检索结果-内蒙古大学图书馆

表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组病毒免疫及强毒攻击后外周血T淋巴细胞亚群的动态

中国预防兽医学报 2006年第5期28卷 535-538页

作者：智海东王云峰孙永科张晶王玫彭金美刘永刚童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 西北农林科技大学动物医学系陕西杨凌712100

采用流式细胞检测技术对表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)、新城疫弱毒疫苗以及传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫和传染性喉气管炎以及新城疫强毒攻击后外周血T细胞表型亚类(CD4+、CD8+、TCRγδ+)的... 详细信息

采用流式细胞检测技术对表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)、新城疫弱毒疫苗以及传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫和传染性喉气管炎以及新城疫强毒攻击后外周血T细胞表型亚类(CD4+、CD8+、TCRγδ+)的变化动态进行监测。重组疫苗和禽痘疫苗免疫之后,CD8+和TCRγδ+的细胞数先升高后回落;在NDV强毒攻击之后,ND疫苗免疫组的TCRγδ+数量升高,rFPV-gB-F免疫组的三种细胞数量在第1周都下降,随后升高;ILT疫苗在免疫后的第1周,CD4+细胞数量下降。结果提示rFPV-gB-F可以诱发相应的细胞免疫应答,但是有关传染性喉气管炎病毒导致的细胞免疫需要进一步的研究。

关键词：传染性喉气管炎新城疫重组禽痘病毒外周血T淋巴细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达禽流感病毒H5HA、H7HA基因DNA疫苗的免疫原性研究

引用

中国预防兽医学报 2006年第1期28卷 1-5页

作者：张芳芳姜永萍刘光亮陈怀涛乔传玲陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 甘肃农业大学甘肃兰州730070

为研究双顺反子DNA疫苗对禽流感病毒(AIV)的保护作用,将H5和H7亚型AIV的HA基因克隆到同一表达载体上,构建了双顺反子HA基因表达质粒pCI-H5HA-H7HA。以此质粒肌注免疫4周龄SPF鸡,首次免疫后3周加强免疫,同时设pCI-H5HA和pCI-H7HA联合免... 详细信息

为研究双顺反子DNA疫苗对禽流感病毒(AIV)的保护作用,将H5和H7亚型AIV的HA基因克隆到同一表达载体上,构建了双顺反子HA基因表达质粒pCI-H5HA-H7HA。以此质粒肌注免疫4周龄SPF鸡,首次免疫后3周加强免疫,同时设pCI-H5HA和pCI-H7HA联合免疫组及空白对照组,每周采血用微量血凝抑制法检测HI抗体。加强免疫后3周分别以100LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)和A/FPV/Rostock/34(H7N1)进行致死性攻击。结果显示各免疫组均可刺激鸡体产生H5、H7特异性抗体,pCI-H5HA-H7HA诱导产生的抗体对H5N1和H7N1的攻毒保护分别为50%和10%,而pCI-H5HA和pCI-H7HA联合免疫的攻毒保护均为70%。表明双顺反子质粒可诱导鸡产生较好或一定的保护,但免疫效果不够理想,推测与DNA的摄取及其体内表达有关,可望通过调整DNA疫苗的多种因素提高免疫效果。

关键词：禽流感 H5亚型 H7亚型 HA基因 DNA疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA在乳酸乳球菌中的克隆与表达

引用

中国预防兽医学报 2006年第3期28卷 271-274页

作者：张莉秦泽荣崔尚金何召庆刘尚高北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100089 中国农业大学动物医学院北京100094 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

用PCR技术特异扩增了柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-TA4,采用KpnⅠ/SacⅠ双酶切法及PCR确认正确后,将TA4基因cDNA目的片段亚克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36n中,电穿孔法转化乳酸乳球菌LM0... 详细信息

用PCR技术特异扩增了柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-TA4,采用KpnⅠ/SacⅠ双酶切法及PCR确认正确后,将TA4基因cDNA目的片段亚克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36n中,电穿孔法转化乳酸乳球菌LM0230,获得重组质粒pMG36n-TA4,采用KpnⅠ/SacⅠ双酶切法及DNA测序证明cDNA序列完全正确。获得TA4乳酸乳球菌表达株,经SDS-PAGE电泳分析,结果表明表达产物与预期大小的TA4蛋白分子量一致。

关键词：柔嫩艾美耳球虫 TA4抗原基因cDNA 乳酸乳球菌克隆与表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

IS711和omp2作为布氏杆菌种属及种株间分子鉴别诊断标记的研究

引用

中国预防兽医学报 2006年第6期28卷 676-680页

作者：陈伟业胡森黄克和步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

布氏杆菌为世界性具重要公共卫生意义的人兽共患疫病原,分6个种。建立种间及种株间安全敏感、经济有效的快速鉴别诊断方法对布病防制及分子流行病学研究具有重要意义。布氏杆菌IS711和omp2基因具有种属特异性,可用于布氏杆菌的PCR分子... 详细信息

