检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2011年第5期33卷 391-394页

作者：石跃刘怀然刘培欣李东伟杨煦华育平孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨150025

为研究分离自黑龙江三江自然保护区的野生绿头鸭粪拭子中的一株新城疫病毒(命名为Mallard/CH/HLJ383/06)主要生物学特性及基因组序列,本实验对病毒F基因序列进行测定,结果表明该病毒分离株属于NDV基因Ⅲ型,病毒的1日龄雏鸡脑内致病指数(... 详细信息

为研究分离自黑龙江三江自然保护区的野生绿头鸭粪拭子中的一株新城疫病毒(命名为Mallard/CH/HLJ383/06)主要生物学特性及基因组序列,本实验对病毒F基因序列进行测定,结果表明该病毒分离株属于NDV基因Ⅲ型,病毒的1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)为1.81,高于NDV中等毒力病毒株ICPI值,预示该病毒分离株毒力有增强趋势。15日龄SPF鸡致病性试验表明,该病毒分离株可导致雏鸡发病但不死亡,致病性仍低于与其ICPI值相近的基因Ⅶ型毒株。对该病毒分离株进行全基因组序列分析表明:该病毒分离株与Ⅰ系疫苗病毒Mukteswar、江苏2株基因Ⅲ型分离株(JS/7/05/Ch,JS/9/05/Go)结构蛋白氨基酸同源性高达99.0%～99.7%;与疫苗株Mukteswar相比,3株基因Ⅲ型病毒分离株在F蛋白中只有1个共同的氨基酸位点变异(A203T);HN蛋白中存在15个变异氨基酸,但位置各不相同;L蛋白中变异位点最多,为28个,其中有4个变异位点为3个分离株所共有。以上结果初步表明,Mallard/CH/HLJ383/06株可能是由疫苗株Mukteswar在野禽、家禽生态系统中传播进化而来,并由于宿主或免疫压力而发生毒力变异;分离株L蛋白氨基酸位点的变异,可能是导致病毒株毒力返强主要因素之一。

关键词：新城疫病毒野鸭基因Ⅲ型毒力基因组

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新城疫病毒F48E9株重组NP蛋白单克隆抗体制备及鉴定

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东北农业大学学报 2011年第9期42卷 131-135,147页

作者：刘文丽刘怀然刘培欣张馨心孔宪刚陈维多东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001 黑龙江中医药大学哈尔滨150040

制备新城疫病毒(NDV)NP蛋白单抗,以期为NDV抗原表位研究及检测方法建立方面奠定基础。利用NDV F48E9株pET32a-NP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,间接ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗NP重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分... 详细信息

制备新城疫病毒(NDV)NP蛋白单抗,以期为NDV抗原表位研究及检测方法建立方面奠定基础。利用NDV F48E9株pET32a-NP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,间接ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗NP重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G3、4B12。经间接ELISA测定,腹水抗体效价分别为1 2.56×105、1 5.12×105。亚类鉴定结果表明这两株单抗均为IgG1。Western blot分析结果显示,1G3、4B12均能特异性识别重组NP蛋白。与NDV感染细胞经间接免疫荧光试验检测均呈黄绿色荧光。经相加ELISA测定表明两株单抗识别的抗原表位不同。

关键词：新城疫病毒 F48E9 NP蛋白单克隆抗体

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现代生物技术在猪病诊断和防治中的应用

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猪业科学 2011年第8期28卷 32-37页

作者：崔宇超崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

生物技术是指应用生命科学研究成果,以人们意志设计,对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。现在,多种猪病混合感染严重威胁着我国的养猪业。本文简述了生物技术在猪病的诊断和防治中的部分应用。生物技术在猪病诊断中的应用主要包... 详细信息

生物技术是指应用生命科学研究成果,以人们意志设计,对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。现在,多种猪病混合感染严重威胁着我国的养猪业。本文简述了生物技术在猪病的诊断和防治中的部分应用。生物技术在猪病诊断中的应用主要包括蛋白的克隆表达与纯化技术,从而做成敏感性、特异性高的试剂盒;生物技术在猪病防治中的应用主要包括研单位疫苗、(非复制性及)活载体疫苗和干扰素等。生物技术在猪病的诊断和防治中还有很多其他应用,本文只是抛砖引玉。

