检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 144-146页

作者：崔尚金李建伟金红李海燕唐秀英于康震王秀荣刘尚高 Y Guan K F Shortridge M Deries 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 国家动物流感中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094 香港大学微生物系

病毒生态学与分子进化是一门新兴的学科 ,研究病毒在各种环境中的关系 ,可以为今后病毒的研究与防治奠定基础。本研究首次详细对我国 14株鸭、鸡等禽流感和马、猪等动物的流感病毒的生态学与分子进化进行了分析研究 ,初步摸清了这些病... 详细信息

病毒生态学与分子进化是一门新兴的学科 ,研究病毒在各种环境中的关系 ,可以为今后病毒的研究与防治奠定基础。本研究首次详细对我国 14株鸭、鸡等禽流感和马、猪等动物的流感病毒的生态学与分子进化进行了分析研究 ,初步摸清了这些病毒在我国的流行与进化情况 ,为今后流感病毒疫苗的应用奠定了理论基础。

关键词：中国 H3亚型流感病毒生态学分子进化

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兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2002年第5期24卷 321-324页

作者：刘怀然陈洪岩关云涛王云峰李昌文夏长友张立成中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江省实验动物质量监督检验站黑龙江哈尔滨150001 兽医生物技术国家重点实验室西北农林科技大学畜牧兽医学院

自感染RHDV致死的兔肝脏组织中提纯病毒 ,提取病毒总RNA ,以RT_PCR方法扩增得到RHDVVP6 0基因全长片段 ,克隆到T载体中 ,经酶切分析及PCR鉴定后进行序列测定。同一毒株不同克隆产物进行 3次测序 ,测序结果已输送到GeenBank中 (注册号为A... 详细信息

自感染RHDV致死的兔肝脏组织中提纯病毒 ,提取病毒总RNA ,以RT_PCR方法扩增得到RHDVVP6 0基因全长片段 ,克隆到T载体中 ,经酶切分析及PCR鉴定后进行序列测定。同一毒株不同克隆产物进行 3次测序 ,测序结果已输送到GeenBank中 (注册号为AF45 376 1)。将测得序列与GeneBank中记录的RHDV不同分离株进行比较。比较结果表明 :各毒株间核苷酸的同源性为 91%～ 98% ,氨基酸同源性为 94%～ 99% ,氨基酸变异多发生在高变区 ,进一步证明了毒株的高度保守性 ,为明确我国RHDV地方株VP6 0蛋白的分子特征。

关键词：兔出血症病毒衣壳蛋白 VP60 基因克隆序列分析

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鸡传染性支气管炎病毒的快速检测

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中国预防兽医学报 2002年第5期24卷 386-390页

作者：刘思国康丽娟江国托刘明春孔宪刚杨宏伟刘忠贵李从寿宋春青霍兰享卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 大连市畜牧兽医技术服务中心大连三仪生物工程研究所沈阳农业大学畜牧兽医学院吉林省畜禽总公司东北农业大学动物医学院四川省西南民族学院天津市西青区王稳庄镇兽医站天津市西青区南河镇畜牧兽医站

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法。通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明 ,两次PCR产物的大小为 0 .7kb和 0 .5kb ,与实际设计相符。而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性。用IBV... 详细信息

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法。通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明 ,两次PCR产物的大小为 0 .7kb和 0 .5kb ,与实际设计相符。而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性。用IBVHB(华北 )株感染SPF鸡后 ,应用我们所建立的PCR方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的IBV ,在SPF鸡感染IBV后的 2 1天仍然能够检测到IBV的基因组 ,Southernblot杂交试验证明了我们获得的PCR产物为IBV的核蛋白基因。对 30份自然感染病料的检测表明 ,本实验所建立的PCR方法检测阳性数为 15份 ,阳性率为 5 0 % (15 /30 ) ;鸡胚接种检测的阳性数为 17份 ,阳性率为 5 6 .7% (17/30 ) ;IFA检测的阳性数为 11份 ,阳性率为 36 .7% (11/30 )。PVR检测法与鸡胚接种方法的阳性符合率为 93.3% (14/15 ) ,统计学分析表明 ,P >0 .0 5 ,差异不显著 ,而PCR检测法与IFA的阳性符合率为 6 0 % (9/15 )。结果证明本实验所建立的PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒快速检测

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鸽源新城疫病毒的分离与鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2002年第5期 22-22页

作者：熊永忠王秀荣曹殿军刘培欣张勇东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

实验从疑为新城疫或禽流感发病的鸽群中分离到一病毒性病原,该病原具有血凝活性,通过电镜观察、血凝抑制试验、RT-PCR等一系列试验确定引起该鸽群发病的是新城疫病毒.现报告如下.

