检索结果-内蒙古大学图书馆

MDV感染B19、B21单倍型SPF鸡外周血淋巴细胞BLec1、BNK及细胞因子基因转录水平比较

畜牧兽医学报 2015年第7期46卷 1184-1190页

作者：宁官保田文霞张园华张鼎张晓娜韩凌霞山西农业大学动物科技学院太谷030801 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学创新团队中心/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 华中农业大学动物医学院武汉430070

本研究旨在揭示BLec1、BNK及细胞因子在B21和B19两种单倍型鸡对马立克病(MD)抗性差异中的可能机制。分别对B21和B19单倍型1日龄鸡腹腔接种马立克病毒(MDV)超强毒株,在攻毒后不同时间检测鸡外周血淋巴细胞中BLec1、BNK及IFN-γ、IL-4、IL... 详细信息

本研究旨在揭示BLec1、BNK及细胞因子在B21和B19两种单倍型鸡对马立克病(MD)抗性差异中的可能机制。分别对B21和B19单倍型1日龄鸡腹腔接种马立克病毒(MDV)超强毒株,在攻毒后不同时间检测鸡外周血淋巴细胞中BLec1、BNK及IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-18的基因转录水平。结果显示,在第4、7天,两种鸡BNK、BLec1和4种细胞因子水平表现出不同程度的降低。在第10天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IFN-γ、IL-4和IL-18基因转录量出现不同程度的升高,而B19单倍型鸡中细胞因子转录水平有所下降。在第13天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IL-18和IL-10基因转录量表现出不同程度的升高,而B19单倍型鸡中则有所下降。以上结果总体表明,MD耐受型鸡在感染沉默期BNK、BLec1和细胞因子转录量高于敏感型,不同遗传基因型鸡对MD的抗性差异与耐受基因及细胞因子的转录情况有着密切的关系。

关键词：细胞因子 BLec1 BNK 基因转录

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猪传染性胃肠炎病毒感染PK15细胞抗病毒相关因子转录变化分析

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东北农业大学学报 2015年第11期46卷 22-27页

作者：胡晓亮刘家森田进姜骞郭东春曲娟娟曲连东东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

为研究猪传染性胃肠炎病毒感染与固有免疫之间关系,研究构建含有巴马猪IFN-α1,IFN-β和NF-κB启动子的报告基因载体,将转染上述报告基因的PK15细胞接种TGEV和灭活TGEV后发现,与灭活TGEV相比,TGEV能够诱导IFN-α1、IFN-β和NF-κB报告... 详细信息

为研究猪传染性胃肠炎病毒感染与固有免疫之间关系,研究构建含有巴马猪IFN-α1,IFN-β和NF-κB启动子的报告基因载体,将转染上述报告基因的PK15细胞接种TGEV和灭活TGEV后发现,与灭活TGEV相比,TGEV能够诱导IFN-α1、IFN-β和NF-κB报告基因低水平表达;其次,利用荧光定量RT-PCR方法检测接种病毒0、2、6和10 h后PK15细胞中IFN-α1、IFN-β、IL6、TNF-α、ISG56和IRF7转录量,结果表明,TGEV对IL6转录没有影响,而诱导IFN-α1、IFN-β、TNF-α、ISG56和IRF7低水平转录,分别为对照组1.49、1.5、2.2、2.5和1.8倍。

关键词：猪传染性胃肠炎细胞因子 PK15细胞转录时相

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EvaGreen实时荧光定量PCR检测H3N8亚型马流感病毒方法的建立

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黑龙江畜牧兽医 2015年第9期 29-32页

作者：朱超郭巍胡哲赵钊刘彦辰王晓钧曲娟娟东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室/马传染病和慢病毒研究团队哈尔滨150001

为了特异性地检测H3N8亚型马流感病毒,试验根据H3N8亚型马流感病毒(EIV)HA基因特异保守序列设计1对引物,建立了检测H3N8亚型EIV的Eva Green实时荧光定量PCR方法,并对该方法进行评价。结果表明:该方法能特异性地扩增H3N8亚型EIV,而对H7N... 详细信息

为了特异性地检测H3N8亚型马流感病毒,试验根据H3N8亚型马流感病毒(EIV)HA基因特异保守序列设计1对引物,建立了检测H3N8亚型EIV的Eva Green实时荧光定量PCR方法,并对该方法进行评价。结果表明:该方法能特异性地扩增H3N8亚型EIV,而对H7N7亚型EIV、马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马疱疹病毒均无特异性反应;最低检测限度能达到10拷贝/μL;并且该方法具有良好的重复性。说明Eva Green这种新型荧光染料可以敏感有效地检测EIV,可用于马流感的诊断。

关键词： H3N8亚型马流感病毒 EvaGreen实时荧光定量PCR 方法建立

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一株抗猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定

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中国预防兽医学报 2015年第7期37卷 553-556页