关键词：生物技术猪病诊断防治

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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因突变对病毒体外复制的影响

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畜牧兽医学报 2011年第11期42卷 1577-1583页

作者：祁小乐高立吴关邓小芸余飞张礼洲秦立廷高玉龙王永强高宏雷刘娣华育平王笑梅东北林业大学博士后流动站黑龙江省农业科学院博士后工作站哈尔滨150086 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001 黑龙江科技职业学院双城150111

为了进一步了解影响鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制效率和致病力的分子基础,作者在序列分析的基础上,利用反向遗传操作技术,针对VP2上2个重要的氨基酸位点(222和279),修饰和拯救了相应的2株突变病毒,并研究了突变病毒在体内外的生物学... 详细信息

为了进一步了解影响鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制效率和致病力的分子基础,作者在序列分析的基础上,利用反向遗传操作技术,针对VP2上2个重要的氨基酸位点(222和279),修饰和拯救了相应的2株突变病毒,并研究了突变病毒在体内外的生物学特性。复制动力学数据显示,VP2的222位由酪氨酸突变为脯氨酸可将IBDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的复制滴度提高6倍以上,而279位氨基酸对病毒复制效率无显著影响。SPF鸡的感染试验显示,222位和279位氨基酸与IBDV的致病力没有关系。本研究首次报道了VP2 222位和279位氨基酸与IBDV复制效率和致病力的关系,有助于更加全面地了解IBDV的基因功能,也将为新型IBDV疫苗的设计提供依据和思路。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因复制致病力反向遗传

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牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的多克隆抗体制备及鉴定

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中国预防兽医学报 2011年第3期33卷 227-231页

作者：高欲燃朱远茂康健史鸿飞李娇任宪刚冯军科于作薛飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白的兔源多克隆抗体,本研究利用表达BVDV E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化*** BL21(DE3),经诱导表达获得重组E2蛋白。Western blot检测显示纯化蛋白能够与BVDV参考阳性血清反应。以纯化的重组E2蛋... 详细信息

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白的兔源多克隆抗体,本研究利用表达BVDV E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化*** BL21(DE3),经诱导表达获得重组E2蛋白。Western blot检测显示纯化蛋白能够与BVDV参考阳性血清反应。以纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,病毒中和试验测定其中和效价为1:2048,间接免疫荧光和western blot试验表明其具有良好的反应性和特异性。本研究制备的BVDV重组E2蛋白兔源多克隆抗体可应用于BVDV的检测,同时为进一步建立检测BVDV E2蛋白的ELISA方法奠定基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白多克隆抗体

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猪传染性胃肠炎的综合防制

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兽医导刊 2011年第3期 27-28页

作者：陈建飞冯力时洪艳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪传染性胃肠炎（TGE）是由尼多目、冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪的一种高度接触传染性的肠道疾病，以引起14日龄以内仔猪呕吐、严重腹泻和高死亡率（可高达100％）为特征。虽然不同年龄的猪对该病毒均易感，但5周... 详细信息

猪传染性胃肠炎（TGE）是由尼多目、冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪的一种高度接触传染性的肠道疾病，以引起14日龄以内仔猪呕吐、严重腹泻和高死亡率（可高达100％）为特征。虽然不同年龄的猪对该病毒均易感，但5周龄以上猪的死亡率则很低。1945年Doyle和Hutchings首次报道美国发生了本病，

关键词：猪传染性胃肠炎病毒综合防制接触传染性冠状病毒科肠道疾病死亡率呕吐仔猪

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2010—2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施

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养猪 2011年第5期 81-83页

作者：陈建飞刘孝珍时洪艳仇华吉刘长明冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

自2010年12月起，我国主要养猪省份相继出现了以哺乳仔猪腹泻和高死亡率为特征的猪病，给我国的养猪业造成了很大的经济损失，导致我国猪肉价格不断上涨。对于该次哺乳仔猪腹泻的病因众说纷纭，使广大猪场管理人员感到迷惑和恐慌。笔者... 详细信息

