检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农学通报 2014年第32期30卷 15-20页

作者：黄建龙王昌建谭丹邓国华范仲鑫朱春霞张朝阳刘道新湖南省动物疫病预防控制中心长沙410014 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了解洞庭湖区H10亚型禽流感病毒的流行分布及遗传进化情况,为该地区H10亚型禽流感的防控及该亚型病毒在禽流感病毒进化中所起的作用提供一些参考。在环洞庭湖地区活禽批发市场和水禽场上采集家禽和环境拭子,对其进行病原分离、鉴定和... 详细信息

为了解洞庭湖区H10亚型禽流感病毒的流行分布及遗传进化情况,为该地区H10亚型禽流感的防控及该亚型病毒在禽流感病毒进化中所起的作用提供一些参考。在环洞庭湖地区活禽批发市场和水禽场上采集家禽和环境拭子,对其进行病原分离、鉴定和测序,应用Mega 5软件包对病毒基因进行多序列比对和进化树的绘制与分析。结果显示:在活禽批发市场上总共分离到11株H10亚型禽流感病毒,分离的H10亚型禽流感阳性样品全来源于鸭拭子;在1个鸭场分离到2株H10亚型禽流感病毒;其中2株分离毒株序列分析显示其HA蛋白的裂解位点为PELMQGR/GLF,属于低致病性病毒,与以往在其他国家(蒙古、瑞典、荷兰、泰国、日本等)野鸟中分离的H10亚型病毒处于同一分支。

关键词： H10亚型禽流感病毒洞庭湖区监测遗传进化

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辽宁省某市奶牛布病感染状况及群间传播风险因素调查

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中国动物检疫 2014年第11期31卷 51-54页

作者：崔基贤王靖飞谷志大辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁省动物医学研究院辽宁沈阳110164 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001

为了解辽宁省某市的奶牛布鲁氏菌病(简称奶牛布病)流行现状及该市奶牛布病群间传播风险因素,开展本研究。对该市辖区内所有奶牛进行布鲁氏菌病的普查,获知该市奶牛布病的表观个体血清流行率和表观群血清流行率;采用问卷调查方式进一步... 详细信息

为了解辽宁省某市的奶牛布鲁氏菌病(简称奶牛布病)流行现状及该市奶牛布病群间传播风险因素,开展本研究。对该市辖区内所有奶牛进行布鲁氏菌病的普查,获知该市奶牛布病的表观个体血清流行率和表观群血清流行率;采用问卷调查方式进一步开展病例-对照研究,初步筛选出14项该市奶牛布病群间传播可能风险因素,经相关性检验结合生物学知识,选取了5个变量进入多因素分析,最终通过非条件logistic回归方法初步建立了该市奶牛布病群间传播风险因素回归模型,并建立ROC曲线计算了模型的预测概率。研究结果显示,该市奶牛个体流行率为0.99%,群流行率12.44%。非条件logistic回归分析结果显示,该市奶牛布病群间传播的风险因素包括:"无专用购销车辆"(OR=3.57,95%CI:1.04-12.5,p=0.04),"进圈时不穿专用工作服和胶靴"(OR=5.0,95%CI:0.97-25.00,p=0.06),"与犬混养"(OR=12.39,95%CI:0.97-157.56,p=0.05)。该结果表明与犬混养可能是该市奶牛布病群间传播重要的风险因素,而奶牛销售时自有购销专用车辆和场内生物安全措施的采取如进圈穿专用工作服可使奶牛布病在场群间传播的风险降低。针对回归模型建立的ROC曲线下面积为71.6%,表明此模型解释该市奶牛布病群间传播风险的能力为中等。

关键词：奶牛布鲁氏菌病流行率风险因素

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辽宁省一起输入性小反刍兽疫紧急流行病学调查

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中国动物检疫 2014年第11期31卷 63-65页

作者：崔基贤王靖飞谷志大辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁省动物医学研究院辽宁沈阳110164 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/疫病诊断中心黑龙江哈尔滨50001

