩宗玺刘胜旺东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001

为探讨鸡β-防御素2(Av BD2)的生物学特性,研究将Av BD2基因克隆到原核表达载体p Pro EX HTa的Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达。Tri... 详细信息

为探讨鸡β-防御素2(Av BD2)的生物学特性,研究将Av BD2基因克隆到原核表达载体p Pro EX HTa的Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达。Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明,His-Av BD2重组蛋白分子质量约12 ku,与预期一致。将该重组蛋白纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗肠炎沙门氏菌、四联球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其溶血活性。结果显示,Av BD2重组蛋白对所测定的4株细菌有显著抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性。该重组蛋白溶血活性极低。

关键词：鸡 AvBD2 重组蛋白抗菌活性

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PRRSV新亚型毒株JL580的基因组变异特征研究

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中国兽药杂志 2015年第5期49卷 12-16页

作者：常晓博赵款叶超姜成刚王淑杰蔡雪辉张辉安同庆吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新分离株JL580遗传变异特征,研究扩增得到了该病毒的全基因组序列,并对GP5和NSP2序列进行了比对分析。结果表明:JL580株属于美洲株,且不同于中国现流行的其他毒株,与中国代表毒株CH-1a的核苷酸同源... 详细信息

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新分离株JL580遗传变异特征,研究扩增得到了该病毒的全基因组序列,并对GP5和NSP2序列进行了比对分析。结果表明:JL580株属于美洲株,且不同于中国现流行的其他毒株,与中国代表毒株CH-1a的核苷酸同源性是84.9%,与HP-PRRSV代表株JXA1、HuN4、TJ的核苷酸同源性分别是84.8%、84.9%、85%。对基因组的进一步分析表明,JL580株GP5蛋白与CH-1a、VR-2332、HuN4相比,R13→Q13,V27→A27,H38→N38,R151→K151;且NSP2存在3处缺失,与HP-PRRSV的30个氨基酸的缺失有明显的不同。JL580分离株的出现表明中国出现了新的PRRSV亚型,这对于PRRSV的防治和新疫苗的研制提供了科学依据。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 JL580 基因组遗传变异

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中国首株H13N6亚型禽流感病毒遗传进化分析及致病性和传播性评估

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中国预防兽医学报 2015年第3期37卷 172-176页

作者：高晓龙范胜涛李胜楠国娇王爱荣孙伟洋李雪虞一聪王铁成李元果桑晓宇于志君张坤高玉伟夏咸柱中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点实验室黑龙江哈尔滨150001 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室吉林长春130062

为了解我国首次分离的H13N6亚型禽流感病毒(AIV)生物学特性,本研究对该分离株进行全基因序列测定和分析,并对其进行BALB/c小鼠和SPF鸡致病性试验以及豚鼠传播试验。序列分析表明HA碱性裂解位点序列为PAISNR↓G,为低致病性AIV。遗传进化... 详细信息

为了解我国首次分离的H13N6亚型禽流感病毒(AIV)生物学特性,本研究对该分离株进行全基因序列测定和分析,并对其进行BALB/c小鼠和SPF鸡致病性试验以及豚鼠传播试验。序列分析表明HA碱性裂解位点序列为PAISNR↓G,为低致病性AIV。遗传进化分析表明NA基因属于北美谱系,其余7个基因均属于欧亚谱系;其中NA、NP、M、NS基因来源于鸥类,而HA、PB2、PB1、PA基因来源于野鸭类。动物致病性和传播试验结果显示,该病毒株在鸡和小鼠体内不能进行有效复制,在豚鼠和鸡体内也不能进行排毒和有效传播。基因序列分析结合致病性和传播性试验表明H13N6亚型AIV分离株可能是通过候鸟迁徙而传入我国的新型重组AIV,但该病毒株仍只能感染野生水禽尚未获得跨越种间屏障感染陆生家禽和人的能力,尚不具备哺乳动物间和家禽间的传播能力。

关键词： H13N6 传播致病力鸡小鼠豚鼠

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一株野鸟源H9N2亚型禽流感病毒的全基因组序列分析及致病性研究

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中国预防兽医学报 2015年第1期37卷 15-18页

作者：张芳王晶卢昆鹏肖丽彭志崔鹏飞关立峥邓国华陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南农业大学湖南长沙410128

为进一步了解2014年分离自我国南方野鸟粪便中的一株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wide Bird/Hu N/SC1400/2014(H9N2)(WB/400/14)的生物学特性,本研究对其进行全基因组序列测定、进化分析及SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显... 详细信息

为进一步了解2014年分离自我国南方野鸟粪便中的一株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wide Bird/Hu N/SC1400/2014(H9N2)(WB/400/14)的生物学特性,本研究对其进行全基因组序列测定、进化分析及SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显示:该分离株的HA裂解位点基序为333PAASDR↓GL340,其中不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)氨基酸序列特征。该分离株不同基因片段来源较复杂,分别与H9、H6、H4、H1、H11、H10、H3等多种亚型的LPAIV同源性较高,呈现明显的多样性。感染性试验显示,WB/400/14不能够在SPF鸡和小鼠体内有效复制,但病毒感染SPF鸭后能够在部分脏器中检测到病毒的存在,并且感染鸭能通够过咽喉和泄殖腔同时向外排毒,而同居感染鸭仅通过泄殖腔向外排毒,表明分离株在SPF鸭群中具有良好的水平传播能力。本研究为AIV的监测和防控提供实验依据。

关键词：野鸟禽流感病毒 H9N2亚型感染性

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