布氏杆菌为世界性具重要公共卫生意义的人兽共患疫病原,分6个种。建立种间及种株间安全敏感、经济有效的快速鉴别诊断方法对布病防制及分子流行病学研究具有重要意义。布氏杆菌IS711和omp2基因具有种属特异性,可用于布氏杆菌的PCR分子诊断。其中IS711为转座因子,在不同种布菌种存在插入位置的多态性,外膜蛋白OMP2编码基因则存在反向重复序列及种株间的多态性。为此,分别采用复式—PCR、PCR和限制性酶切片段长多态性(RFLP)分析,对分属于***、***和***的不同种布氏杆菌的不同种株,M5、M16、S2、S6和S19进行分子鉴别诊断。结果显示,根据IS711基因特定PCR扩增片段长多态性,可进行布氏杆菌种间的快速鉴别；而omp2编码基因PCR扩增片段PstⅠ、KpnⅠ、NcoⅠ和Eco47Ⅲ等4种限制酶片段长多态性,则可成为布氏杆菌菌株间特异的分子鉴别诊断标记,甚至疫苗株M5和野毒株M16之间的分子诊断标记。

关键词：布氏杆菌分子标记,IS711 omp2 限制性酶切片段长多态性(RFLP)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同亚型禽流感病毒在MDCK细胞上的生长特性

引用

中国兽医杂志 2006年第10期42卷 18-20页

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰田国彬孙凯魏萍中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030

禽流感(avian influenza,AI)是由正粘病毒科A型流感病毒(avian influenza virus,AIV)引起的禽类传染病。高致病力禽流感(HPAI)可引起禽类100%死亡,在世界范围内多次暴发,2004年年初HPAI再次在包括我国在内的一些亚洲国家暴发流行,但得... 详细信息

禽流感(avian influenza,AI)是由正粘病毒科A型流感病毒(avian influenza virus,AIV)引起的禽类传染病。高致病力禽流感(HPAI)可引起禽类100%死亡,在世界范围内多次暴发,2004年年初HPAI再次在包括我国在内的一些亚洲国家暴发流行,但得到了很好的控制,7月份在泰国和我国的安徽省HPAI又有发生;低致病力禽流感(LPAI)一般不致鸡只死亡,但可以导致鸡产蛋量下降,同样制约着养禽业的发展,所以研究快速有效的诊断方法已刻不容缓。而且许多学者对MDCK细胞用于制作人流感疫苗作了大量研究。[第一段]

关键词： MDCK细胞禽流感病毒生长特性高致病力禽流感亚型 A型流感病毒暴发流行 HPAI

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定

引用

中国预防兽医学报 2006年第6期28卷 701-704页

作者：丁良君李继昌周艳君付锐霍贵成张东玲东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 伊春市金山电区林业医院黑龙江伊春1500263

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM_2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM_2^-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM_2与载体蛋白偶联成功；经计算SM_2与HSA、OVA的结合比分别为9：1和15：1。利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5... 详细信息

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM_2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM_2^-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM_2与载体蛋白偶联成功；经计算SM_2与HSA、OVA的结合比分别为9：1和15：1。利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5次亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM_2抗体的杂交瘤细胞,经鉴定该单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgG_1,为入链,分子量为162Ku,染色体数目90条左右,亲和常数为6．1×10^(12)M^(-1)。与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应。

关键词：磺胺二甲嘧啶单克隆抗体酶联免疫吸附实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR法检测H5亚型禽流感病毒

引用

黑龙江畜牧兽医 2006年第11期 13-15页

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰孙凯魏萍中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

用2株不同致病力的H5亚型禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6,12,24,48,72 h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene RG3 000实时定量PCR仪对H5亚型AIV的HA基因进行检测,试图建立快速检测H5亚型AIV的real-time RT-PCR方法,并用所建立的方法对来自全国各地的疑似H5亚型AIV的病料和咽喉拭子、泄殖腔拭子346份进行检测。结果表明：农业部动物流感重点开放实验室建立的HA基因的teal-time RT-PCR方法可以检测到细胞培养物中和临床样品中是否含有H5亚型AIV,与常规RT-PCR比较,该方法更加特异、准确、快速。

关键词： real—time RT—PCR H5亚型禽流感病毒 HA基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鹅细小病毒vp基因片段的原核表达及抗血清的制备

引用

中国病毒学 2006年第6期21卷 581-584页

作者：卲昱昊王静王懂帅韩宗玺刘胜旺冉多良孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 甘肃省商业科技研究院甘肃兰州730020 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-... 详细信息