关键词：鸽新城疫病毒分离鉴定

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我国禽流感防制研究进展

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中国兽医学报 2001年第1期21卷 103-106页

作者：于康震付朝阳崔尚金步志高唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单.禽流感可表现为亚临床、轻度呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死性疾病等多种形式... 详细信息

行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单.禽流感可表现为亚临床、轻度呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死性疾病等多种形式.世界各地历次由特定毒株引起的禽流感的暴发和流行,均招致禽只的大量死亡和生产性能急剧下降,造成了巨大的经济损失[1].1997年香港H5N1和1999年内地和香港H9N2禽流感感染人事件的发生,更突出地显示了禽流感的公共卫生意义.

关键词：禽流行性感冒流行病学诊断技术疫苗防制中国

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鸡CD4蛋白基因的克隆及其mRNA在淋巴器官中的表达

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中国兽医学报 2001年第5期21卷 482-484页

作者：刘胜旺孔宪刚丁忠庆刘永刚童光志马云燕中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ... 详细信息

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ,法氏囊淋巴细胞不表达鸡 CD4分子 m RNA,其他器官中均有表达。通过序列分析表明 ,本试验扩增得到的基因为编码鸡

关键词： CD4基因克隆mRNA 淋巴器官表达鸡

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H9亚型禽流感病毒分离株A/Chick/Shandong/6/96的基因序列分析

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中国兽医科技 2001年第11期31卷 23-25页

作者：李建伟崔尚金于康震金红唐秀英孟庆文田国斌刘宝全 Y.Guan K.F.Shortridge J.S.M.Peiris 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感中心黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150001 香港大学微生物系

对 1株H9N 2亚型禽流感病毒 (AIV)A/Chick/Shandong/ 6/ 96(H9N2 )进行了全病毒基因序列分析。结果表明 ,该毒株 8个基因的核苷酸序列皆与 1994年分离株A/Chicken/Beijing/ 1/ 94(H9N2 )具有很高的同源性 (96.0 %—98.6% ) ;推导其血凝... 详细信息

对 1株H9N 2亚型禽流感病毒 (AIV)A/Chick/Shandong/ 6/ 96(H9N2 )进行了全病毒基因序列分析。结果表明 ,该毒株 8个基因的核苷酸序列皆与 1994年分离株A/Chicken/Beijing/ 1/ 94(H9N2 )具有很高的同源性 (96.0 %—98.6% ) ;推导其血凝素 (HA)裂解位点处的氨基酸序列为A R S S R ,完全符合H9AIV欧亚分支中的类A/Chicken/Beijing/ 1/ 94亚分支的特征 ;虽然其神经氨酸酶 (NA)基因与A/Chicken/Beijing/ 1/ 94(H 9N2 )相比 ,出现了 9个核苷酸的缺失 ,然而其同源性仍然较高 ,为 97.3 % ;而与欧亚分支中的类A/Chicken/Korea/ 3 2 3 / 96和类A/Quail/HongKong/G1/ 97亚分支的同源性却相对较低 ,分别为 92 .0 %和 84.2 % ;其它基因的比较情况也大体相近。提示该毒株是由 1994年分离株进化而来 ,在遗传演化上属于H9亚型流感病毒欧亚分支中的类A/Chicken/Beijing/ 1/ 94(H9N2 )亚分支。

关键词：禽流感病毒基因序列分析 H9N2亚型分离株

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鸡贫血病病毒长春株VP3基因的克隆及序列分析

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中国兽医学报 2001年第6期21卷 546-548页

作者：宋秀龙章金刚常国权陈奖励中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 解放军军需大学动物科技系吉林长春130062