自2010年12月起，我国主要养猪省份相继出现了以哺乳仔猪腹泻和高死亡率为特征的猪病，给我国的养猪业造成了很大的经济损失，导致我国猪肉价格不断上涨。对于该次哺乳仔猪腹泻的病因众说纷纭，使广大猪场管理人员感到迷惑和恐慌。笔者多次和现地养猪场的管理人员、技术人员及哈尔滨维科生物技术开发公司的业务员进行交流，了解现地猪场的疫情，归纳总结了2011年哺乳仔猪腹泻病的特征。

关键词：哺乳仔猪腹泻病因分析哈尔滨维科生物技术开发公司防控措施管理人员养猪场经济损失技术人员

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猪干扰素基因在腺病毒的表达及应用

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养猪 2011年第3期 61-64页

作者：崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

多年来,疫苗免疫接种一直是一种预防大范围传染病暴发的有效措施之一。目前被广泛用来进行免疫控制传染病以及自身免疫病和癌症等疾病的治疗。免疫接种的优点是促使先天性免疫细胞产生免疫记忆细胞,从而使机体针对特定的病原体产生持久... 详细信息

多年来,疫苗免疫接种一直是一种预防大范围传染病暴发的有效措施之一。目前被广泛用来进行免疫控制传染病以及自身免疫病和癌症等疾病的治疗。免疫接种的优点是促使先天性免疫细胞产生免疫记忆细胞,从而使机体针对特定的病原体产生持久的免疫保护。

关键词：干扰素基因腺病毒疫苗免疫接种应用自身免疫病免疫控制记忆细胞免疫细胞

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Genomic Sequencing and Molecular Characteristics of A Very Virulent Strain of Infectious Bursal Disease Virus Isolated in China

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Agricultural Science & Technology 2011年第12期12卷 1946-1949页

作者：祁小乐高立秦立廷邓小芸吴关张礼洲余飞任宪刚高玉龙高宏雷王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

[Objective] The paper was to determine the genomic sequence of a very virulent strain of infectious bursal disease virus（IBDV）,and study its molecular characteristics.[Method] A very virulent strain（vvIBDV）（HLJ-0504） of infectious bursal disease virus（IBDV） with special characters was isolated in China and its genome was sequenced.[Result] Sequence analysis showed that segment A of HLJ-0504 was derived from vvIBDV,while segment B was from a distinct *** morbidity and mortality of HLJ-0504 was 100% and 86.7%to SPF chickens,respectively.[Conclusion] vvIBDV with distinct segment B were still circulating and the evolution of IBDV was diversified in ***,it is hard to imagine that the virulence of IBDV is determined solely by segment A or B.

关键词： Infectious bursal disease virus（IBDV） Genome Evolution Virulence

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猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白全长的原核表达及其反应原性分析

猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白全长的原核表达及其反应原性分析

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中关村全球农业生物技术创新论坛

作者：张志榜陈建飞时洪艳陈小金冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

根据猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白的基因组序列，设计一对引物，采用RT-PCR方法扩增出M基因，将其克隆至原核表达载体pMXB10,构建了重组质粒pMXB-M，经测序鉴定正确后转化感受态细胞BL21(DE3)，并进行IPTG诱导表达。结果表明重组菌pMXB-... 详细信息

根据猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白的基因组序列，设计一对引物，采用RT-PCR方法扩增出M基因，将其克隆至原核表达载体pMXB10,构建了重组质粒pMXB-M，经测序鉴定正确后转化感受态细胞BL21(DE3)，并进行IPTG诱导表达。结果表明重组菌pMXB-M表达的融合蛋白MBP-M-CBD(rM)的分子质量约为951ku。在IPTG的浓度为0.8mmol/L，诱导时间为5h时，重组菌的表达效果最好，重组蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。Western-blot结果显示，rM能与兔抗PEDV多克隆血清及PEDVM蛋白单克隆抗体发生特异的免疫印迹反应，表明原核表达的rM蛋白具有良好的反应原性，为进一步开展关于PEDV M蛋白的研究奠定基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒跨膜蛋白原核表达免疫印迹

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