2014年3月9-17日,辽宁省北镇市和黑山县的两个养羊户发生小反刍兽疫,为了解疫情来源并评估疫点向外传播疫病的风险,开展本次调查。调查发现本次发病局限于2户羊群中,在总共67只羊中检出24只PPR疑似病例,其中11只死亡。经临床和实验室诊... 详细信息

2014年3月9-17日,辽宁省北镇市和黑山县的两个养羊户发生小反刍兽疫,为了解疫情来源并评估疫点向外传播疫病的风险,开展本次调查。调查发现本次发病局限于2户羊群中,在总共67只羊中检出24只PPR疑似病例,其中11只死亡。经临床和实验室诊断,该起疫情被确定为输入性小反刍兽疫;来源追踪分析显示发病羊来自S省某活羊交易市场;扩散风险评估结果表明,该起疫情向周围羊场扩散的风险较低。

关键词：小反刍兽疫流行病学调查扩散风险评估辽宁

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兽医工作在“同一健康”实践中的作用与地位

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中国动物检疫 2014年第4期31卷 37-40页

作者：崔基贤王靖飞王幼明谷志大辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁省动物医学研究院辽宁沈阳110164 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

"同一健康"理念和方法着眼于人类、动物和环境健康的联系,强调跨学科、跨领域、跨部门、跨区域的共同协作,考虑的是通过改善环境来降低人和动物传染病或慢性病的发病和传播扩散风险。该理念已经被联合国粮农组织(FAO)、世界... 详细信息

"同一健康"理念和方法着眼于人类、动物和环境健康的联系,强调跨学科、跨领域、跨部门、跨区域的共同协作,考虑的是通过改善环境来降低人和动物传染病或慢性病的发病和传播扩散风险。该理念已经被联合国粮农组织(FAO)、世界动物卫生组织(OIE)和世界卫生组织(WHO)等国际组织以及部分国家机构和跨学科专业团体看作疫病预防控制策略的主要构成元素。本文以国际化视野,从兽医的角度阐释"同一健康"理念,分析兽医工作在"同一健康"实践中的作用与地位。

关键词：同一健康兽医工作作用地位

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猪源凋亡相关基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立

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中国预防兽医学报 2013年第5期35卷 369-373页

作者：李玉明王刚汪志艳刘永刚涂亚斌王淑杰姜成刚王延群蔡雪辉东北农业大学黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001

为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标... 详细信息

为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因的SYBR Green I qRT-PCR方法。结果显示,该方法线性关系好(R2≥0.998),敏感性高,初始模板的检出下限为10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,批内、批间重复试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性。本研究为细胞凋亡相关因子变化趋势的研究提供方法。

关键词：猪凋亡相关基因荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ

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猪全血中IFN-γ、IL-2、TNF-αTaqMan定量RT-PCR方法的建立及对猪瘟疫苗的免疫评价

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中国预防兽医学报 2013年第2期35卷 164-168页

作者：汪志艳刘永刚王刚石文达武嘉男涂亚斌姜成刚何玉利韩梓峰李玉明王延群蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030

为建立猪相关细胞因子的检测方法,本研究针对GenBank中猪IFN-γ、IL-2、TNF-α的基因设计特异性引物和荧光探针,建立了这3种细胞因子TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,建立的检测方法在101～109拷贝/μL模板范围内具有良好的线... 详细信息

为建立猪相关细胞因子的检测方法,本研究针对GenBank中猪IFN-γ、IL-2、TNF-α的基因设计特异性引物和荧光探针,建立了这3种细胞因子TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,建立的检测方法在101～109拷贝/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数R2均高达0.999。利用该方法对猪瘟(CSF)活疫苗进行细胞免疫评价,结果显示,CSF疫苗免疫组猪瘟病毒(CSFV)刺激细胞相对于空白对照细胞,IFN-γ、IL-2、TNF-αmRNA表达量在免疫后3 d～10 d之间均显著升高(p<0.05),而IFN-γ在14 d仍保持高水平表达;对照组CSFV刺激细胞和空白对照细胞的3种细胞因子表达量均无明显差异(p>0.05)。以上结果表明,该方法具有高度的特异性、敏感性和重复性,对不同疫苗的细胞免疫反应评价是可靠的。