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-30a,阳性重组质粒经确证性序列测定,证明外源片断插入到pET-30a的预期位置。将其转入大肠杆菌BL21,经终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE表明外源基因获得表达,融合蛋白分子量约为34kDa。将诱导后的工程菌用6mol/L盐酸胍裂解,经超声处理后离心,利用镍离子亲和树脂对裂解产物的上清进行纯化。用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔制备兔抗该融合蛋白的抗血清。Westernblotting结果表明制备的兔抗血清与该融合蛋白及亲本病毒的结构蛋白都具有反应性。结合前期工作进展对GPVVP蛋白的B细胞线性抗原表位进行定位。

关键词：鹅细小病毒 vp基因片断原核表达抗血清

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪链球菌对红霉素耐药性的研究

引用

中国预防兽医学报 2006年第3期28卷 359-362页

作者：李艳华姜成刚蔡雪辉童光志刘娣佟恒敏中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江省农业科学院博士后工作站东北农业大学博士后流动站黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院药理教研室哈尔滨黑龙江150030

从发病猪体内分离、鉴定猪链球菌,采用肉汤稀释法和纸片琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌,用双纸片法确定耐药株的耐药表型,通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb/mefA。猪链球菌对红霉素的耐药表型为cMLS表型,即同时对克... 详细信息

从发病猪体内分离、鉴定猪链球菌,采用肉汤稀释法和纸片琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌,用双纸片法确定耐药株的耐药表型,通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb/mefA。猪链球菌对红霉素的耐药表型为cMLS表型,即同时对克林霉素耐药。在3株红霉素耐药株中扩增到ermb基因,其余未能检测到ermb或mefA基因。

关键词：猪链球菌红霉素耐药表型耐药基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组伪狂犬病毒(rPRV-GP5)对伪狂犬病最小免疫剂量的测定

引用

广西农业生物科学 2006年第B09期25卷 211-211,214页

作者：田志军金迪李国新周艳君仇华吉王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪病研究室黑龙江哈尔滨150001

伪狂犬病（Pseudorabies PR）是由伪狂犬病毒（PRV）引起的，可导致多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑髓炎为主要症状的急性传染病。猪是该病毒的中间宿主和传染源，感染后可引起妊娠母猪发生严重的繁殖障碍造成死胎、流产... 详细信息

伪狂犬病（Pseudorabies PR）是由伪狂犬病毒（PRV）引起的，可导致多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑髓炎为主要症状的急性传染病。猪是该病毒的中间宿主和传染源，感染后可引起妊娠母猪发生严重的繁殖障碍造成死胎、流产和木乃伊胎，患病仔猪表现为神经症状和呼吸道病，多以死亡告终。在规模化、集约化、现代化高密度养猪地区，PRV可在猪群问不断传播，是危害我国养猪业的一个重要传染病。用疫苗进行免疫接种是预防、甚至消灭伪狂犬病的根本措施。目前伪狂犬病疫苗在我国应用最多的是Bartha—K61株，该疫苗是20世纪60年代匈牙利Bartha等人将野毒株用鸡胚成纤维细胞反复传代而获得的一个人工致弱疫苗株，该毒株呈现gE-基因缺失表型，其毒力大大减弱，免疫原性很好，是世界上公认的优良疫苗株。我们以Bartha—K61株为载体构建了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）CH—1a株GP5基因的重组伪狂犬病病毒（rPRV—GP5），但GP5基因的插入是否会改变伪狂犬病病毒Bartha—K61株对伪狂犬病的免疫保护效力？为此本研究通过测定重组伪狂犬病毒（rPRV—GP5）对伪狂犬病的最小免疫剂量，评价rPRV—GP5对伪狂犬病的保护效力。24只5～6月龄PRV阴性健康绵羊随机分成6组，每组4只，其中1组为生理盐水对照组，其余5组分别后腿肌注重组伪狂犬病毒（rPRV—GP5）冻干疫苗（病毒含量为5×10^6.0TCID50／mL）5×10^4.0TCID50／只、5×10^3.0TCID50／只、5×10^2.0TCID50／只、5×10^1.0TCID50／只和5TCID50／只，免疫后15d每只绵羊肌注伪狂犬病毒猪源强毒S株1000LD50。结果表明：对照组和5TCID50／只组的全部绵羊攻毒后4～5d均出现典型伪狂犬病症状并死亡，5×10^1.0TCID50／只组4只绵羊中有2只发病并死亡，其余各组全部保护。结论：重组伪狂犬病毒（rPRV—GP5）对绵羊最小免疫剂量为100TCID50／只，GP5基因的插入没有影响伪狂犬弱毒疫苗Bartha—K61株的免疫原性。

关键词：重组伪狂犬病病毒最小剂量保护

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：