作者：张泉张元峰黄丽王胜男蔡雪辉熊涛翁长江长江大学生命科学学院湖北荆州434025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队黑龙江哈尔滨150001

为制备抗猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白(r VP2),纯化后将其免疫BALB/c小鼠,取免疫的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出一株稳定分泌... 详细信息

为制备抗猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白(r VP2),纯化后将其免疫BALB/c小鼠,取免疫的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出一株稳定分泌抗VP2 MAb(1D3)。通过间接免疫荧光试验和western blot对该MAb的免疫活性和特异性进行鉴定,结果表明1D3 MAb仅能够特异性与EMCV全病毒反应。此外,通过构建截短的VP2蛋白重组质粒,采用western blot的方法对VP2蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 1D3识别的线性表位区域为89DGGVFGAALRRH100。本实验结果为进一步研究VP2蛋白的功能及建立EMCV检测方法奠定了基础。

关键词：猪脑心肌炎病毒 VP2蛋白单克隆抗体抗原表位

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2株鸭源 H11N9亚型禽流感病毒的基因遗传进化及致病性分析

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动物医学进展 2015年第2期 25-28页

作者：谭丹黄建龙王昌建何世成王卫国唐小明朱春霞范仲鑫汪洪冰刘道新邓国华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨150001 长沙市动物疫病预防控制中心，湖南长沙410006 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了解从湖南省洞庭湖区鸭群中分离的2株 H11N9亚型禽流感病毒变异特点、进化规律及生物学特性，本研究对2株H11N9亚型禽流感病毒的HA、NA序列进行同源性和遗传进化分析，并用2株毒株对SPF鸡进行致病性试验。结果显示，本试验分离到2株 ... 详细信息

为了解从湖南省洞庭湖区鸭群中分离的2株 H11N9亚型禽流感病毒变异特点、进化规律及生物学特性，本研究对2株H11N9亚型禽流感病毒的HA、NA序列进行同源性和遗传进化分析，并用2株毒株对SPF鸡进行致病性试验。结果显示，本试验分离到2株 H11N9亚型禽流感毒株的 HA裂解位点均没有多个连续的碱性氨基酸插入，属于低致病性毒株；HA基因的受体结合位点均非常保守，具有典型的禽源性特征；NA基因序列与在周边国家野鸟中分离的H11N9亚型毒株的氨基酸同源性较高；鼻腔接种SPF鸡后，均能使鸡感染并通过喉头或泄殖腔排毒，但感染的鸡均不表现明显的临床症状，并且不能使同居鸡感染排毒。

关键词： H11N9亚型禽流感遗传进化致病性

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抗禽白血病病毒p27蛋白线性抗原表位的鉴定

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中国预防兽医学报 2015年第8期37卷 632-635页

作者：李晓菲朱海波高奇王琦孙佳善高玉龙祁小乐王永强高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽免疫抑制病科技创新团队黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨动物用生物制品国家工程研究中心有限公司黑龙江哈尔滨150001

为鉴定禽白血病病毒(ALV)p27蛋白中的线性抗原表位,本研究以原核表达的重组p27蛋白免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,将免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA方法筛选纯化获得一株能够稳定分泌特异性单克隆抗体(MAb)的杂交... 详细信息

为鉴定禽白血病病毒(ALV)p27蛋白中的线性抗原表位,本研究以原核表达的重组p27蛋白免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,将免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA方法筛选纯化获得一株能够稳定分泌特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。Western blot试验结果显示,该MAb可以识别ALV的群特异性抗原p27蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,MAb与A、B和J亚群ALV均呈阳性反应。对p27蛋白进行截短表达,利用western blot和间接ELISA进行表位鉴定,确定了MAb所识别的抗原表位位于129LVAITASALQAFRE142。氨基酸序列比对结果显示,本研究所鉴定出的p27表位在A、B和J亚群ALV之间高度保守。本研究为ALV检测方法的建立及其免疫学功能的研究提供了有利的工具。

关键词：禽白血病病毒 p27蛋白单克隆抗体抗原表位

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一株鸭源新城疫病毒分子特性及对SPF鸡、鸭致病性的比较研究

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实验动物与比较医学 2015年第1期35卷 65-70页

作者：吴伟刘怀然刘胜旺陈洪岩东北农业大学哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

目的研究一株鸭源新城疫病毒分子的特性，并比较其对SPF鸡和SPF鸭致病性的不同。方法将分离到的病毒克隆、测序并用SPF鸡和SPF鸭分别评价该毒株的致病性。结果Du／CH／LGD／358／2011的基因组由15198个核苷酸序列组成，编码6种结构蛋白... 详细信息