关键词：全血细胞免疫评价 IFN-γ、IL-2、TNF-α TaqMan定量RT-PCR 猪瘟活疫苗

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一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体PCR方法的建立

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中国兽医杂志 2013年第9期49卷 18-20,23页

作者：文辉强刘永刚石文达武嘉男姜成刚张交儿蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断及技术服务中心黑龙江哈尔滨150001

本试验目的是建立一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法。根据GenBank上猪嗜血支原体16S rRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列... 详细信息

本试验目的是建立一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法。根据GenBank上猪嗜血支原体16S rRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列同源性97.57%。特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法对猪肺炎支原体、大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌无交叉反应;血液基因组DNA最小检出量为0.75fg/μL。该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。

关键词：猪嗜血支原体 PCR 16S rRNA基因

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牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定

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中国预防兽医学报 2013年第10期35卷 845-848页

作者：王延群张璐李玉明汪志艳金家民刘永刚王刚王淑杰姜成刚涂亚斌蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SD... 详细信息

为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件。结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1%甲醇浓度诱导,诱导72 h。上清中目的蛋白表达量最高可达200μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础。

关键词：牛IFN-α 毕赤酵母分泌表达

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果子狸呼肠孤病毒结构的冷冻电镜三维重构

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中国预防兽医学报 2013年第6期35卷 440-443页

作者：孙伟邵昱昊杨崇文朱平王靖飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物疫病诊断与技术服务中心/禽病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101

为建立呼肠孤病毒(RV)的三维模型,本研究利用冷冻电镜(cryo-EM)单颗粒三维重构技术获得了分辨率为10.6A的果子狸RV M PC/04株的三维结构。三维重构结果显示,果子狸RV M PC/04株具有哺乳动物RV典型的形态。该病毒由内外两层衣壳蛋白组成... 详细信息

为建立呼肠孤病毒(RV)的三维模型,本研究利用冷冻电镜(cryo-EM)单颗粒三维重构技术获得了分辨率为10.6A的果子狸RV M PC/04株的三维结构。三维重构结果显示,果子狸RV M PC/04株具有哺乳动物RV典型的形态。该病毒由内外两层衣壳蛋白组成,呈二十面体对称结构。内衣壳的外面包裹着一层由200个μ13σ33异源六聚体复合物构成的外衣壳,三角形剖分函数T=13。同时我们还观察到了该病毒主要蛋白之间的连接方式。本研究探讨为不同宿主的RV的形态和结构比较研究提供了相关的数据。

关键词：果子狸呼肠孤病毒冷冻电镜三维重构

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环洞庭湖地区主要活禽批发市场H9亚型禽流感的监测

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中国兽医科学 2013年第5期43卷 466-469页

作者：黄建龙邓国华范仲鑫王昌建何世成汪洪冰邱立新鲁杏华刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410007 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了解环洞庭湖地区主要活禽批发市场H9亚型禽流感的分布和流行情况,科学制定H9亚型禽流感的防控措施,2009-2011年冬春季节,对环洞庭湖地区主要活禽批发市场H9亚型禽流感进行系统的监测。结果显示,2009年、2010年和2011年活禽批发市场... 详细信息

为了解环洞庭湖地区主要活禽批发市场H9亚型禽流感的分布和流行情况,科学制定H9亚型禽流感的防控措施,2009-2011年冬春季节,对环洞庭湖地区主要活禽批发市场H9亚型禽流感进行系统的监测。结果显示,2009年、2010年和2011年活禽批发市场中家禽H9亚型禽流感病毒分离率分别为5.2%、14.3%和15.0%,呈上升趋势。在鸡、鸭、鹅拭子中都检测到H9亚型禽流感病毒,其中鸡拭子H9亚型禽流感隐性带毒最为严重,高达23.6%。对部分分离的病毒进行测序分析,都属于CK/BJ/1/94亚系。提示环洞庭湖地区主要活禽批发市场H9亚型禽流感防控形势严峻。

关键词：活禽批发市场 H9亚型禽流感监测

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