采用 PCR扩增方法成功克隆了鸡贫血病病毒 (CAV)长春分离株的 VP3基因 ,并进行了核苷酸序列测定。通过与 TK5 80 3、SJ1株进行序列比较 ,发现长春分离株 VP3基因与 TK5 80 3仅有 1个碱基差异 ,而氨基酸序列完全相同 ;与山东 SJ1株有 3... 详细信息

采用 PCR扩增方法成功克隆了鸡贫血病病毒 (CAV)长春分离株的 VP3基因 ,并进行了核苷酸序列测定。通过与 TK5 80 3、SJ1株进行序列比较 ,发现长春分离株 VP3基因与 TK5 80 3仅有 1个碱基差异 ,而氨基酸序列完全相同 ;与山东 SJ1株有 3个碱基差异和

关键词：鸡贫血病病毒 VP3基因基因克隆序列分布

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传染性法氏囊病病毒超强毒株F9811VP_2基因的克隆及序列分析

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中国兽医学报 2001年第3期21卷 223-226页

作者：宋秀龙李春梅王笑梅陈冠春陈奖励王秀荣中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 延边大学农学院动物医学系吉林龙井133400

根据 NCBIG Gene Bank记载的传染性法氏囊病病毒超强毒 ( vv IBDV) OKYM株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对特异性扩增 IBDV主要宿主保护性抗原 VP2 基因的引物。从 IBDV F981 1感染发病鸡法氏囊组织中提取病毒 RNA,经 RT-PCR扩增出约 1 .... 详细信息

根据 NCBIG Gene Bank记载的传染性法氏囊病病毒超强毒 ( vv IBDV) OKYM株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对特异性扩增 IBDV主要宿主保护性抗原 VP2 基因的引物。从 IBDV F981 1感染发病鸡法氏囊组织中提取病毒 RNA,经 RT-PCR扩增出约 1 .5kb的基因片段 ,采用平端连接法将此基因片段克隆至p UC1 1 9质粒的 Sma 位点上。经核苷酸序列测定 ,并与国内外其他 vv IBDV VP2 基因序列进行比较分析 ,发现 F981 1与 OKYM在 VP2 基因上有 1 8个核苷酸不同 ,但在氨基酸序列上仅 2 1 2位存在差异 ,从而从分子生物学角度证明 F981 1为 vv IBDV。对 1 4 3～ 3 82氨基酸区域所作系统进化树分析表明 ,F981 1、G92 0 1与OKYM、UK661、HK4 6相近 ,而 F950 2、G93 0 3与 OKYM、U K661、HK4 6较远 ,说明我国存在许多不同的vv

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株基因克隆序列分析

来源：评论

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鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因重组真核表达载体的构建

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中国兽医学报 2001年第1期21卷 14-16页

作者：刘思国康丽娟江国托孔宪刚卢中冶刘忠贵卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林省农安县动检站吉林农安130200 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

将已经序列测定的鸡传染性支气管炎病毒 ( IBV) HB株的核蛋白基因亚克隆到表达载体 pc DNA3的Kpn 酶切位点 ,快速筛选鉴定出含有 HB核蛋白基因的重组质粒 ,经酶切、PCR及 Southern鉴定为正向插入了 HB核蛋白基因 ,将其命名为 pc DNA-N... 详细信息

将已经序列测定的鸡传染性支气管炎病毒 ( IBV) HB株的核蛋白基因亚克隆到表达载体 pc DNA3的Kpn 酶切位点 ,快速筛选鉴定出含有 HB核蛋白基因的重组质粒 ,经酶切、PCR及 Southern鉴定为正向插入了 HB核蛋白基因 ,将其命名为 pc DNA-N。对重组质粒进行大量扩增 ,应用聚乙二醇纯化后 ,对 SPF雏鸡进行了免疫攻毒试验 ,结果表明 ,IBV核蛋白在抗感染和抗致死方面具有一定的作用。

关键词：传染性支气管炎病毒核蛋白基因重组真核表达质粒基因免疫载体构建

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