目的研究一株鸭源新城疫病毒分子的特性，并比较其对SPF鸡和SPF鸭致病性的不同。方法将分离到的病毒克隆、测序并用SPF鸡和SPF鸭分别评价该毒株的致病性。结果Du／CH／LGD／358／2011的基因组由15198个核苷酸序列组成，编码6种结构蛋白。F基因裂解位点的氨基酸序列为112ERQER／L117。通过全基因组核苷酸序列和F基因高变区核苷酸序列构建遗传进化树，证明该毒株属于classI基因3b型，与香港活禽市场分离到的毒株类似，但略有不同。该毒株对SPF鸡和SPF鸭的致病性基本一致。结论该毒株为弱毒株，使用SPF鸡和SPF鸭均可以对鸭源弱毒株进行致病性评价，为SPF鸭的检测提供理论依据。

关键词：新城疫病毒 SPF鸭 SPF鸡致病性分子特性

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应用宏基因组学鉴定国内第一株鸭2型腺病毒

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中国预防兽医学报 2015年第12期37卷 903-907页

作者：陈峰招丽婵覃健萍周庆丰罗玉子林丽苗操胜李海燕华南农业大学动物科学院广东广州510642 广东温氏食品集团股份有限公司温氏集团研究院(技术中心) 广东云浮527439 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为分离鉴定广东某养鸭场疑似"肝坏死"病例的病原,本研究将采集的病料样品感染番鸭胚及番鸭胚成纤维细胞(MDEF)进行病原分离,提取出现细胞病变培养物的核酸,采用宏基因组学方法,以随机引物反转录并合成双链DNA进行PCR扩增,扩... 详细信息

为分离鉴定广东某养鸭场疑似"肝坏死"病例的病原,本研究将采集的病料样品感染番鸭胚及番鸭胚成纤维细胞(MDEF)进行病原分离,提取出现细胞病变培养物的核酸,采用宏基因组学方法,以随机引物反转录并合成双链DNA进行PCR扩增,扩增产物进行分子克隆和测序分析。结果显示:F6代分离的病毒滴度为log10^(5.0)TCID_(50)/m L,能够导致9日龄~11日龄番鸭胚死亡及MDEF产生明显细胞病变。50个随机克隆经Gen Bank检索有28个为鸭2型腺病毒(DAd V-2)同源序列,核苷酸同源性为92%~99%。28个同源序列形成8个毗连序列群,共计15 107 bp,覆盖DAd V-2基因组全长的34.54%,分离株与Gen Bank中唯一的DAd V-2 GR分离株亲缘关系最近,其部分hexon基因编码的氨基酸同源性为83.3%。参照测定序列设计的引物能够特异性扩增病毒基因。本研究首次应用宏基因组学分离获得国内首株DAd V-2,也是迄今除了法国以外国内首次报道的DAd V-2分离株。

关键词：宏基因组鸭2型腺病毒分离鉴定

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禽流感监测

禽流感监测

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第四届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：邓国华施建忠崔鹏飞张芳王晶李文辉陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

本研究通过对全国家禽活禽交易市场、养殖场、家禽屠宰场的家禽进行持续监测和样品采集,采集的样品经SPF鸡胚接种进行病毒分离鉴定,对不同群体分离的病毒进行病毒表面基因序列测定和序列比较分析,选择其中代表性毒株进行全基因组序列进... 详细信息

本研究通过对全国家禽活禽交易市场、养殖场、家禽屠宰场的家禽进行持续监测和样品采集,采集的样品经SPF鸡胚接种进行病毒分离鉴定,对不同群体分离的病毒进行病毒表面基因序列测定和序列比较分析,选择其中代表性毒株进行全基因组序列进化比较分析。结果发现,在我国家禽中可以分离到多种亚型禽流感病毒存在,涉及的禽流感病毒亚型有H1、H3、H4、H5、H6、H7、H9、H10和H11等多种亚型,病毒NA亚型组合多样;活禽市场禽流感病毒污染严重,水禽携带多种亚型禽流感病毒。H5的监测发现,我国南方地区到2010年监测到的H5亚型禽流感病毒毒株的类型逐渐由原来主要流行的2.3.4分支类型转变为2.3.2分支类型;同时,于2013年下半年在南方地区首先大面积监测到新侵入的2.3.4.4分支新型流感病毒在水禽中出现,随后在全国各地均监测到该类型病毒的存在,各地区新分离的病毒表现出明显的复杂性,其病毒的

关键词：禽流感病毒流感监测

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ELR1和eCyclinT1转基因小鼠的构建及其对马传染性贫血病毒易感性的研究

ELR1和eCyclinT1转基因小鼠的构建及其对马传染性贫血病毒易感性...

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第十一届全国病毒学学术研讨会暨第六届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：杜承马建李云飞刘强林跃智王雪峰周建华孟庆文王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨

马传染性贫血病(Equine infectious anemia,EIA),是由马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)感染引起的马属动物的一种传染病,以持续感染、反复发热和贫血为特征,为国际兽疫局(Office International Des Epizooties,O... 详细信息

关键词：马传染性贫血病毒 ELR1 eCyclinT1 转基因小鼠

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